一種原料藥連翹苷的質量檢測方法技術

本發明專利技術公開了一種原料藥連翹苷的質量檢測方法，包括1)鑒別連翹苷、2)測定連翹苷含量、3)有關物質檢測。本發明專利技術方法主要用于連翹苷原料藥及其制劑的質量控制，具有簡便、穩定、重復性好的特點，有利于提高檢驗效率，確保了連翹苷原料藥和制劑的治療效果。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種中草藥的檢測方法，尤其涉及一種連翹苷藥材的質量檢測方法。
技術介紹
感冒是一種常見病、多發病，臨床可分為流行性感冒（即流感）和普通感冒兩種， 其病因80%以上是由于上呼吸道病毒感染引起。普通感冒癥狀較輕，一般不會引起其他疾 病，且有自愈性；流感則容易引起病毒變異，并可能導致病毒性肺炎、病毒性心肌炎等疾病。 流感嚴重時，可致人昏迷、抽搐、甚至死亡，故流感對人體的危害較大。因此，對流感的治療 亟待解決。 中草藥具有抑制流感病毒復制、阻止病毒致細胞病變、調節免疫功能、改善肺循 環、鎮痛抗炎等綜合功效，可使流感痊愈。因此，中藥及天然藥物在防治流感方面具有獨特 的優勢和廣闊的發展前景。中藥因具有廣泛的藥理作用，且毒副作用小，愈來愈引起國內外 藥理學家、生物學家和化學家們的興趣，成為研究熱點。美國學者從150余種植物水或醇提 取物中，發現20余種植物含有顯著抗流感病毒的物質。保加利亞學者發現紅花老鶴草甲 醇提取物中多酚復合物可抑制流感病毒。俄羅斯學者從傘形科獨活屬植物果實揮發油中發 現有抗甲型和乙型流感病毒的有效成分。日本學者從黃芩的根和葉的黃酮類提取物中、從 日本五針松多酚類提取物中，以及從魚腥草的蒸餾液中皆提取到流感病毒抑制物。但目前 這些物質皆尚處于未純化狀態。我國學者在80年代大規模普查中，篩選出一批對流感病 毒有明顯抑制作用的中草藥：如金銀花、連翹、板藍根、大青葉、黃芪、黃芩、柴胡、魚腥草、 鵝不食草、葛根、防風等50余種。近年來我國學者用現代科技方法先后對其中一些中草藥 進行了深入研究，發現許多中草藥不僅對流感病毒的增殖有明顯抑制作用，而且有些能促 進機體的免疫功能。但中藥復方制劑，因創新性和市場競爭力弱，難以在世界醫藥市場流 通。中藥中天然活性成分具有許多中藥復方制劑所不具備的優點，天然活性成分的抗病毒 作用，已在抗病毒新藥研究領域的中受到了高度重視。明確天然抗病毒成分的結構，研究其 結構與藥理作用及機制的關聯性，是抗病毒新藥研發的重要趨勢。因此，積極尋求防治流感 病毒的有效中藥和天然藥物制劑，阻止流行性感冒病情的傳播和蔓延一直是當前衛生工作 的重要課題之一，這也正是我們注重這方面科研課題的主要原因。 連翅為木犀科連翅屬落葉灌木植物，常以 果實入藥。連翹主產于我國山西、河南、陜西、山東等地。連翹是中藥中最常見的藥材之一， 自1963年以來一直被中國藥典收錄。其性微寒，味苦，歸肺、心、小腸經，具有清熱解毒、 消腫散結、疏散風熱等藥理作用，用于風熱感冒，溫病初起，溫熱入營，高熱煩渴，神昏發斑， 熱淋澀痛等癥。臨床常用于急性風熱感冒、癰腫瘡毒、淋巴結核、尿路感染等癥，中醫素有 "瘡家圣藥"之稱。連翹中的化學成分主要包括萜類、苯乙醇苷類、木脂素類、黃酮類、天然醇 類、香豆素、揮發性成分和一些醇、酯、酸、醛、酮等化合物。其中木脂素類化合物連翹苷含量 較大且抗菌、抗病毒活性很強。連翹苷是雙木脂素類化合物的葡萄糖苷，難溶于水，溶于乙 醇、甲醇等有機溶劑，是連翹藥材的主要成分之一，中國藥典2010年版中將連翹苷作為控 制連翹質量的重要指標，規定按干燥品計算，含連翹苷不得低于0.15%。有文獻報道，連 翹屬植物葉子與果實的成分有較好的一致性，連翹葉中的有效成分如連翹苷、連翹酯苷、齊 墩果酸等的含量高于果實；連翹葉在我國民間藥用已有較長歷史，在我國河北、陜西等地有 將連翹葉制成珠茶作為保健飲料飲用的習慣，認為連翹葉有清熱等作用。李發榮等在對連 翹葉中苷類成分的提取工藝的研究中發現，連翹葉中連翹苷的含量是老翹的40倍左右，青 翹的3~4倍。大連富生天然藥物開發有限公司根據現代醫藥學理論，采用以正交法確定 的最佳提取方案，對連翹葉中連翹苷進行提取，以特制工業柱層析分離和整合重結晶精制 工藝，制備出了純度在90%以上的連翹苷。所以把連翹苷開發成為一種天然藥物，用于甲型 和乙型流感病毒的預防和治療，能更加符合目前廣大流行性感冒和病毒性感冒患者臨床治 療的需要。 為了保證連翹苷藥物的質量和療效，需要建立連翹苷原料藥或制劑的質量標準， 本專利技術在大量的實驗基礎上，公開了一種連翹苷的質量檢測方法，為質量控制提供依據。
技術實現思路
本專利技術的目的就是為了克服上述現有技術存在的問題，提供一種原料藥連翹苷的 質量檢測方法，方法主要用于連翹苷原料藥及其制劑的質量控制，具有簡便、穩定、重復性 好的特點，有利于提高檢驗效率，確保了連翹苷原料藥和制劑的治療效果。 為實現本專利技術的目的，本專利技術一方面提供，包 括1)鑒別連翹苷；2)測定連翹苷的含量和3)檢測相關物質。 其中，所述鑒別連翹苷包括如下順序進行的步驟： 1A)將精密稱定的連翹苷標準品溶于無水甲醇中，配制成連翹苷對照品溶液； 1B)將精密稱定的原料藥連翹苷溶于無水甲醇中，配制成連翹苷供試品溶液； 1C)吸取連翹苷對照品溶液、連翹苷供試品溶液、無水甲醇，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-甲醇混合溶液為展開劑，展開后，晾干，再噴以顯色劑，在l〇5°C加 熱至斑點顯色清晰，供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液主斑點的位置和 顏色相同，且與其它成分的斑點是否得到很好的分離；無水甲醇則在相應位置無斑點，其中 所述三氯甲烷-甲醇混合溶液中三氯甲烷與甲醇的體積之比為8. 5:1. 5 ;所述顯色劑為質 量百分比濃度為10%硫酸乙醇溶液。 特別是，步驟1A)中所述連翹苷對照品溶液的濃度為0.l_5mg/ml;步驟1B)中所 述連翹苷供試品溶液的濃度為〇.l_5mg/ml。 其中，所述測定連翹苷含量包括如下順序進行的步驟： 2A)將精密稱定的連翹苷標準品溶于質量百分比濃度為25%的乙腈水溶液，超 聲溶解，配制成連翹苷對照品母液，然后用質量百分比濃度為25%的乙腈水溶液稀釋成每 lml含連翹苷0. 1-0. 5mg的連翹苷對照品溶液； 2B)將精密稱定的原料藥連翹苷溶于質量百分比濃度為25%的乙腈水溶液中，超 聲溶解，配制成原料藥連翹苷供試品母液，然后用質量百分比濃度為25 %的乙腈水溶液稀 釋成每lml含原料藥連翹苷0. 1-0. 5mg的原料藥連翹苷供試品溶液； 2C)分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10-50μ1，注入液相色譜儀，測定 連翹苷峰面積，按照外標法計算，即得。 特別是，步驟2A)中所述連翹苷對照品溶液的濃度為0. 2mg/ml;步驟2B)中所述 原料藥連翹苷供試品溶液的濃度為0. 2mg/ml。 尤其是，步驟2C)中精密吸取的對照品溶液、供試品溶液的體積分別為10μ1。 特別是，步驟2C)中所述液相色譜條件如下：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填 充劑（4. 6mmX250mm，0DS2, 5μm);乙腈（Α)-水⑶為流動相；梯度洗脫[Omin(25 % A) ^ 12min(25%A) ^ 15min(65%A) ^ 20min(65%A) ^ 25min(25%A) ^ 30min(25% A);流速為1.OmL/min;柱溫30°C;檢測波長為277nm;理論板數按連翹苷峰計算應不低于 4000 0 其中，所述檢測相關物質包括如下順序進行的步驟： 3A)將精密稱定原料藥連翹苷與質量百分比濃度為25 %乙腈水溶液混合后，超聲 溶解，搖勻本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種原料藥連翹苷的質量檢測方法，其特征是包括1)鑒別連翹苷；2)測定連翹苷的含量和3)相關物質檢測。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：魯明明，王碩，付強，王凱乾，惠敏，富力，曲洪穎，劉正賢，蓋鑫，
申請(專利權)人：富力，
類型：發明
國別省市：遼寧;21