一種無機磷比色法檢測試劑盒制造技術

本發明專利技術公開了一種無機磷比色法檢測試劑盒,屬于臨床體外檢測試劑技術領域。本發明專利技術試劑盒包括試劑R。通過在試劑R中加入一定量的還原劑1.7?mmol/L對甲基氨基苯酚硫酸鹽和30ml/L?TritonX?100,有效的提高了試劑盒的穩定性和分析靈敏度,其線性范圍也較好,試劑的準確度高,有利于在市場中進一步的推廣使用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及臨床體外檢測試劑
,特別涉及一種無機磷比色法檢測試劑盒。
技術介紹
人體內含磷17mol(530g)，其中87％存在骨骼中，其余在軟組織中和細胞內。體內許多重要的物質如某些蛋白質、脂類化合物、核酸、輔酶等都含有磷；在酸堿平衡中，磷酸鹽亦具有重要的作用。增高:見于甲狀旁腺功能減退、慢性腎病、維生素D過多癥、多發性骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、骨折愈合期等。使用雄激素、合成類激素及某些利尿藥物時，血磷也會增高。減低:見于甲狀旁腺功能亢進、維生素D缺乏、軟骨病、嚴重糖尿病、磷吸收不良等。正常妊娠時亦可輕度減低。服用含鋁抗酸藥物、合成雌激素、避孕藥及苯巴比妥等藥物時，血磷也會減低。磷鉬酸法是測定無機磷(InorganicPhosphorus,IP)的主要方法，但該法存在穩定性差和靈敏度低的缺陷。該試劑盒通過更換還原劑對甲基氨基苯酚和添加蛋白助溶劑TritonX-100彌補了該方法的上述缺陷，使其更適用于自動生化分析儀。
技術實現思路
針對于現有技術存在的問題,本專利技術提供了一種無機磷比色法檢測試劑盒,該試劑盒與常規的試劑盒相比,穩定性和線性范圍比常規的檢測試劑盒要好,分析靈敏度高,有利于試劑在臨床上的推廣應用。本專利技術是通過以下措施實現的：一種無機磷比色法檢測試劑盒,其特征在于,它包含試劑R,其中試劑R組成為：0.28mmol/L鉬酸銨、1.7mmol/L對甲基氨基苯酚硫酸鹽、30ml/LTritonX-100、7.7mmol/L疊氮鈉。所述試劑R在使用時和血清的比例300：3。本專利技術的試劑盒在自動生化分析儀日立7180上進行,其具體使用方法如圖4。加入生理鹽水、樣本或校準品3μl,之后再加入R試劑300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度為零,記錄吸光度值A。本專利技術的有益效果：本專利技術提供的無機磷比色法檢測試劑盒,通過更換試劑R中的還原劑1.7mmol/L對甲基氨基苯酚硫酸鹽，增加了試劑的穩定性；通過添加30ml/LTritonX-100，降低了血清中的蛋白對實驗準確度的影響。附圖說明圖1實施例2準確度驗證實驗檢測結果與對照組檢測結果相關性；圖2實施例3準確度驗證實驗檢測結果與對照組檢測結果相關性；圖3實施例4準確度驗證實驗檢測結果與對照組檢測結果相關性；圖4本專利技術的試劑盒在自動生化分析儀日立7180上進行的具體使用方法。具體實施方式為了更好的理解本專利技術,下面結合具體實施例來進一步詳細說明。實施例1一種無機磷比色法檢測試劑盒,它包括試劑R。其中試劑R組成為：鉬酸銨0.28mmol/L硫酸130mmol/L疊氮鈉7.7mmol/L本實施例描述的試劑盒,在使用時,其測定方法是采用日立7180自動分析儀,操作如下：加入生理鹽水、樣本或校準品3μl,之后再加入R試劑300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度為零,記錄吸光度值A。實施例2一種無機磷比色法檢測試劑盒,它包括試劑R。其中試劑R組成為：本實施例描述的試劑盒,在使用時,其測定方法是采用日立7180自動分析儀,操作如下：加入生理鹽水、樣本或校準品3μl,之后再加入R試劑300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度為零,記錄吸光度值A。具體測定方法同實施例1。實施例3一種無機磷比色法檢測試劑盒,它包括試劑R。其中試劑R組成為：本實施例描述的試劑盒,在使用時,其測定方法是采用日立7180自動分析儀,操作如下：加入生理鹽水、樣本或校準品3μl,之后再加入R試劑300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度為零,記錄吸光度值A。具體測定方法同實施例1。實施例4一種無機磷比色法檢測試劑盒,它包括試劑R。其中試劑R組成為：本實施例描述的試劑盒,在使用時,其測定方法是采用日立7180自動分析儀,操作如下：加入生理鹽水、樣本或校準品3μl,之后再加入R試劑300μl孵育5min后,以空白管校正吸光度為零,記錄吸光度值A。具體測定方法同實施例1。對上述實施例1-4中制得的試劑盒分析性能進行實驗驗證。準確度驗證實驗：將實施例2、3、4的試劑盒作為實驗組,市場上獲得認可的一種準確度優異的無機磷比色法檢測試劑盒(深圳某公司生產)作為對照組進行對比實驗,對40個樣本進行檢測,檢測的結果如圖1-圖3。通過圖1-圖3的檢測數據可知,實施例2、3、4檢測試劑盒與對照檢測試劑盒的檢測結果相關性分別為0.99、0.9967、0.9998,相關性比較好,表明本專利技術的試劑盒與市場上獲得認可的具有優異準確度的無機磷比色法檢測試劑盒有高度一致性,證明本專利技術試劑盒添加的其他各種成分對其準確性不會造成影響,試劑盒依然保持較好的準確度。線性相關性驗證實驗：找到無機磷高值樣本為4.0mmol/L,用生理鹽水進行系列稀釋,配制6個不同濃度的樣本,依次為4.0mmol/L、3.2mmol/L、2.4mmol/L、1.6mmol/L、0.8mmol/L、0mmol/L濃度的樣本,每個濃度水平各樣本分別測定三次,分別取其平均值。分別利用實施例1、2、3、4的試劑進行檢測。檢測結果如表1所示。表1實施例1-4線性相關驗證實驗檢測結果上述檢測結果顯示,實施例1-4檢測結果相關性均大于0.990,但實施例2、3、4的檢測結果大于0.998,與實施例1相比具有更好的線性相關性,這說明本專利技術試劑具有更好的線性相關性。穩定性驗證實驗：在2℃-8℃、無腐蝕性氣體的避光環境中貯存試劑,檢測四種實施例試劑的穩定性。四種試劑每月選取同一樣本測定其吸光度三次,取平均值,與新鮮的實施例1試劑檢測結果進行對比,從而確定試劑的穩定時間。檢測數據如表2。表2穩定性驗證實驗檢測結果實驗結果顯示,實施例1試劑在2℃-8℃、無腐蝕性氣體的避光環境中貯存15個月穩定,而實施例2、3、4試劑在2℃-8℃、無腐蝕性氣體的避光環境中貯存24個月穩定,說明在試劑中Triton×100和還原劑對甲基氨基苯酚硫酸鹽二者共同作用有效的提高了無機磷比色法檢測試劑盒的穩定性。分析靈敏度驗證實驗：用本專利技術無機磷比色法檢測試劑盒測試已知濃度在3.5mmol/L的樣本,記錄吸光度差值。分別利用實施例1、2、3、4的試劑進行檢測。檢測結果如表3所示。表3分析靈敏度實驗結果通過檢測數據可知,實施例2、3、4檢測試劑盒的吸光度差值均比實施例1的高,說明在試劑中更換還原劑1.7mmol/L對甲基氨基苯酚硫酸鹽和30ml/LTritonX-100能增強試劑的分析靈敏度。綜合以上分析,本專利技術提供的無機磷比色法檢測試劑盒,在試劑R中通過加入一定量的對甲基氨基苯酚硫酸鹽和TritonX-100能夠有效的提高試劑盒的穩定性和分析靈敏度,線性范圍較好本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種無機磷比色法檢測試劑盒,?其特征在于,?試劑R組成為：0.28?mmol/L鉬酸銨、1.7?mmol/L對甲基氨基苯酚硫酸鹽、30?ml/L?TritonX?100、7.7?mmol/L疊氮鈉。

【技術特征摘要】
1.一種無機磷比色法檢測試劑盒,其特征在于,試劑R組成為：0.28mmol/L鉬酸銨、1.7mmol/L對甲基氨基苯酚硫酸鹽、30ml/LTritonX-100、7.7mmol/L疊氮鈉。
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【專利技術屬性】
技術研發人員：王綺，李艷梅，譚柏清，
申請(專利權)人：山東博科生物產業有限公司，
類型：發明
國別省市：山東;37