本發(fā)明專利技術(shù)提出了二十二碳六烯酸乙酯在制備改善興奮性神經(jīng)毒性藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)還提出了二十二碳六烯酸乙酯在制備治療癲癇的藥物中的應(yīng)用。通過體外培養(yǎng)PC12細(xì)胞，表明二十二碳六烯酸乙酯(Et-DHA)通過降低LDH釋放和ROS生成，抑制Caspase-3活性，調(diào)控線粒體依賴的細(xì)胞凋亡通路從而保護(hù)PC12細(xì)胞免受KA誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷，并推測該保護(hù)效應(yīng)與Et-DHA能改變細(xì)胞膜及線粒體膜的通透性有關(guān)。研究結(jié)果揭示，Et-DHA作為一種神經(jīng)保護(hù)成分運(yùn)用于防治由癲癇等疾病。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)設(shè)及二十二碳六締酸乙醋在制備改善興奮性神經(jīng)毒性藥物中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
癒痛化pilepsy)是慢性反復(fù)發(fā)作短暫腦功能失調(diào)綜合征，是神經(jīng)科常見疾病之 一，而運(yùn)種反復(fù)發(fā)作的神經(jīng)元異常放電所致的暫時(shí)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常的慢性疾病。 其病理基礎(chǔ)可能是興奮性神經(jīng)遞質(zhì)和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)失衡，由癒痛導(dǎo)致的神經(jīng)元死亡可能 在一定程度上是由活性氧簇(Reactive Oxygen Species,R0S)的過度產(chǎn)生引起的。能夠預(yù) 防和治療此類疾病的功能性食品W及相關(guān)藥物研發(fā)受到了各個(gè)領(lǐng)域的廣泛關(guān)注。 紅藻氨酸化ainicAcicUKA)是一種谷氨酸類似物，它是中樞神經(jīng)系統(tǒng)強(qiáng)力的驚厥 劑和神經(jīng)毒素。注射了 KA的大鼠會(huì)引起伴隨著明顯的海馬區(qū)（Hippocampus)、杏仁核 (Amygdala)和梨狀皮質(zhì)(Piriform Cortex)神經(jīng)元損傷的癒痛綜合征，同時(shí)其致癒機(jī)制也 與導(dǎo)致跨膜離子失衡，引起巧離子等的內(nèi)流，從而釋放過量ROS攻擊神經(jīng)元內(nèi)的大分子，引 起神經(jīng)元功能素亂甚至死亡。因此KA模型被廣泛接受并應(yīng)用于模擬人類癒痛持續(xù)狀態(tài)的實(shí) 驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?本專利技術(shù)所述的二十二碳六締酸乙醋化t-DHA)進(jìn)入人體后，可水解成活性的DHA而 發(fā)揮作用。DHA具有預(yù)防屯、腦血管梗塞、抗炎癥、降血脂、抗癌等生理作用，W往的研究表明 DHA對腦缺血損傷等具有保護(hù)效應(yīng)，但是在細(xì)胞水平上或用電生理刺激的方法及整體動(dòng)物 水平上對DHA的保護(hù)效應(yīng)少有研究，并且其保護(hù)機(jī)制尚不明確。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)提出了二十二碳六締酸乙醋在制備改善興奮性神經(jīng)毒性藥物中的應(yīng)用，即 在制藥中的新應(yīng)用。 本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提出了二十二碳六締酸乙醋在治療癒痛的藥物中的應(yīng)用， 即在制藥中的新應(yīng)用。 本專利技術(shù)的技術(shù)方案是運(yùn)樣實(shí)現(xiàn)的：[000引二十二碳六締酸乙醋在制備改善興奮性神經(jīng)毒性藥物中的應(yīng)用。 二十二碳六締酸乙醋在制備改善興奮性神經(jīng)毒性藥物中的應(yīng)用，所述二十二碳六 締酸乙醋通過降低U)H釋放和ROS生成，抑制化spase-3活性，調(diào)控線粒體依賴的細(xì)胞調(diào)亡通 路從而保護(hù)PCl 2細(xì)胞免受KA誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷。 二十二碳六締酸乙醋在制備治療癒痛的藥物中的應(yīng)用。 二十二碳六締酸乙醋在制備治療癒痛的藥物中的應(yīng)用，二十二碳六締酸乙醋作為 神經(jīng)保護(hù)成分。 -種改善興奮性神經(jīng)毒素藥物包括二十二碳六締酸乙醋。 所述的改善興奮性神經(jīng)毒素藥物，所述二十二碳六締酸乙醋的分子式為：O 本專利技術(shù)的有益效果為：通過體外培養(yǎng)PC12細(xì)胞，表明二十二碳六締酸乙醋化t-DHA)通過降低LDH釋放和ROS生成，抑制化spase-3活性，調(diào)控線粒體依賴的細(xì)胞調(diào)亡通路從 而保護(hù)PC12細(xì)胞免受KA誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷，并推測該保護(hù)效應(yīng)與化-DHA能改變細(xì)胞膜及 線粒體膜的通透性有關(guān)。研究結(jié)果掲示，Et-DHA作為一種神經(jīng)保護(hù)成分運(yùn)用于防治由癒痛 等疾病?！靖綀D說明】 為了更清楚地說明本專利技術(shù)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例或現(xiàn) 有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本 專利技術(shù)的一些實(shí)施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下，還可 W根據(jù)運(yùn)些附圖獲得其他的附圖。 圖IA是KA細(xì)胞毒性的形態(tài)學(xué)分析。 圖IB是KA對PC12細(xì)胞存活率的影響。其中，## :KA組與正常對照組相比，P<0.0 l。 圖2A是Et-DHA對PCl 2保護(hù)作用的形態(tài)學(xué)分析。 圖2B是Et-DHA對PC12細(xì)胞存活率的影響。其中，##:KA組與正常對照組相比，P< 0.0 l; :Et-DHA組與KA組相比，P<0.0 l。 圖3是巧光素染料化echst 33258檢測化-DHA對PC12細(xì)胞核型的影響。 圖4是Et-DHA對乳酸脫氨酶化DH)釋放量的影響。其中，##:KA組與正常對照組相 tt，P<〇. Ol;林:化-DHA組與KA組相比，P<0.0 l。 圖5是化-DHA對細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)生成量的影響。其中，##:KA組與正常對照組 相比，P<〇. Ol; ** :Et-DHA組與KA組相比，P<0.0 l。 圖6是Et-DHA對細(xì)胞內(nèi)Caspase-3蛋白生成量的影響。其中，1:空白對照；2: 30mM KA;3:30mMKA+10yM^-DHA;4:30mMKA+30iiM^-DHA?！揪唧w實(shí)施方式】 下面將結(jié)合本專利技術(shù)實(shí)施例中的附圖，對本專利技術(shù)實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完 整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本專利技術(shù)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；?本專利技術(shù)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他 實(shí)施例，都屬于本專利技術(shù)保護(hù)的范圍。 實(shí)施例1細(xì)胞培養(yǎng)與處理 PC12細(xì)胞使用添加了 10%(v/v)胎牛血清、lOOU/mL青霉素 W及l(fā)OOU/mL鏈霉素的 DMEM培養(yǎng)基，在37 °C下，5 %二氧化碳的濕潤空氣中培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前細(xì)胞被分到平板中，密度為 2X105個(gè)細(xì)胞每孔。PC12細(xì)胞在不添加或添加不同濃度化-畑A(終濃度：10,30山O的DMEM培 養(yǎng)液中解育2地。然后添加 KA(終濃度:30mM)，再培養(yǎng)12hW開展后續(xù)實(shí)驗(yàn)。在上述步驟中，給 予對照培組相同量的DMEMdKA溶于DMEM培養(yǎng)基。Et-DHA溶于二甲基亞諷（Dimethyl Sulfoxide，DMS0) dDMSO的終濃度小于0.1 % (v/v)。在上述步驟中KA及化-畑A的濃度是通過 我們的預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇的。所有的操作在相同的實(shí)驗(yàn)條件下重復(fù)=次(n = 3)。[002引實(shí)施例2KA的細(xì)胞毒性 PC12細(xì)胞W每孔IX 105個(gè)細(xì)胞的密度接種到平板中。持續(xù)生長2地，之后在培養(yǎng)基 中添加不同濃度的KA(終濃度:0，l，3，10,30和100mM)。KA處理細(xì)胞12h后，開始所有的測定。 KA的細(xì)胞毒性通過MTT檢測測定(Mosmann，1983)。如圖IB所示，MTT檢測的細(xì)胞存活率結(jié)果 表明了 KA對細(xì)胞活性的抑制具有濃度依賴性，同時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的顯著性(P<0.01)。 KA在濃度為IOOmM時(shí)對PC12細(xì)胞的抑制率同樣大約達(dá)到了50%，但是與30mM處理組相比較 無顯著性差異，故將KA SOmM選作后續(xù)試驗(yàn)的PC12細(xì)胞適宜的損傷模型劑量。 實(shí)施例3Et-DHA對PC12細(xì)胞的保護(hù)作用的測定 每孔1X105個(gè)細(xì)胞的PC當(dāng)前第1頁1 2 本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
二十二碳六烯酸乙酯在制備改善興奮性神經(jīng)毒性藥物中的應(yīng)用。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳鯤，曹寬，曹麗麗，王雪君，劉珂莉，秦嘉裕，陳永順，
申請(專利權(quán))人：廣州大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：廣東;44
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。