本發明專利技術的實施方式涉及細胞治療方法和組合物，其利用表達至少嵌合TGFβ受體的細胞，該嵌合TGFβ受體包含TGFβII受體的外結構域和不來自TGFβ受體的內結構域，從而將T細胞增殖的TGFβ的負信號轉化為T細胞激活信號。在至少某些方面中，攜帶該嵌合TGFβ受體的細胞還攜帶一種或多種嵌合抗原受體。
【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】【專利說明】本專利技術要求2013年4月17日提交的美國臨時專利申請第61 /812，917號的優先權， 其通過引用全文納入本文。 關于聯邦資助的研究或開發的聲明 本專利技術是在美國國防部基金第W81XWH-11-1-0625號的政府支持下完成的。政府對 本專利技術擁有某些權利。
本專利技術的實施方式至少涵蓋以下領域:免疫學、細胞生物學、分子生物學和醫學， 包括癌癥醫學。 背景 轉化生長因子i3(TGFi3)已被證明在調控免疫應答方面起重要作用，主要是通過其 對于免疫系統細胞的抑制功能。TGF0是抗原特異性T細胞增殖的抑制因子，其至少通過降低 細胞周期速率發揮功能，與誘導凋亡相反。具體而言，TGFM乍用于細胞毒性T淋巴細胞(CTL) 以特異性抑制至少五種溶細胞性基因產物的表達:穿孔蛋白、粒酶A、粒酶B、Fas配體和干擾 素 y，其對于CTL介導的腫瘤細胞毒性而言至關重要(Thomas和Massagu6,2005)。 概述 本專利技術的實施方式包括用于癌癥治療的方法和組合物。在具體的實施方式中，描 述了涉及癌癥的細胞療法的方法和組合物。雖然具體的實施方式可用于任何癌癥，但在具 體實施方式中，這些方法和組合物對于分泌TGF0或位于釋放TGF0的腫瘤微環境(包括腫瘤 間質）中的癌癥特別有效。適用于使用本專利技術公開的組合物和方法進行治療的示例性癌癥 包括但不限于:前列腺癌、乳腺癌、黑素瘤、胰腺癌、肺癌、腦癌、結腸癌、食道癌、肝癌、腎癌、 睪丸癌、卵巢癌、宮頸癌、膽囊癌、甲狀腺癌、肛門癌、子宮內膜癌、膀胱癌、腦下垂體癌、白血 病、淋巴瘤、胃癌和脾癌。 本專利技術的各方面利用經修飾的細胞來表達一種或多種非天然分子，這些分子使細 胞有效地對抗分泌TGF0的癌癥。在具體的實施方式中，這些細胞可用于過繼細胞療法。在具 體的方面中，這些細胞是T細胞、NK細胞、NKT細胞、細胞毒性T淋巴細胞、抗原特異性T細胞 (包括腫瘤或病原體(如病毒或細菌)特異性T細胞）、具有αβΤ細胞受體(TCR)的T細胞、包含 至少一種嵌合抗原受體的Τ細胞，等。細胞可經遺傳工程改造以在TGF0存在時發揮作用，且 還可具有或不具有其他非天然產生的遺傳修飾。除嵌合TGF0受體外，這些細胞還可表達其 他非天然分子。在具體的實施方式中，這些非天然分子是細胞表面受體。這些分子可以是特 異性針對例如腫瘤細胞表面分子或ai3TCR的嵌合抗原受體(CAR)。在某些方面中，細胞可使 用一種或多種嵌合抗原受體和嵌合TGF0受體。在本專利技術的各實施方式中，本專利技術的細胞通過使用嵌合TGF0受體將來自TGF0的正 常抑制信號轉化為對T細胞的激活刺激，該嵌合TGF0受體使用細胞表面上的TGF0胞外受體， 其連接能夠產生激活信號的另一實體的胞內結構域(endodomain)。在【具體實施方式】中，與 缺少這類嵌合受體的細胞相比，使用這類嵌合受體修飾的T細胞具有提高的效力。本專利技術的【具體實施方式】使用以下嵌合TGFi3受體，其表達與來自另一分子的胞內結構域相連的TGFi3 RII的胞外結構域(exodomain)。在【具體實施方式】中，該胞外結構域和胞內結構域通過跨膜 結構域相連，且在某些實施方式中該跨膜結構域是天然產生的針對所選胞內結構域的跨膜 結構域。雖然TGFI3的受體可以是TGFI3受體l、TGFf3受體2或TGFI3受體3中任一種的部分或全 部，但在【具體實施方式】中其包含該受體的TGFI3受體2同種型。在【具體實施方式】中，該胞內結 構域包含示例性toll樣受體(TLR)4的胞內結構域，但也可使用其他，如TLR1、TLR2、TLR3、 TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8、TLR9、CD28、4-1BB、0X40、0)3ζ、CD40、CD27，或其組合。在具體 實施方式中，該嵌合細胞因子受體是經標記的，例如使用GFP、mOrange、藍色焚光蛋白等標 記。 在本專利技術的某些方面中，包含嵌合TGF0受體的細胞還包含嵌合抗原受體。該嵌合 抗原受體(CAR)可以是任何類型，但在【具體實施方式】中該CAR靶向也分泌TGF0分子的癌癥。 示例性CAR包括至少特異性針對以下任意一種或多種的CAR:EphA2、HER2、⑶2、磷脂酰肌醇 蛋白聚糖_3、5丁4、8!19、€^ 6整聯蛋白、8細胞成熟抗原(8〇嫩)87-!13、87-!16、〇厶1父、〇厶9、0)19、 CD20、CD22、κ輕鏈、CD30、CD33、CD38、CD44、CD44v6、CD44v7/8、CD70、CD 123、CD 138、CD 171、 CEA、CSPG4、EGFR、EGFRv III、EGP2、EGP40、EPCAM、ERBB3、ERBB4、ErbB3/4、FAP、FAR、FBP、胎兒 AchR、葉酸受體 a、GD2、GD3、HLA-AIMAGEAl、HLA-A2、ILllRa、IL13Ra2、KDR、Lambda、Lewis-Y、MCSP、間皮素、]?11。1、]\111。16、％厶1、疆620配體、階450-1、？1^1^、？5〇八、？5(：1、？5]\^、1?01?1、 Sp 17、SURVIVIN、TAG72、TEM1、TEM8、VEGRR2、癌胚抗原、HMW-MAA、VEGF 受體、和/或其他在腫 瘤的胞外基質中存在的示例性抗原(如纖連蛋白的癌胚變體、生腱蛋白或腫瘤的壞死區）和 通過例如腫瘤的遺傳分析和或差異表達研究鑒定的其他腫瘤相關抗原或可用突變，或其組 合。本專利技術的細胞可具有超過一種CAR，且CAR可具有特異性針對不同抗原的超過一種scFv。 在本專利技術的某些方面中，包含(如表達)嵌合TGFi3受體的細胞還包含(如表達)抗原 特異性受體。該抗原可以是腫瘤抗原或病原體抗原，包括例如病毒或細菌抗原。 示例性的腫瘤抗原至少包括下述：腸癌癌胚抗原（CEA);卵巢癌CA-125;乳腺癌 MUC-1或上皮腫瘤抗原（ETA)或CA15-3;惡性黑色素瘤的酪氨酸酶或黑色素瘤相關抗原 (MAGE);和各種類型腫瘤的ras、p53的異常產物;肝細胞瘤、卵巢癌或睪丸癌的α胎甲球蛋 白；睪丸癌男性患者的hCG的β亞基;前列腺癌的前列腺特異抗原;多發性骨髓瘤或一些淋巴 瘤中的β2微球蛋白；結腸直腸癌、膽管癌和胰腺癌的CA19-9;肺癌和前列腺癌的嗜鉻粒蛋白 A;黑素瘤、軟組織肉瘤和乳腺癌、結腸癌和肺癌的ΤΑ9 0。本領域已知腫瘤抗原的例子，例如 Cheever等2009中所述，其通過引用全文納入本文。腫瘤抗原的具體示例至少包括例如CEA、 gpl〇〇、間皮素、TRPl、CD40、EGFP、Her2、TCRa、trp2、MUCl、cdr2、ras、GITR、WTl、MUCl、LMP2、 HPV E6E7、EGFRvIII、HER-2/neu、MAGE A3、p53非突變體、NY-ES0-1、PSMA、⑶2、Melan A/ MARTl、Ras突變體、gp 100、p53突變體、蛋白酶3(PRl)、bcr-abl、酪氨酸酶、生存素、PSA、 hTERT、EphA2、PAP、ML-IAP、AFP、EpCAM、ERG(TMPRSS2ETS融合基因）、NA17、PAX3、ALK、雄激素 受體、細胞周期蛋白B1、多聚唾本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種包含編碼嵌合TGFβ受體的核苷酸序列的多核苷酸，所述受體包含TGFβ受體的胞外結構域和非TGFβ受體的胞內結構域。
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...
【專利技術屬性】
技術研發人員：J·F·V·瓦爾德斯，C·M·魯尼，A·M·里恩，渡部紀宏，
申請(專利權)人：貝勒醫學院，
類型：發明
國別省市：美國;US
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