一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法技術(shù)

技術(shù)編號(hào)：13375969 閱讀：130 留言：0更新日期：2016-07-20 23:34

本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)涉及食品檢測(cè)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法，步驟如下：樣品制備；空白樣品制備；獲取八份不同已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液；已知濃度樣品的制備；確定沙門(mén)氏菌與摻硼金剛石膜電極響應(yīng)電流的依從關(guān)系；待測(cè)樣品的檢測(cè)。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)能夠檢測(cè)出肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌的含量，大大降低了人們感染沙門(mén)氏菌的幾率，有利于人們的身體健康，本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)檢測(cè)方法具有操作簡(jiǎn)單、不易受干擾、檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。

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【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專(zhuān)利技術(shù)涉及食品檢測(cè)領(lǐng)域，具體是一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法。
技術(shù)介紹
沙門(mén)氏菌病是公共衛(wèi)生學(xué)上具有重要意義的人畜共患病之一，其病原就是沙門(mén)氏菌，沙門(mén)氏菌屬腸道細(xì)菌科，能夠引起食物中毒，導(dǎo)致胃腸炎、傷寒和副傷寒。它們除可感染人外，還可感染很多動(dòng)物包括哺乳類(lèi)、鳥(niǎo)、爬行類(lèi)、魚(yú)、兩棲類(lèi)及昆蟲(chóng)。人畜感染后可呈無(wú)癥狀帶菌狀態(tài)，也可表現(xiàn)為有臨床癥狀的致死疾，它可能加重病態(tài)或死亡率，或者降低動(dòng)物的繁殖生產(chǎn)力。隨著人們生活水平的提高，肉食品逐漸變?yōu)槿藗兊娜粘Ｊ称罚缓螅藗兏腥旧抽T(mén)氏菌的重要來(lái)源就是肉食品。為了人們健康，檢測(cè)肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌的含量勢(shì)在必行。目前，沙門(mén)氏菌的檢測(cè)方法主要包括培養(yǎng)法和免疫學(xué)檢測(cè)法。培養(yǎng)法和免疫學(xué)檢測(cè)法是根據(jù)沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng)特性，采用選擇性的培養(yǎng)基使沙門(mén)氏菌成為優(yōu)勢(shì)菌群，然后基于沙門(mén)氏菌的生化特性和菌體表面抗原特性，利用生化反應(yīng)和抗原-抗體反應(yīng)的特異性進(jìn)行沙門(mén)氏菌的檢測(cè)。這些方法大都存在操作復(fù)雜、易受干擾、難以定量檢測(cè)的問(wèn)題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的目的在于提供一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法，以解決上述
技術(shù)介紹
中提出的問(wèn)題。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專(zhuān)利技術(shù)提供如下技術(shù)方案：一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法，步驟如下：1)樣品制備，稱(chēng)取適量肉類(lèi)樣品，使用12-15倍的生理鹽水均質(zhì)拍打15-20min，并在4000-5000rmp下離心分離10-15min，過(guò)濾，取上層清液，將殘?jiān)俅渭尤?...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟如下：1)樣品制備，稱(chēng)取適量肉類(lèi)樣品，使用12?15倍的生理鹽水均質(zhì)拍打15?20min，并在4000?5000rmp下離心分離10?15min，過(guò)濾，取上層清液，將殘?jiān)俅渭尤??10倍的生理鹽水均質(zhì)拍打15?20min，并在4000?5000rmp下離心分離10?15min，過(guò)濾，取上層清液，合并兩次的上層清液，獲得上層總液，備用；2)空白樣品制備，稱(chēng)取適量不含沙門(mén)氏菌的空白肉類(lèi)樣品，按照步驟1)，獲取空白上層總液，備用；3)獲取八份不同已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液，取第一個(gè)濃度沙門(mén)氏菌菌液用無(wú)菌生理鹽水稀釋103、104、105、106、107、108倍，各取200μL沙門(mén)氏菌的稀釋液分別注入到12個(gè)培養(yǎng)皿中(每個(gè)稀釋倍數(shù)做平行樣)，將各個(gè)培養(yǎng)皿中的稀釋液分別涂布于LB平板上，于35～37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,計(jì)數(shù)每個(gè)平板上的可疑菌落數(shù),挑取可疑菌落進(jìn)行生化和血清學(xué)鑒定驗(yàn)證后，得到1個(gè)已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液。以同樣的步驟對(duì)第二個(gè)濃度進(jìn)行培養(yǎng)分析，以此類(lèi)推得到多份不同已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液；4)已知濃度樣品的制備，稱(chēng)適量步驟2)制備的空白...

【技術(shù)特征摘要】
1.一種肉類(lèi)中沙門(mén)氏菌含量的檢測(cè)方法，其特征在于，步驟如下：
1)樣品制備，稱(chēng)取適量肉類(lèi)樣品，使用12-15倍的生理鹽水均質(zhì)拍打
15-20min，并在4000-5000rmp下離心分離10-15min，過(guò)濾，取上層清液，將殘
渣再次加入8-10倍的生理鹽水均質(zhì)拍打15-20min，并在4000-5000rmp下離心
分離10-15min，過(guò)濾，取上層清液，合并兩次的上層清液，獲得上層總液，備
用；
2)空白樣品制備，稱(chēng)取適量不含沙門(mén)氏菌的空白肉類(lèi)樣品，按照步驟1)，
獲取空白上層總液，備用；
3)獲取八份不同已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液，取第一個(gè)濃度沙門(mén)氏菌菌液用
無(wú)菌生理鹽水稀釋103、104、105、106、107、108倍，各取200μL沙門(mén)氏菌的稀
釋液分別注入到12個(gè)培養(yǎng)皿中(每個(gè)稀釋倍數(shù)做平行樣)，將各個(gè)培養(yǎng)皿中的
稀釋液分別涂布于LB平板上，于35～37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,計(jì)數(shù)每個(gè)平板上的
可疑菌落數(shù),挑取可疑菌落進(jìn)行生化和血清學(xué)鑒定驗(yàn)證后，得到1個(gè)已知濃度的
沙門(mén)氏菌溶液。以同樣的步驟對(duì)第二個(gè)濃度進(jìn)行培養(yǎng)分析，以此類(lèi)推得到多份不
同已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液；
4)已知濃度樣品的制備，稱(chēng)適量步驟2)制備的空白上層總液，均分為八
份，并分別加入同等體積的步驟3)制備的已知濃度的沙門(mén)氏菌溶液，獲得八份
已知濃度樣品；
5)確定沙門(mén)氏菌與摻硼金...