將胸膜液分類的方法技術(shù)

本文公開了將胸膜液分類的方法。這些方法一般地包括測定受試者胸膜液中的指示劑納米粒子，比如脂質(zhì)，特別是大型脂質(zhì)的水平。脂質(zhì)的水平可經(jīng)核磁共振(NMR)，比如質(zhì)子NMR?(1H-NMR)，通過測量相應(yīng)于甲基質(zhì)子、亞甲基質(zhì)子、甲叉基質(zhì)子的NMR信號或其組合來測定。采用磁共振光譜學(xué)(MRS)，可體外對得自受試者的胸膜液樣品或體內(nèi)實施胸膜液中大型脂質(zhì)水平的測定。胸膜液可分類為滲出液或漏出液，靈敏度、選擇性、或其組合為85%、90%、95%、99%或者更高，選擇性為85%、90%、95%、99%。所述方法可與診斷和/或治療患有疾病、障礙或病癥的受試者結(jié)合。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】【專利說明】 相關(guān)申請的交叉參考 本申請要求2013年7月18日遞交的美國臨時申請第61/847610號的權(quán)益。2013年7月18 日遞交的申請第61/847610號通過引用而全部結(jié)合到本文中。 專利
本專利技術(shù)通常涉及把胸膜液樣品分類為漏出液或滲出液的方法以及這些方法輔助 疾病診斷的用途。 專利技術(shù)背景 胸膜液(PF)為用作重要的生理潤滑劑和機(jī)械屏障的胸膜腔的薄液層。PF的體積和流動 受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)。在疾病狀態(tài)下，PF流動的動力學(xué)受到損害，導(dǎo)致PF異常積聚。這種病癥稱為 胸腔積液。 在臨床實踐中，調(diào)查胸腔積液病因的第一步一般地是把PF分類為滲出性的（高蛋 白）或漏出性的（低蛋白）。這種分類用于縮小根本原因的鑒別診斷（即病因?qū)W）。例如，滲出 性胸腔積液的原因包括肺癌(原發(fā)性或繼發(fā)性）、感染(肺結(jié)核、非結(jié)核性肺炎或積膿癥)和 自身免疫性疾病，而漏出性胸腔積液的原因包括充血性心力衰竭、慢性腎病和肝硬化。 PF可根據(jù)Light標(biāo)準(zhǔn)（Light，et al ·，Ann Intern Med ·，77(4) : 507-513 (1972))分類為滲出液和漏出液。簡單地說，Light等實施了一項前瞻性研究，包括150個胸 膜液樣品(47個漏出液和103個滲出液），并且得出結(jié)論，存在以下特征中的任何一種高度提 示為滲出性胸腔積液：（1)胸膜液蛋白與血清蛋白的比率大于〇.5;(2)胸膜液LDH大于200 IU;或者(3)胸膜液LDH與血清LDH的比率大于0.6。這套標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)臨床應(yīng)用多于40年。 然而，Porcel自2115名受試者總結(jié)出Light標(biāo)準(zhǔn)的診斷準(zhǔn)確性，并且報道稱靈敏度 在96.7%-98· 2%的范圍內(nèi)和特異性在69.4-77.7%的范圍（Porcel，Respirology, 16(1): 44-52 (2011))。其它的前瞻性研究報道了65-86%的甚至更低的診斷特異性。Light標(biāo)準(zhǔn)的 非特異性會造成PF的錯誤分類。例如，漏出性PF可能會誤診為滲出性PF，導(dǎo)致受試者不必要 的檢測和治療。在一項包括249名患者的研究中，漏出液基于臨場表現(xiàn)的分類可能產(chǎn)生42-44%的誤分類率（Romero-Candeira, et al·，Chest, 122(5):1524-9 (2002))〇 為了提高PF分類的診斷準(zhǔn)確性，在PF的實驗室評價中考慮其它生化標(biāo)志物/方法。 其中例如，白蛋白梯度、NT-pro_BNP、BNP (Valdes, et al·，Arch Bronconeumol, 47(5): 246-51 (2011)、C-反應(yīng)蛋白（CRP) (Porcel, et al·，Eur. J. Intern. Med.，23(5): 447-50 (2012))、細(xì)胞計數(shù)(紅細(xì)胞和白細(xì)胞兩者）、葡萄糖濃度、pH值、腺苷脫氨酶(ADA)活 性（Chen, et al, Clin. Chim. Acta., 341(1_2):101_7 (2004)、淀粉酶、膽固醇（Vaz, et al., Curr. Opin. Pulm. Med., 7(4):183-6 (2001); Valdes, et al., Transl. Res·, 155(4):178-84))、甘油三酯（Valdes, et al, Lung, 188(6):483-9 (2010))、無細(xì) 胞DNA (Chan, et al·, Clin Chem. , 49(5):740_5 (2003))、蛋白區(qū)帶電泳（Chen and Lam, Clin Chem., 45(10): 1882-5 (1999))。然而，這些檢測沒有一個可以實現(xiàn)靈敏度和 特異性兩者大于90%。目前，沒有單一的標(biāo)志物具有令人滿意的靈敏度和特異性兩者。大多 數(shù)標(biāo)志物在犧牲其特異性的情況下具有高的靈敏度，反之亦然。 因此，本專利技術(shù)的一個目的是提供具有高的靈敏度和特異性兩者的把胸膜液分類為 漏出液或滲出液的方法。 本專利技術(shù)的另一個目的是提供診斷和治療的方法，該方法包括具有高的靈敏度和特 異性兩者的把胸膜液分類為漏出液或滲出液。 專利技術(shù)概述 公開了。這些方法一般地包括測定受試者胸膜液中的指示劑納米 粒子，特別是造影劑或脂質(zhì)的水平。例如，所述方法可包括測定受試者胸膜液中的脂質(zhì)，特 別是大型脂質(zhì)的水平。 與對照相比較具有較高水平的大型粒子脂質(zhì)的胸膜液一般地確定為滲出液;而， 與對照相比較具有較低水平的大型粒子脂質(zhì)的胸膜液一般地確定為漏出液。對照可為通過 將已知滲出液和漏出液的大型粒子脂質(zhì)的水平求平均值確定的平均閾值。閾值可采用與用 于測定胸膜液的大型脂質(zhì)水平相同的測定大型脂質(zhì)水平的方法進(jìn)行測定。類似地，與對照 相比較具有較高水平的指示劑納米粒子的胸膜液一般地確定為滲出液;而，與對照相比較 具有較低水平的指示劑納米粒子的胸膜液一般地確定為漏出液。 胸膜液中的指示劑納米粒子比如造影劑和大型脂質(zhì)的水平可與表明滲出液或漏 出液的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較。例如，如果胸膜液中大型粒子脂質(zhì)的水平在相應(yīng)于滲出液的標(biāo)準(zhǔn) 值的5%、10%、15%、20%、25%、50%或75%之內(nèi)，那么確定胸膜液為滲出液。如果胸膜液中大型粒 子脂質(zhì)的水平在相應(yīng)于漏出液的標(biāo)準(zhǔn)值的5%、10%、15%、20%、25%、50%或75%之內(nèi)，那么確定 胸膜液為漏出液。相應(yīng)于滲出液的標(biāo)準(zhǔn)值可為兩種或更多種已知滲出液的大型粒子脂質(zhì)水 平的平均值，和相應(yīng)于漏出液的標(biāo)準(zhǔn)值可為兩種或更多種已知漏出液的大型粒子脂質(zhì)水平 的平均值。類似地，如果胸膜液中指示劑納米粒子的水平在相應(yīng)于滲出液的標(biāo)準(zhǔn)值的5%、 10%、15%、20%、25%、50%或75%之內(nèi)，那么確定胸膜液為滲出液。如果胸膜液中指示劑納米粒 子的水平在相應(yīng)于漏出液的標(biāo)準(zhǔn)值的5%、10%、15%、20%、25%、50%或75%之內(nèi)，那么確定胸膜 液為漏出液。 對照或標(biāo)準(zhǔn)值可采用與用于測定胸膜液中指示劑納米粒子比如大型脂質(zhì)水平相 同的測定指示劑納米粒子比如造影劑和大型脂質(zhì)水平的方法進(jìn)行測定。在優(yōu)選的實施方案 中，指示劑納米粒子比如脂質(zhì)的水平通過核磁共振(NMR)，比如質(zhì)子匪R (1H-NMR)測定。在 一些實施方案中，所述方法包括通過測量相應(yīng)于一個或多個選自以下的脂質(zhì)信號的NMR信 號測定大型粒子脂質(zhì)的水平：甲基質(zhì)子(-CH 3)、亞甲基質(zhì)子（（-CH2-)n)和甲叉基質(zhì)子(-CH= CH-)。例如，脂質(zhì)甲基質(zhì)子(-CH3)對應(yīng)于匪R光譜上0.84 ppm ± 0.15的信號，脂質(zhì)亞甲基 質(zhì)子（（-CH2-)n)對應(yīng)于NMR光譜上1.26 ppm ± 0.15的信號，和脂質(zhì)甲叉基質(zhì)子(-CH=CH-) 對應(yīng)于NMR光譜上5.29 ppm ± 0.15的信號。在其它優(yōu)選的實施方案中，指示劑納米粒子比 如脂質(zhì)的水平通過計算機(jī)斷層掃描(CT)測定。對于CT方法，采用造影劑作為指示劑納米粒 子為優(yōu)選的。 某些方法包括另外的包括但不限于根據(jù)Light標(biāo)準(zhǔn)分析的測定，或者測量：白蛋白 梯度、NT-pro-BNP、BNP、C-反應(yīng)蛋白（CRP)、胸膜液的細(xì)胞計數(shù)、葡萄糖濃度、pH值、腺苷脫氨 酶(ADA)活性、淀粉酶、膽固醇、甘油三酯、無細(xì)胞DNA、蛋白區(qū)帶電泳、或其任何組合。另外的 測定或分本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
一種將胸膜液分類的方法，所述方法包括測定受試者胸膜液中指示劑納米粒子的水平，其中與對照相比較含有較高水平指示劑納米粒子的胸膜液確定為滲出液，和與對照相比較含有較底水平指示劑納米粒子的胸膜液確定為漏出液，其中所述對照為通過將已知滲出液和漏出液的指示劑納米粒子的水平進(jìn)行平均確定的平均閾值。

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：林青云，
申請(專利權(quán))人：香港大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：中國香港;81