一種滇黃精組織培養的方法技術

本發明專利技術涉及一種滇黃精組織培養的方法，(1)每年2、3月份選擇優良的塊莖進行脫毒，脫毒后的塊莖分切，接入無任何激素的MS培養基中培養；(2)在MS培養基中培養18-22天，把沒有污染的黃精塊莖轉接到增值培養基中培養；(3)在增值培養基中培養35-45天之后，黃精塊莖在增值培養基中生成大量愈傷組織；(4)在促芽培養基中培養23-25天之后，把促芽培養基中的黃精嫩芽分切，轉接到生根培養基中培養；(5)在生根培養基中培養中50-60天之后，生根培養基中的黃精苗生根完成，轉入到曬苗大棚；(6)曬苗30-35天之后黃精幼苗出瓶。本發明專利技術將滇黃精從種子到出苗的時間有兩年，降低到半年，并且滇黃精苗成活率在98％以上，有效的提高了滇黃精的繁育速度。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬中藥材種植
，特別涉及。
技術介紹
滇黃精是百合科黃精屬草本植物，是常用中藥黃精三種基原植物之一。黃精作為 常用中藥，在我國已有2000多年的用藥歷史，其性味甘平，入肺、脾、腎經。功效補中益氣，潤 心肺，強筋骨。治虛損寒熱，肺癆咯血，病后體虛食少，筋骨軟弱，風濕疼痛，風癩癬疾，為補 陰之品。近年來藥理研究表明，除上述功效外，黃精還有抗菌作用，尤其是對結核桿菌和真 菌有顯著的效果，同時又有降低血壓的作用。近期研究結果還表明黃精對增加冠狀動脈血 流量，減輕動脈粥樣硬化程度，提高肝臟中超氧化物歧化酶(S0D)活性有明顯的作用。長期 以來，由于人工栽培量較小，黃精藥材來源主要以野生采集為主。隨著市場對藥材黃精需求 量的增加和野生資源的急劇減少，采集野生黃精不但不能滿足市場需求，更破壞了生態環 境和黃精野生資源。由于黃精種子在自然條件下發芽率較低，自然條件下，黃精種子要經歷 2個冬季休眠后，才能長出一片真葉，目前在黃精人工栽培中多采用塊莖進行無性繁殖。繁 殖周期長、繁殖系數低。 申請號為：201210085056.2，名稱為"九華黃精的組培快繁方法"的中國專利申請 公開了一種黃精組培繁殖方法，具體為：以黃精根狀莖為外植體，經過不定芽的誘導階段， 叢芽增殖階段，生根階段和煉苗移栽階段，調配和優選各培養階段的培養基配方和培養條 件，形成了每年擴繁速度為106倍的組培技術，實現了九華黃精的組織培養和快速穩定繁 殖，可以有效解決九華黃精的優質種苗供應問題。 申請號為：201310532853.5，名稱為"黃精根莖的組織培養基及離體再生方法"的 中國專利申請公開了一種黃精根莖的組織培養基及離體再生方法;該黃精根莖的組織培養 基包括誘導培養基、增殖培養基和生根培養基;使用所述黃精根莖的組織培養基進行黃精 根莖離體再生的方法，包括芽的誘導、芽的增殖培養和生根培養三個步驟。該專利技術利用植物 組織培養技術建立了黃精離體再生體系，并對涉及的誘導培養基、增殖培養基和生根培養 基進行了選擇優化，具有芽誘導率高、增殖系數高、生根率高、芽苗健壯、葉形葉色正常等優 點，能夠滿足市場對優質黃精種苗的需要。 申請號201510420973.5，專利技術名稱:一種滇黃精種子一步成苗的組培方法，方法包 括滇黃精果實選取，滇黃精種子處理、滇黃精種子一步成苗培養，煉苗移栽。選取8成熟果 實，置于4°C冰箱中7天;將經處理的種子接種于盛有MS+BA 0.5mg/L培養基的培養瓶中，在 溫度為25°C±2°C，光照時間為12-14h/天，光照強度為1501x條件下培養至黃精種子萌發2 片真葉時，將培養瓶置于培養溫度為25°C±2°C，光照時間為12h/天，光照強度為15001x條 件下繼續培養至生根。該專利技術方法從種子接種一步培養成苗僅需90-99天，萌芽期從兩個冬 季縮短到1個月，繁育周期大大縮短，種子萌芽率達到90~95%，煉苗成活率達100%。 上述方法雖然在一定程度上解決了黃精繁殖慢、時間長等問題，但是依然存在繁 殖速度慢、成活率低等問題。
技術實現思路
本專利技術提供了，解決了現有滇黃精繁殖速度慢、成活 率低等問題。 為解決上述技術問題，本專利技術采用的技術方案為： -種滇黃精組織培養的方法，包括以下步驟： (1)每年2、3月份選擇優良的塊莖進行脫毒，脫毒后的塊莖分切，接入無任何激素 的MS培養基中培養； (2)在MS培養基中培養18-22天，把沒有污染的黃精塊莖轉接到增值培養基中培 養； (3)在增值培養基中培養35-45天之后，黃精塊莖在增值培養基中生成大量愈傷組 織，一部分再次轉接到增值培養基中增值培養，一部分轉入促芽培養基中培養； (4)在促芽培養基中培養23-25天之后，把促芽培養基中的黃精嫩芽分切，轉接到 生根培養基中培養； (5)在生根培養基中培養中50-60天之后，生根培養基中的黃精苗生根完成，轉入 到曬苗大棚； (6)曬苗30-35天之后黃精幼苗出瓶。 進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的脫毒包括以下步驟： A、先用清水洗凈帶芽塊莖，再用清潔劑清洗塊莖； B、用0.1%的次氯酸鈉溶液浸泡8-12分鐘，然后清水洗凈； C、到超凈工作臺上，先用75%的酒精泡10s，用無菌水沖洗一次后再用濃度為的 〇. 1 %升汞溶液浸泡12分鐘，用無菌水沖洗8次，用濾紙吸干水分，即完成脫毒。 進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的MS培養基的培養條件為:溫度20-25度，光 照12-14小時，強光30001ux，濕度70-80%。 進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的增值培養基的培養條件為:先暗培養10d， 溫度為20_25°C，再在光照為30001ux的條件下培養6-8小時。進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的促芽培養基的培養條件為:溫度20-25度， 光照12-14小時，強光30001ux，濕度70-80%，培養10-12小時。進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的生根培養基中培養條件為:溫度20-25度， 光照12-14小時，強光30001ux，濕度70-80%，培養時間為12-14小時。進一步，本專利技術的一種優選方案：所述的曬苗的條件為：溫度25_30°C，光照自然 光，濕度60-65 %。進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的增值培養基為:MS+2，4-Dlmg/L+6-BA3mg/ L〇 進一步，本專利技術的一種優選方案:所述的促芽培養基為MS+6-BA3mg/L+NAAlmg/L。 進一步，本專利技術的一種優選方案：所述的生根培養基為1/2MS+NAA0.25mg/L+ 1BA0 · 5mg/L+香焦 50g/L+AC0 · 5g/L。 本專利技術的有益效果： 本專利技術的方法通過組織培養解決了現有滇黃精繁殖時間長、出芽率低，以及現有 組織培養激素多、出芽率低、成活率低等問題，將滇黃精從種子到出苗的時間有兩年，降低 到半年，并且滇黃精苗成活率在98%以上，有效的提高了滇黃精的繁育速度。【具體實施方式】 下面將對本專利技術實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施 例僅僅是本專利技術一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術中的實施例，本領域普通 技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術保護的范 圍。 實施例1 -種滇黃精組織培養的方法，包括以下步驟： (1)每年2、3月份選擇優良的塊莖進行脫毒，脫毒后的塊莖分切，接入無任何激素 的MS培養基中培養；所述的脫毒包括以下步驟： A、先用清水洗凈帶芽塊莖，再用清潔劑清洗塊莖； B、用0.1%的次氯酸鈉溶液浸泡8-12分鐘，然后清水洗凈； C、到超凈工作臺上，先用75%的酒精泡10s，用無菌水沖洗一次后再用濃度為的 〇. 1 %升汞溶液浸泡12分鐘，用無菌水沖洗8次，用濾紙吸干水分，即完成脫毒； (2)在MS培養基中培養18-22天，把沒有污染的黃精塊莖轉接到增值培養基中培 養； (3)在增值培養基中培養35-45天之后，黃精塊莖在增值培養基中生成大量愈傷組 織，一部分再次轉接到增值培養基中增值培養，一部分轉入促芽培養基中培養； (4)在促芽培養基中培養23-25天之后，把促芽培養基中的黃精嫩芽分切，轉接到 生當前第1頁1 2 本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種滇黃精組織培養的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)每年2、3月份選擇優良的塊莖進行脫毒，脫毒后的塊莖分切，接入無任何激素的MS培養基中培養；(2)在MS培養基中培養18?22天，把沒有污染的黃精塊莖轉接到增值培養基中培養；(3)在增值培養基中培養35?45天之后，黃精塊莖在增值培養基中生成大量愈傷組織，一部分再次轉接到增值培養基中增值培養，一部分轉入促芽培養基中培養；(4)在促芽培養基中培養23?25天之后，把促芽培養基中的黃精嫩芽分切，轉接到生根培養基中培養；(5)在生根培養基中培養中50?60天之后，生根培養基中的黃精苗生根完成，轉入到曬苗大棚；(6)曬苗30?35天之后黃精幼苗出瓶。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：張朝玉，彭剛，
申請(專利權)人：普洱市玉林林業開發有限公司，
類型：發明
國別省市：云南;53