丹酚酸C作為二肽基肽酶Ⅳ抑制劑及制備方法和用途技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了丹酚酸C作為二肽基肽酶Ⅳ抑制劑的用途及其在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)還公開(kāi)了一種治療糖尿病的藥物組合物，包含作為有效成分的丹酚酸C。本發(fā)明專利技術(shù)還公開(kāi)了一種藥物組合物的制備方法。中藥有效成分丹酚酸C具有抑制DPP-4活性的作用，為糖尿病的防治提供新的藥物選擇。本發(fā)明專利技術(shù)還公開(kāi)了一種丹酚酸C的制備方法，采用大孔樹(shù)脂與制備液相色譜相結(jié)合的提取工藝，可以快速準(zhǔn)確地得到丹酚酸C。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及中藥化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及丹酚酸C作為二肽基肽酶Ⅳ抑制劑及制備方法和用途。
技術(shù)介紹
糖尿病是一種以高血糖為特征的常見(jiàn)內(nèi)分泌代謝性疾病。近年來(lái)，隨著人民生活水平的提高、生活方式的改變及人口老齡化，糖尿病的發(fā)病率不斷升高。另外，餐后高血糖和高胰島素血癥是發(fā)生糖尿病大血管并發(fā)癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。雖然有用于治療糖尿病綜合征的藥物，但是今天在對(duì)糖尿病病人的治療中最具有挑戰(zhàn)的目標(biāo)仍然是使血糖水平盡可能地接近正常。近年來(lái)，在糖尿病新藥開(kāi)發(fā)領(lǐng)域，從胰島素的新劑型，到降糖藥的新作用機(jī)制，如GLP-1類似物，DPP-4抑制劑和SGLT-2抑制劑等，都取得了極大的進(jìn)展。人體攝入的碳水化合物經(jīng)過(guò)小腸上皮細(xì)胞的酶(如淀粉酶和α-葡萄糖苷酶)的水解作用生成葡萄糖之后，才被吸收進(jìn)入血液循環(huán)。DPP-4作為一種絲氨酸蛋白酶，在腸道中高表達(dá)，它能夠分解腸道細(xì)胞分泌的腸促胰島素(GLP-1)。通過(guò)抑制DPP-4活性，而阻斷其分解GLP-1，使GLP-1能夠持續(xù)發(fā)揮刺激胰島素分泌、抑制升糖素、抑制胃排空和讓胰島細(xì)胞重生等作用，從而降低血糖。自2009年至今，我國(guó)相繼批準(zhǔn)引進(jìn)了全球新一代二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)抑制劑類藥物西格列汀、維格列汀、沙格列汀、利格列汀、阿格列汀和西格列汀雙胍等6個(gè)藥物。DPP-4抑制劑是近年研發(fā)的一種新型口服降糖藥，目前在臨床使用越來(lái)越廣泛，不同的DPP-4抑制劑在結(jié)構(gòu)和藥物代謝動(dòng)力學(xué)上雖存在明顯差異，但所有DPP-4抑制劑均顯示出相近的降糖效果和良好的安全性，因此這一類藥物也被越來(lái)越多地應(yīng)用在降血糖臨床治療上。從而推動(dòng)了國(guó)內(nèi)糖尿病治療市場(chǎng)的快速發(fā)展。現(xiàn)有的DPP-4抑制劑大多為化學(xué)合成小分子，源于中藥的DPP-4抑制劑還少見(jiàn)報(bào)道。從已知的具有一定降糖效果的中藥方中提取有效成分，進(jìn)而分析有效成分的化學(xué)組成、作用機(jī)理，是篩選藥用化合物的一種有效途徑。消渴安膠囊是目前治療2型糖尿病的臨床經(jīng)驗(yàn)方，具有清熱生津、益氣養(yǎng)陰、活血化瘀的功效，具有一定的降血糖作用。其處方包括地黃、知母、黃連、地骨皮、枸杞子、玉竹、人參、丹參八味藥材。本課題組在前期研究中從消渴安膠囊內(nèi)容物中分析得到一種化合物丹酚酸C。丹酚酸來(lái)源于唇形科植物丹參(SalviamiltiorrhizaBge.)。藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，丹酚酸在心腦血管方面有重要的藥理作用，如具有保護(hù)心臟、保護(hù)腦損傷等作用，對(duì)血栓的形成也有重要的影響；丹酚酸類化合物具有很強(qiáng)的抗氧化作用，可以清除超氧陰離子和羥基自由基，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，并且影響細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度及ATP酶活性。但是本發(fā)明所述的丹酚酸C，是在篩選研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的一種DPP-4抑制劑，其在防治糖尿病的作用尚未見(jiàn)有報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)提供了丹酚酸C在抑制DPP-4活性方面的新用途，為糖尿病的防治提供新的藥物選擇。丹酚酸C作為二肽基肽酶Ⅳ抑制劑的用途。研究證明，丹酚酸C具有抑制DPP-4活性的作用。采用課題組建立的DPP-4抑制劑篩選方法，檢測(cè)到丹酚酸C在25mg/L濃度下對(duì)DPP-4抑制率為92.40%。本專利技術(shù)提供了丹酚酸C在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。本專利技術(shù)還提供了一種治療糖尿病的藥物組合物，包含作為有效成分的丹酚酸C。作為優(yōu)選，還包括藥劑學(xué)上接受的藥物賦形劑或載體。藥物賦形劑或載體可以賦予藥物一定劑型，有效保證藥物有效成分的釋放和吸收。具體制劑按照藥劑學(xué)上記載的方法制備即可。作為優(yōu)選，所述藥物組合物為口服給藥的劑型。口服給藥方式簡(jiǎn)便，不直接損傷皮膚或黏膜，減少感染風(fēng)險(xiǎn)。由于糖尿病患者需要長(zhǎng)期用藥，故口服給藥是一種經(jīng)濟(jì)安全的方式。口服給藥的劑型可以為溶液劑、片劑、膠囊劑或顆粒劑。作為優(yōu)選，所述口服給藥的劑型為滴丸劑。滴丸與其他劑型相比具有提高藥物生物利用度、增加藥物穩(wěn)定性、緩釋效應(yīng)、減少藥物在體內(nèi)滅活等優(yōu)點(diǎn)，并且制備滴丸劑的設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、工藝周期短、生產(chǎn)率高，所以本專利技術(shù)選用滴丸劑為優(yōu)選劑型。本專利技術(shù)還提供了一種藥物組合物的制備方法，取丹酚酸C與聚乙二醇混合均勻，加熱熔融得到混合藥液，混合藥液滴至液體石蠟中，除油，制得滴丸。本專利技術(shù)還提供了一種藥物組合物的制備方法，取丹酚酸C0.5g與10.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融得到混合藥液，混合藥液滴至液體石蠟中，除油，制得滴丸。本專利技術(shù)在前期研究中，從消渴安膠囊內(nèi)容物中分離提取到一種具有抑制DPP-4活性的化合物丹酚酸C，丹酚酸C來(lái)源于唇形科植物丹參，因此，本專利技術(shù)提供了一種從丹參中提取丹酚酸C的方法。一種丹酚酸C的制備方法，包括以下步驟：(1)將丹參粉碎后加入甲醇中，超聲提取，獲得提取液。(2)將提取液濃縮成浸膏，與大孔樹(shù)脂進(jìn)行拌樣，裝柱后用乙醇-水洗脫，合并丹酚酸C流分的洗脫液，濃縮干燥后得粗品。(3)將粗品溶解在無(wú)水乙醇中，采用制備液相色譜純化，對(duì)目標(biāo)流分進(jìn)行濃縮、干燥，得到所述丹酚酸C。利用超聲波振動(dòng)使甲醇快速進(jìn)入丹參中，將丹參中的有機(jī)成分完全地溶于甲醇中。作為優(yōu)選，步驟(1)中，加入5~10倍量的甲醇超聲提取進(jìn)行1~3次，合并濾液得提取液。作為優(yōu)選，大孔樹(shù)脂為反相硅膠。步驟(2)中，依次用水、濃度≤40%的乙醇洗脫雜質(zhì)，再收集濃度≥95%的乙醇洗脫的洗脫液。作為優(yōu)選，步驟(3)中，制備液相色譜條件為：色譜柱填料SB-C18，21.2mm×250mm，7μm；流動(dòng)相為水-乙腈，兩者的體積比為70:30，流速為5~10mL/min；柱溫為25~35℃；收集24~27min時(shí)間段內(nèi)的流分即為目標(biāo)流分。本專利技術(shù)采用大孔樹(shù)脂與制備液相色譜相結(jié)合的提取分離工藝，能夠有效地除去糖、蛋白質(zhì)、氨基酸等雜質(zhì)，提高有效成分的含量。采用本專利技術(shù)的提取方法得到的中藥有效組分化學(xué)成分簡(jiǎn)單明確，在藥理研究上易于闡明其作用機(jī)制，在生產(chǎn)應(yīng)用中易于藥物的質(zhì)量控制。本專利技術(shù)具備的有益效果：(1)本專利技術(shù)提供的中藥有效成分丹酚酸C具有抑制DPP-4活性的作用，為糖尿病的防治提供新的藥物選擇；(2)本專利技術(shù)采用大孔樹(shù)脂與制備液相色譜相結(jié)合的提取工藝，可以快速準(zhǔn)確地得到丹酚酸C。附圖說(shuō)明圖1為中藥有效組分的LC-MS分析圖。圖2為中藥有效組分中丹酚酸C的質(zhì)譜圖。圖3為陽(yáng)性藥和中藥有效組分丹酚酸C對(duì)DPP-4的抑制作用，其中C08為丹酚酸C。圖4為丹酚酸C抑制DPP-4量效關(guān)系圖。圖5為丹酚酸C對(duì)3T3-L1細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響（油紅O染色照片）。圖6為丹酚酸C對(duì)胰島素抵抗BNLCL2細(xì)胞葡萄糖消耗作用的影響。具體實(shí)本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
丹酚酸C作為二肽基肽酶Ⅳ抑制劑的用途。

【技術(shù)特征摘要】
1.丹酚酸C作為二肽基肽酶Ⅳ抑制劑的用途。
2.丹酚酸C在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
3.一種治療糖尿病的藥物組合物，其特征在于，包含作為有效成分的丹酚酸C。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物中丹酚酸C的百分比
含量為5~65%。
5.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，還包括藥劑學(xué)上接受的藥物賦形劑或
載體。
6.一種藥物組合物的制備方法，其特征在于，取丹酚酸C與聚乙二醇混合均勻，加熱熔
融得到混合藥液，混合藥液滴至液體石蠟中，除油，制得滴丸。
7.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于，取丹酚酸C0.5g與10.5
g的聚乙二醇混合均勻，加熱熔融得到混合藥液，混合藥液滴至液體石蠟中，除油，制得滴
丸。
8.一種丹酚酸C的制備方法，其特征在于，...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：趙筱萍，王毅，鄒敬韜，蓋男，田旭輝，陳家驕，黃小萍，鄧昌瑞，王鳳玉，陳峰，劉東輝，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：通化華夏藥業(yè)有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：吉林;22