草苔蟲總內(nèi)酯抗老年癡呆活性及其應用制造技術

本發(fā)明專利技術涉及醫(yī)藥技術領域，具體涉及草苔蟲總內(nèi)酯抗老年癡呆活性及其應用。本發(fā)明專利技術的草苔蟲總內(nèi)酯(BRYS)經(jīng)小鼠水迷宮實驗，能顯著縮短游泳時間；對小鼠腦中的膽堿酯酶(AChE)和乙酰膽堿Ach有明顯的改善作用。對乙酰膽堿轉移酶(ChAT)和丙二醛(MDA)含量均有明顯提高，作用顯著，差異有統(tǒng)計學意義。可顯著增加血清中SOD活力(P<0.01)，升高血清還原型谷胱甘肽(GSH)和血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)水平。此外，草苔蟲總內(nèi)酯對小鼠體質(zhì)量和臟器指數(shù)均無明顯的影響，表明毒性較低。實驗結果表明，草苔蟲總內(nèi)酯具有顯著的抗老年癡呆活性和較低的毒性，可應用于開發(fā)抗老年癡呆的藥品。

【技術實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術設及醫(yī)藥
，具體設及草苔蟲總內(nèi)醋的抗老年癡呆活性及其在醫(yī)藥 領域中的應用。
技術介紹
海洋苔薛動物俗稱苔薛蟲、海席子、假珊瑚及苔蟲，屬真體腔動物，是海洋底棲動 物的重要組成之一。其種類很多，大約有4000多種，最常見的是總合草苔蟲。總合草苔蟲 Bugula neritina Linnaeus在世界水域分布廣泛，我國沿海從勸海到南海的西沙群島的多 鹽水域都有。該群體呈紅褐色或紫褐色，呈草叢狀，高40~150mm，每支有個蟲兩列，交互排 列。其群體常附著在海帶、石花菜、貝類W及船底、碼頭、航標等水下設施上，影響海洋養(yǎng)殖 和國防、海洋交通，是海洋主要污損生物之一。直到1968年，美國亞利桑那州立大學化ttit 研究小組對海洋無脊椎動物和脊椎動物的廣泛研究中，首次發(fā)現(xiàn)了總合草苔蟲的抗癌活 性。經(jīng)過十多年的努力，1982年化ttit研究小組成功地從采集于加利福尼亞海域的總合草 苔蟲中分離得到第一個具有抗癌活性的單體bryostatin 1，并用X衍射法確定了它的結構， 是大環(huán)內(nèi)醋類化合物。從此，該小組一直致力于總合草苔蟲中具有抗癌活性大環(huán)內(nèi)醋成分 的研究。目前為止，已從中得到20個活性單體，即b巧0S化tin 1~2(KLin冊，Yi YH，Li WL, Yao XS'Wu HM.Chinese J.Marine Drugs 1998,65,l;Pettit GR.Fortschritte der Chemie Organischer Naturstoffe, 1991,57,153) cBryostatin 1 和bryostatin 4經(jīng)美國 國立癌癥研究所(NCI)的生物鑒定，已投入臨床試驗。此類化合物具有毒性低、活性強的特 點。它作用于蛋白激酶C(PKC)的新穎的作用機制，激發(fā)了研究者對其作用機制的廣泛深入 的研究。鑒于草苔蟲有限的天然資源和草苔蟲內(nèi)醋的微少含量，人們對其天然資源進行的 廣泛的調(diào)查。 老年癡呆癥(主要為阿爾茨海默病)是一種進行性發(fā)展的致死性神經(jīng)退行性疾病， 臨床表現(xiàn)為認知和記憶功能不斷惡化，日常生活能力進行性減退，并有各種神經(jīng)精神癥狀 和行為障礙。運種病在任何年齡都能出現(xiàn)，但是通常在60-70之間出現(xiàn)。當被診斷出患有該 病時，大約還能存活3.3年。患病率研究顯示，60歲人群的患病率為1 %，年齡每增加5歲，患 病率增加2倍。目前我國正加速進入老齡化社會，據(jù)有關專家預測，到2020年我國60歲W上 人口將達到4億，老年癡呆癥病人將有1000萬人W上。最新報道，上海目前的老年癡呆癥患 者就已有12萬人。 老年癡呆癥是一組病因未明的原發(fā)性退行性腦變性疾病，多起病于老年期，潛隱 起病，病程緩慢且不可逆，臨床上W智能損害為主。病理改變主要為皮質(zhì)彌漫性萎縮，溝回 增寬，腦室擴大，神經(jīng)元大量減少，并可見老年斑(SP)，神經(jīng)原纖維結(NFT)等病變，膽堿乙 酷化酶及乙酷膽堿含量顯著減少。老年癡呆癥發(fā)病病因目前還不十分清楚，而且有多種亞 型，而發(fā)生病理變化的器官除大腦外還可能有其他器官。目前公認的發(fā)病機制主要有兩種： 1.由于淀粉樣前蛋白的異常導致蛋白成分漏出細胞膜，導致神經(jīng)元纖維纏結和細胞死亡， 基因位于21號染色體。AD患者腦部乙酷膽堿明顯缺乏，乙酷膽堿醋酶和膽堿一酷轉移酶活 性降低，特別是海馬和顛葉皮質(zhì)部位。2.與載脂蛋白E(AP0-E4)的基因有關。 由于老年癡呆癥目前確切病因尚未得到充分闡明，治療方法主要是通過藥物作用 于不同的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)，增強中樞神經(jīng)系統(tǒng)的高級活動，減輕疾病過程中出現(xiàn)的各種癥狀， 延緩癡呆的進一步發(fā)展。臨床上常用的治療主要通過抑制乙酷膽堿醋酶來提高患者體內(nèi)乙 酷膽堿含量，改善老年癡呆癥的臨床癥狀。目前臨床使用的治療藥物多為乙酷膽堿醋酶抑 審IJ劑(如他克林、多奈贓齊、卡己拉汀、力爛他敏、石杉堿甲），NMDA受體括抗劑(美金剛)和抗 氧化劑(司來吉蘭、維生素 E、稱黑素、銀杏提取物)等W認知功能障礙的藥物治療較多，但臨 床療效均不夠確切、口服吸收差、不易透過血腦屏障、特異性不強、或毒副作用大、特別是治 標不治本等缺點。研究開發(fā)新型高效的抗老年癡呆的新藥是目前醫(yī)藥保健中迫切需要解決 的課題。但目前在運一研究領域與國外同類研究還有較大差距。從天然產(chǎn)物中尋找發(fā)現(xiàn)抗 老年癡呆的化學成分是天然藥物研究中的一個新的熱點和發(fā)展方向。特別是海洋天然產(chǎn) 物，由于具有特殊的化學結構和生理活性，從中發(fā)現(xiàn)抗老年癡呆的化學成分將具有更廣闊 的前景。 有關草苔蟲總內(nèi)醋的抗老年癡呆活性，國內(nèi)外尚未見有過報導。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術的目的在于提供草苔蟲總內(nèi)醋及其制備方法;本專利技術的另一目的在于提供 草苔蟲總內(nèi)醋的新的醫(yī)藥用途。 本專利技術的第一方面，提供了一種草苔蟲總內(nèi)醋，所述的草苔蟲總內(nèi)醋W總合草苔 蟲為原料，經(jīng)常規(guī)方法提取純化，得到草苔蟲總內(nèi)醋。 本專利技術所述的草苔蟲總內(nèi)醋，經(jīng)高效液相層析分析，主要含有草苔蟲內(nèi)醋5、10、18 和4等10多種內(nèi)醋成分，其中W草苔蟲內(nèi)醋4的含量最高。Bryostatin 4占草苔蟲總內(nèi)醋 60%W上(質(zhì)量百分比）。 較優(yōu)的，總合草苔蟲采集自我國南方海域。[001。 本專利技術的第二方面，提供一種草苔蟲總內(nèi)醋的制備方法。 -種草苔蟲總內(nèi)醋的制備方法，其特征在于，所述的草苔蟲總內(nèi)醋的制備方法如 下： 新鮮采集的總合草苔蟲Bugula neritina Linnaeus,用95%乙醇室溫浸提，將乙 醇提取液，減壓回收乙醇，得浸膏； 浸膏用90%甲醇懸浮分散，用正己燒萃取，棄去正己燒萃取物;含水甲醇層再加水 成80 %甲醇水溶液，用αη4萃取，得αη4萃取物； 0^4萃取物經(jīng)200~300目硅膠柱層析得活性組分;再經(jīng)過S邱hadex LH-20凝膠柱 層析，WC出Cl2: MeOH( 1:1)洗脫，流速60mL/h，得到活性組分A和活性組分B; 對活性組分A和活性組分B分別進行兩次凝膠柱層析，第一次W化xane:CH2Cl2: MeOH(4:5:1)洗脫，第二次WHexane: C出CI2:MeOH( 10:10 :1)洗脫，分別得到活性組分C和活 性組分D; 活性組分C和活性組分D進行0DS快速柱層析，W50%、80%Me0H梯度洗脫，得草苔 蟲總內(nèi)醋。 在本專利技術的一個優(yōu)選實施例中，所述的草苔蟲總內(nèi)醋的制備方法，具體如下： 新鮮采集的總合草苔蟲Bugula neritina Linnaeus原料，用95%乙醇室溫浸提一 周，共提取4遍，合并乙醇提取液，減壓回收乙醇，得浸膏。浸膏用90%甲醇懸浮分散，用正己 燒萃取5次，得正己燒萃取物，經(jīng)體外抗癌活性篩選無活性，棄去。含水甲醇層再加水使成 80 %甲醇水溶液，用αη4萃取5次，得αη4萃取物，為活性部位。該活性部位經(jīng)快速硅膠柱層 析（200~300目）得活性組分。再經(jīng)過Se地adex LH-20凝膠柱層析，WC此Cl2:Me0H(l: 1)洗 脫，流速60mL/h，得到兩個活性組分A和B。對運兩個活性組分分別進行兩次凝膠柱層析，依 次 WHexane-CH2Cl2-Me0H(4:5:1)和Hexane : CH2CI2:MeOH( 10 :10:1)洗脫，分別得到純度更 高、活性更強的兩個組分C和DX、本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】
草苔蟲總內(nèi)酯在制備預防或治療老年癡呆藥物或保健品中的應用。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：易楊華，
申請(專利權)人：中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學，
類型：發(fā)明
國別省市：上海;31