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    一株木質纖維素類物質高效降解菌L124及其應用制造技術

    技術編號:13003450 閱讀:115 留言:0更新日期:2016-03-10 15:01
    一株木質纖維素類物質高效降解菌L124及其應用,它涉及一株木質纖維素類物質高效降解菌L124及其應用。它為霍氏腸桿菌(Enterobacter?hormaechei)L124,于2014年12月12日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏,保藏號CGMCC?No.10164。它用于降解木質纖維素類物質。本發明專利技術菌株具有增殖迅速,適應性強,應用廣泛;經霍氏腸桿菌(Enterobacter?hormaechei)L124發酵處理后的袋料木耳廢料的失重率在30%以上,經霍氏腸桿菌(Enterobacter?hormaechei)L124發酵處理后的玉米秸稈的失重率在28%以上。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及一株木質纖維素類物質高效降解菌L124及其應用
    技術介紹
    我國是一個農業大國,農業廢棄物產生量極其巨大,由于受經濟效益和技術普及 的限制,農業廢棄物大都粗放低效利用且閑置狀況嚴重,造成資源浪費和環境污染,廢棄物 已經成為中國最大的污染源。而農業廢棄物存在著大量的木質纖維素,亟待人們去開發利 用。 木質素是自然界中僅次于纖維素的第二豐富的有機可再生資源,也是微生物最難 降解的成分之一。近年來,某些降解木質素的真菌已開始在實際中得以應用,但仍有待進一 步開發。木質素微生物降解的應用主要有:造紙工業;飼料工業;發酵與食品工業;生物物 肥料環境保護;木素酶的生物漂白技術,等等。 目前農業有機固體廢棄通常通過能源化利用、有機肥料、禽畜飼料、可食用菌培養 基料和工業原料進行利用。在利用農業廢棄物的生產實踐中,物理、化學和生物處理方法經 常結合使用,而其中生物處理方法尤其是利用微生物處理代表了今后的發展趨勢。生物處 理方法就是指利用木質素降解酶去降解木質纖維材料中的木質素,從而使木質素-半纖維 素-纖維素結構解體,纖維素得以暴露出來供后續步驟處理與傳統的機械、物理化學類法 相比,生物處理法的優點是能耗低,所需環境條件溫和,避免了傳統化學處理、機械處理技 術等耗能較多、存在環境污染等缺點,從成本和設備角度考慮,生物脫木質素法占有獨特的 優勢。但是,目前的生物處理法有一個很大的弱點限制了它的應用,這就是生物處理法中的 關鍵角色-木質素降解酶的活性普遍不高,從而導致處理效率較低,如果能利用基因工程 和傳統的生物技術對菌種和酶進行改造,提高酶活力,降低酶成本,生物法脫木質素法則有 望應用于大規模工業生產。 而目前應用最廣泛的是微生物菌肥,微生物菌肥作為一種新的農業技術措施,在 發展高產、優質、高效農業中的作用逐漸被人們所認識。傳統的微生物肥料己經在大面積推 廣應用中,新型的微生物菌肥品種不斷開發出來。微生物肥是由具有特殊效能的微生物經 過發酵而制成的、含有大量有益微生物、對作物有特定肥效的特定微生物制品。微生物肥料 利用微生物的生命活動,將作物不能吸收利用的物質轉化為可被作物吸收利用的營養物, 改善作物的營養條件,有些兼有刺激作物生長或增強抗病性的作用,以提高作物產量,改善 農產品品質。它既能增加農產品的出日創匯,又具有工農業有機廢物有效利用、防止環境污 染、改進土壤結構、提高土壤肥力和保護生態良性循環的巨大社會效益和生態效益。 國內的研究大多數為真菌降解木質纖維素。但是,利用真菌降解木質纖維素普遍 存在酶活力較低的問題。由于細菌繁殖較快,發酵周期短,可應用于工業生產,且細菌產生 的纖維素酶一般作用條件為中性或偏堿性,這在制漿、造紙和洗滌劑工業等污染行業的廢 水治理上有著潛在的應用前景,因此從細菌中篩選出有效菌株應用于木質纖維素降解具有 一定的實際意義及開發前景。
    技術實現思路
    本專利技術的目的是為了提供一株木質素高效降解菌L124及其應用。 本專利技術的一株木質素高效降解菌為霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏地址是北京市朝陽區 北辰西路1號院3號,保藏日期為2014年12月12日,保藏號CGMCC No. 10164。 本專利技術的一株木質素高效降解菌L124用于降解木質素上。 本專利技術的有益效果如下: 本專利技術的霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124增殖迅速,適應性強,應 用廣泛,耐鹽性為NaCl濃度8%,耐熱性為50°C ;連續傳代培養10次,菌株生長情況、產 酶情況以及酶活力穩定,無退化現象;對袋料木耳廢料和玉米秸桿具有明顯的降解效果, 經霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)L124發酵處理后的袋料木耳廢料的失重率在 30%以上,經霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)L124發酵處理后的玉米猜桿的失重 率在28%以上;具有明顯的木質素降解能力和半纖維素降解能力,尤其可以高效降解木質 素。經復合微生物菌劑發酵處理的玉米秸桿中木質素含量是經霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)L124發酵處理的玉米猜桿中木質素含量的1. 4倍,作為單一菌株霍氏腸桿菌 (Enterobacter hormaechei)L124對木質素的降解能力強于復合微生物菌劑;在降解樣品 時,不影響樣品中的主要元素含量,不會導致試樣中的全氮、全磷、全鉀、速效磷和速效鉀含 量變化,保存樣品肥效。 本專利技術從袋料木耳廢料、林間朽木和林間土壤中分離篩選出能夠以木質素為唯一 碳源生長的原始菌株,確定對木質素的降解能力以及種屬關系,為將來復合微生物菌劑構 建奠定基礎。將為我國農業資源的有效化利用提供有力幫助。【附圖說明】 圖1為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124培養12h后的掃描電 子顯微鏡圖(X20, 000); 圖2為16S rDNA序列PCR擴增的瓊脂糖凝膠電泳檢測圖其中,1泳道為Maker DL2000, 2泳道為菌株L124 ; 圖3為回收后的PCR產物瓊脂糖凝膠電泳檢測圖其中,1泳道為Maker DL2000, 2 泳道為菌株L124 ; 圖4為陽性克隆子篩選的瓊脂糖凝膠電泳檢測圖其中,1泳道為Maker DL2000, 2 泳道為菌株L124 ; 圖5為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)L124的系統進化樹; 圖6為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124對袋料木耳廢料的失 重率圖; 圖7為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124對玉米猜桿的失重率 圖; 圖8為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124菌株降解后玉米猜桿 中各組分含量柱狀圖;其中,1為木質素含量柱狀圖;2為纖維素含量柱狀圖;3為半纖維素 含量柱狀圖; 圖9為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124菌株發酵處理后玉米 秸桿中全氮全磷和全鉀含量柱狀圖;其中,1為全氮含量柱狀圖;2為全磷含量柱狀圖;3為 全鉀含量柱狀圖; 圖10為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124菌株發酵處理后玉 米猜桿中速效磷含量柱狀圖; 圖11為本專利技術霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei)L124菌株發酵處理后玉 米猜桿中速效鉀含量柱狀圖。【具體實施方式】【具體實施方式】 一:本實施方式的一株木質纖維素類物質高效降解菌L124,它為霍 氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通 微生物中心,保藏地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號,保藏日期為2014年12月12 日,保藏號 CGMCC No. 10164。 本實施方式的霍氏腸桿菌(Enterobacter hormaechei) L124為革蘭氏陰性菌,該 菌株菌體形態為桿狀,菌體大小為0. 55~0. 58本文檔來自技高網
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    【技術保護點】
    一株木質纖維素類物質高效降解菌L124,其特征在于它為霍氏腸桿菌(Enterobacter?hormaechei)L124,保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號,保藏日期為2014年12月12日,保藏號CGMCC?No.10164。

    【技術特征摘要】

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:楊峰山劉春光孫永帥吳奇丁仕波楊微王鯤鵬王慶華魏才強曲金玲張慧于文全
    申請(專利權)人:北京德瑞豐農業科技有限責任公司
    類型:發明
    國別省市:北京;11

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