一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法技術

本發明專利技術公開了一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法，包括如下步驟：菜籽粕粉原料的制備；菜籽蛋白萃取液的制備；調節菜籽蛋白萃取液的pH和溫度，并加入堿性纖維素酶進行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；調節一次酶解液的pH和溫度，并加入堿性果膠酶進行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；調節二次酶解液的pH和溫度，并加入糖化酶進行超聲輔助酶解，得到三次酶解液；調節三次酶解液pH后進行酸沉處理，離心分離得到酸沉蛋白；對酸沉蛋白進行微波滅酶處理，得到滅酶蛋白，將滅酶蛋白水洗至呈中性，并進行冷凍干燥處理，既得成品的有機菜籽蛋白。該酶法制備有機菜籽蛋白的方法，工藝安全、制備便捷、提取的有機菜籽蛋白純度高。

【技術實現步驟摘要】


本專利技術涉及菜籽蛋白
，具體涉及一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法。

技術介紹

油菜籽是一種重要的油料作物，在我國，油菜籽的種植面積約1億畝以上，產量更是高達1300多萬噸，居世界之首，每年加工過程中產生的菜籽粕達600多萬噸；油菜籽中蛋白質含量豐富，達25～27%，通過浸出除油后的菜籽粕中蛋白質含量高達35～45%，開發前景廣闊。此外，菜籽粕中氨基酸的種類豐富，富含8種人體必需氨基酸，能滿足人體生理機能的需要，沒有限制性氨基酸，其氨基酸組成和含量符合FAO/WHO推薦模式值，與大豆、花生、棉籽等其他植物蛋白相比，菜籽蛋白的營養價值較高。目前，水相萃取法是一種應用于植物蛋白中提取比較廣泛的方法，該方法工藝簡單、成本低，易于工業化生產，但是提取的蛋白的純度只能達到60%～70%。因此，研究一種有機菜籽蛋白的制備方法很有必要。

技術實現思路

針對上述技術中存在的不足之處，本專利技術提供了一種工藝安全、制備便捷、提取的有機菜籽蛋白純度高的酶法制備有機菜籽蛋白的方法。
本專利技術解決其技術問題所采用的技術方案是：一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法，包括如下步驟：步驟一、菜籽粕粉原料的制備；步驟二、菜籽蛋白萃取液的制備：將菜籽粕粉原料和水混勻制得一次漿液，調節一次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的一次萃取清液和下層的一次沉淀；再將一次沉淀和水混勻制得二次漿液，調節二次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的二次萃取清液和下層的二次沉淀；再將二次沉淀和水混勻制得三次漿液，調節三次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的三次萃取清液；并將一次萃取清液、二次萃取清液和三次萃取清液合并混勻，即得菜籽蛋白萃取液；步驟三、一次酶解：調節菜籽蛋白萃取液的pH和溫度，并加入堿性纖維素酶進行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；步驟四、二次酶解：調節一次酶解液的pH和溫度，并加入堿性果膠酶進行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；步驟五、三次酶解：調節二次酶解液的pH和溫度，并加入糖化酶進行超聲輔助酶解，得到三次酶解液；步驟六、酸沉：調節三次酶解液pH后進行酸沉處理，離心分離得到酸沉蛋白；步驟七、微波滅酶：對酸沉蛋白進行微波滅酶處理，得到滅酶蛋白，將滅酶蛋白水洗至呈中性，并進行冷凍干燥處理，既得成品的有機菜籽蛋白。
優選的，所述步驟一中菜籽粕粉原料的制備過程如下：將菜籽脫皮后采用正己烷浸泡，脫除溶劑后得到脫脂菜籽粕，其殘油量為0.7～0.9%，將脫脂菜籽粕粉碎過40～80目篩，即得菜籽粕粉原料。
優選的，所述步驟二中菜籽蛋白萃取液的制備過程如下：將菜籽粕粉原料和水按料液比1g:15～20mL混勻制得一次漿液，向一次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取25～35分鐘，萃取溫度為40～45℃，待萃取結束，離心得到上層的一次萃取清液和下層的一次沉淀；再將一次沉淀和水按料液比1g:10～12mL混勻制得二次漿液，向二次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取15～20分鐘，萃取溫度為48～52℃，待萃取結束，離心得到上層的二次萃取清液和下層的二次沉淀；再將二次沉淀和水按料液比1g:6～8mL混勻制得三次漿液，向三次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取6～12分鐘，萃取溫度為55～60℃，待萃取結束，離心得到上層的三次萃取清液；并將一次萃取清液、二次萃取清液和三次萃取清液合并混勻，即得菜籽蛋白萃取液。
優選的，所述步驟三中一次酶解的過程如下：調節菜籽蛋白萃取液的pH至10～11，并加入堿性纖維素酶進行超聲輔助酶解，堿性纖維素酶的加入量為菜籽蛋白萃取液用量的200～400u/g，酶解反應溫度為45～55℃，酶解反應時間為50～70分鐘，超聲強度為1.0～1.2W/cm3，待一次酶解反應結束，得到一次酶解液。
優選的，所述步驟四中二次酶解的過程如下：調節一次酶解液的pH至10～11，并加入堿性果膠酶進行超聲輔助酶解，堿性果膠酶的加入量為一次酶解液用量的600～800u/g，酶解反應溫度為45～50℃，酶解反應時間為40～60分鐘，超聲強度為1.2～1.4W/cm3，待二次酶解反應結束，得到二次酶解液。
優選的，所述步驟五中三次酶解的過程如下：調節二次酶解液的pH至4～5，并加入糖化酶進行超聲輔助酶解，糖化酶的加入量為二次酶解液用量的800～1000u/g，酶解反應溫度為58～62℃，酶解反應時間為40～60分鐘，超聲強度為0.8～1.0W/cm3，待三次酶解反應結束，得到三次酶解液。
優選的，所述步驟六中酸沉的過程如下：調節三次酶解液pH至4.5進行酸沉，待出現絮狀物后靜置1～2小時，離心分離得到酸沉蛋白。
優選的，所述步驟七中微波滅酶的過程如下：對酸沉蛋白進行微波滅酶處理，微波功率為500～800W，滅酶溫度為80～90℃，滅酶時間為2～3分鐘，待微波滅酶結束，得到滅酶蛋白，將滅酶蛋白水洗至呈中性，并進行冷凍干燥處理，既得成品的有機菜籽蛋白。
本專利技術與現有技術相比，其有益效果是：
（1）本專利技術提供的酶法制備有機菜籽蛋白的方法，通過先后三次進行超聲波輔助萃取，使得菜籽粕粉原料中的菜籽蛋白充分溶出，極大縮短了菜籽蛋白的提取時間，有效提高了有機菜籽蛋白的提取率；
（2）通過分別依次采用堿性纖維素酶、堿性果膠酶和糖化酶進行酶解處理，并通過微波滅酶處理，以提供合適的微環境來溶解蛋白，可有效提取菜籽細胞內的蛋白，從而增加成品有機菜籽蛋白的純度；
（3）該酶法制備有機菜籽蛋白的方法，工藝安全、制備便捷、提取的有機菜籽蛋白純度高達85.0%以上。
附圖說明
圖1是本專利技術所述酶法制備有機菜籽蛋白的方法的工藝流程圖。
具體實施方式
下面結合附圖對本專利技術做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據以實施。
如圖1所示，本專利技術提供了一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法，包括如下步驟：
步驟一、菜籽粕粉原料的制備：將菜籽脫皮后采用正己烷浸泡，脫除溶劑后得到脫脂菜籽粕，其殘油量為0.7～0.9%，將脫脂菜籽粕粉碎過40～80目篩，即得菜籽粕粉原料。
步驟二、菜籽蛋白萃取液的制備：將菜籽粕粉原料和水按料液比1g:15～20mL混勻制得一次漿液，向一次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取25～35分鐘，萃取溫度為40～45℃，待萃取結束，離心得到上層的一次萃取清液和下層的一次沉淀；再將一次沉淀和水按料液比1g:10～12mL混勻制得二次漿液，向二次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取15～20分鐘，萃取溫度為48～52℃，待萃取結束，離心得到上層的二次萃取清液和下層的二次沉淀；再將二次沉淀和水按料液比1g:6～8mL混勻制得三次漿液，向三次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取6～12分鐘，萃取溫度為55～60℃，待萃取結束，離心得到上層的三次萃取清液；并將一次萃取清液、二次萃取清液和三次萃取清液合并混勻，即得菜籽蛋白萃取液。
步驟三、一次酶解：調節菜籽蛋白萃取液的pH至10～11，并加入堿性纖維素酶進行超聲輔助本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法，其特征在于，包括如下步驟：步驟一、菜籽粕粉原料的制備；步驟二、菜籽蛋白萃取液的制備：將菜籽粕粉原料和水混勻制得一次漿液，調節一次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的一次萃取清液和下層的一次沉淀；再將一次沉淀和水混勻制得二次漿液，調節二次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的二次萃取清液和下層的二次沉淀；再將二次沉淀和水混勻制得三次漿液，調節三次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的三次萃取清液；并將一次萃取清液、二次萃取清液和三次萃取清液合并混勻，即得菜籽蛋白萃取液；步驟三、一次酶解：調節菜籽蛋白萃取液的pH和溫度，并加入堿性纖維素酶進行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；步驟四、二次酶解：調節一次酶解液的pH和溫度，并加入堿性果膠酶進行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；步驟五、三次酶解：調節二次酶解液的pH和溫度，并加入糖化酶進行超聲輔助酶解，得到三次酶解液；步驟六、酸沉：調節三次酶解液pH后進行酸沉處理，離心分離得到酸沉蛋白；步驟七、微波滅酶：對酸沉蛋白進行微波滅酶處理，得到滅酶蛋白，將滅酶蛋白水洗至呈中性，并進行冷凍干燥處理，既得成品的有機菜籽蛋白。...

【技術特征摘要】
1.一種酶法制備有機菜籽蛋白的方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟一、菜籽粕粉原料的制備；
步驟二、菜籽蛋白萃取液的制備：將菜籽粕粉原料和水混勻制得一次漿液，調節一次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的一次萃取清液和下層的一次沉淀；再將一次沉淀和水混勻制得二次漿液，調節二次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的二次萃取清液和下層的二次沉淀；再將二次沉淀和水混勻制得三次漿液，調節三次漿液pH，并進行超聲波輔助萃取，待萃取結束，離心得到上層的三次萃取清液；并將一次萃取清液、二次萃取清液和三次萃取清液合并混勻，即得菜籽蛋白萃取液；
步驟三、一次酶解：調節菜籽蛋白萃取液的pH和溫度，并加入堿性纖維素酶進行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；
步驟四、二次酶解：調節一次酶解液的pH和溫度，并加入堿性果膠酶進行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；
步驟五、三次酶解：調節二次酶解液的pH和溫度，并加入糖化酶進行超聲輔助酶解，得到三次酶解液；
步驟六、酸沉：調節三次酶解液pH后進行酸沉處理，離心分離得到酸沉蛋白；
步驟七、微波滅酶：對酸沉蛋白進行微波滅酶處理，得到滅酶蛋白，將滅酶蛋白水洗至呈中性，并進行冷凍干燥處理，既得成品的有機菜籽蛋白。
2.如權利要求1所述的酶法制備有機菜籽蛋白的方法，其特征在于，所述步驟一中菜籽粕粉原料的制備過程如下：將菜籽脫皮后采用正己烷浸泡，脫除溶劑后得到脫脂菜籽粕，其殘油量為0.7～0.9%，將脫脂菜籽粕粉碎過40～80目篩，即得菜籽粕粉原料。
3.如權利要求1所述的酶法制備有機菜籽蛋白的方法，其特征在于，所述步驟二中菜籽蛋白萃取液的制備過程如下：將菜籽粕粉原料和水按料液比1g:15～20mL混勻制得一次漿液，向一次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取25～35分鐘，萃取溫度為40～45℃，待萃取結束，離心得到上層的一次萃取清液和下層的一次沉淀；再將一次沉淀和水按料液比1g:10～12mL混勻制得二次漿液，向二次漿液中加入氫氧化鈉調節pH至10～12，并通過超聲波輔助萃取15～20分鐘，萃取溫度為48～52℃，待萃取結束，離心得到上層的二次...

【專利技術屬性】
技術研發人員：何東平，鄭美應，胡傳榮，劉零怡，鄭山，周力，
申請(專利權)人：武漢輕工大學，
類型：發明
國別省市：湖北;42