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    一株蘇云金芽孢桿菌新菌株及其應用制造技術

    技術編號:12948937 閱讀:149 留言:0更新日期:2016-03-02 10:17
    本發明專利技術提供了一種蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)新菌株BN23-5,保藏號為CGMCCNo.9448。通過對BN23-5的毒力活性測試表明,BN23-5對鱗翅目等,具有極高的毒力。可以將本發明專利技術蘇云金芽孢桿菌BN23-5制成殺蟲劑,用于重要農作物害蟲的防治。從而使蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑的產品多樣化和系列化,擴大了蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑的使用范圍,降低農藥的使用量,減少環境污染,具有重要的經濟價值和應用前景。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及一種微生物新菌株及其應用,具體地說是一種蘇云金芽抱桿菌及其在 農業蟲害防治中的應用。
    技術介紹
    在人類生產過程中,蟲害是造成農業生產損失及影響人類健康的重要因素。據FA0 統計,全世界農業生產每年因蟲害造成的經濟損失高達14%,病害損失達12%,草害損失達 11%。損失額高達1260億美元,相當于中國農業總產值的一半,英國的4倍多。為了減少送 些損失,多年來,對農作物害蟲及蚊蟲普遍采用化學防治手段進行防治,但由于化學農藥的 長期、大量使用,造成了對環境的污染,農副產品中農藥殘留量增加,給人類的生存和健康 帶來了危害。此外,化學農藥在殺滅害蟲的同時,也殺傷了天敵及其它有益物,破壞了生態 平衡。與化學防治相比,生物防治具有安全、有效、持久的特點。并且避免了化學防治帶來 的一系列問題。因此,生物防治技術成了人們研究的熱點。在生物殺蟲劑中,蘇云金芽抱桿 菌是目前世界上用途最廣、產量最大的一類微生物殺蟲劑。 蘇云金芽抱桿菌iAyrin知eftsis,簡稱Bt)是一種革蘭氏陽性細菌,它 的分布極為廣泛,在芽抱形成的同時可形成具有殺蟲活性的由蛋白質組成的伴胞晶體,又 名殺蟲晶體蛋白(Insectididalciystalproteins,簡稱ICPs),ICPs是由基因編碼 的,對敏感昆蟲有強烈毒性,而對高等動物和人無毒性。近幾十年來,Bt已廣泛應用于控制 多種鱗翅目、雙翅目、銷翅目等害蟲。此外,化還對膜翅目、同翅目、直翅目、食毛目等多種 害蟲及植物病原線蟲、瞞類、原生動物有控害作用。目前在農田害蟲、森林害蟲及衛生害蟲 的防治中化已成為化學合成農藥的有力替代品,化還是轉基因抗蟲工程植物重要的基因 來源。 自1981年Schnepf從菌株皿-IDipel中克隆了第一個能表達殺蟲活性的基因W 來(AdangM.JeiCharacterizedfull-lengthandtruncatedplasmidclonesof thecrystalproteinofBacillusthuringiensissubsp.kurstakiHD-73andtheir toxicitytoManducasexta,Gene, 1985,36 (3) :289 ~300.),人們已經分離克隆了 700多種編碼殺蟲晶體蛋白的基因,根據編碼的氨基酸序列同源性它們被分別確定為不同 的群、亞群、類和亞類(CrickmoreN,ZeiglerDR,FeitelsonJ,efRevisionof thenomenclaturefortheBacillusthuringiensispesticidalcrystalproteins. MicrobiolMolBiolRev, 1998, 62:807-813;ht1:p://www.biols.susx.ac.uk/Home/Neil_ 化ickmore/Bt/)。一般而言,化yl,化y2和化y9等毒蛋白對鱗翅目害蟲有效;其中研究的 最多的是化yl和化y9類蛋白,它們編碼的殺蟲晶體蛋白分子量為130-140kD,許多基因目 前已被廣泛應用于植物的鱗翅目害蟲的防治化ozie,M.G.,Beland,G.L.,Bowman, C.,etal.Fieldperformanceofelitetransgenicmaizeplantsexpressingan insecticidalproteinderivedfromBacillusthuringiensis.Bio/Technology, 1993, 11:194-200 ;Perlak,F.J. ,Deaton,R.W. ,Armstrong,T.k.etal.Insect resistantcottonplants,bio/technology,1990 ;8:939-943;VanFrankenhuyzen,K.,Gringorten,L.,andGauhier,D. 1997.Cry9Caltoxin,aBacillusthuringiensis insecticidalcrystalproteinwithhighactivityagainstthesprucebudworm (Choristoneurafnniferana).Appl.Environ,Microbviol. 63:4132-4134;王飛,2001, 蘇云金芽抱桿菌特異菌株生物學特性及cr抑新基因的研究,碩±論文,南開大學)。蘇云 金芽胞桿菌W色列亞種化subsp. 簡稱Bti)產生的毒素 蛋白對蚊蟲具有很好殺蟲活性,被廣泛運用于蚊蟲的防治(Gol化ergLJ,andMargalit J, 1977.Abacterialsporedemonstratingrapidlarvicidalactivityagainst Anophelessergentii,Uranotaeniaunguicul過t過,Culexunivit過ttus,Aedesaegypti, andO;知x/7攻ie/7公·MosqitoNews,37: 355-358; )〇同時,切t蛋白具有溶細胞性,對某 些化y蛋白具有增效作用及延緩昆蟲的抗性(Wu,D·,Johnson,J.J·,andFederici, B.A. 1994.SynergismofmosquitocidaltoxicitybetweenCytAandCrylVDProteins usinginclusionsproducedfromclonedgenesofBacillusthuringiensis.Mol. Microbiol. 13:965-972;Wirth,M.C·,Georghiou,G.P·,andFedereci,B.A. 1997. CytAenablesCryIVendotoxinsofBacillusthuringiensistoovercomehighlevels ofCryIVresistanceinthemosquito,Culexquinquefasciatus.Proc.Natl.Acad. Sci. 94: 10536 - 10540)。自本世紀初發現蘇云金芽胞桿菌至今己有100多年的歷史,在農作物和園藝植物 害蟲、森林害蟲W及衛生害蟲的防治方面得到廣泛的應用,也起到良好的效果。但是,由于 大規模和反復使用蘇云金芽胞桿菌,許多昆蟲種群己相繼在不同程度上對殺蟲晶體蛋白 產生了抗性。WBt殺蟲晶體蛋白為基礎的殺蟲劑的使用已有50多年的歷史,最初一直 沒有檢測到昆蟲對Bt的抗性,但是,上世紀80年中期開始,抗性問題不斷在實驗室及田 間試驗中得到證實(McGau組ey,W.比 1985.Insectresistanceto化Θbiological insecticide齡以分做· Science. 229:193-195),原因主要是持續使用單 品種及亞致劑量的BtW及Bt轉基因抗蟲植物的應用造成昆蟲種群長期受到殺蟲劑的選擇 壓力。1985年,McGau組ey報道倉庫谷物害蟲印度谷喚(Plodiainterpunctella)在Dipel 化tsubsp.kursta化皿-1的商本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    蘇云金芽孢桿菌(Bacillus?thuringiensis)BN23?5,保藏號為CGMCC?No.9448。

    【技術特征摘要】

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:鄭愛萍余宗蘭陳磊王娜李巧李平王玲霞劉懷年李雙成朱軍鄧其明王世全
    申請(專利權)人:四川農業大學
    類型:發明
    國別省市:四川;51

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