五環三萜-肽綴合物、其制備方法、藥物組合物及用途技術

本發明專利技術屬于醫藥化工領域，涉及五環三萜-肽綴合物、其制備方法、藥物組合物及用途。具體地，所述五環三萜-肽綴合物如式(Ⅰ)所示。其中XA為五環三萜類化合物或其酯化衍生物；P為2-50個氨基酸縮合形成的多肽；L為連接臂。本發明專利技術的五環三萜-肽綴合物、其藥學上可接受的鹽以及藥物組合物具有抗菌和抗細菌感染的效果，特別是對革蘭氏陽性菌具有明顯的抑菌效果。XA-L-P(Ⅰ)。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于醫藥化工領域，涉及一種五環三萜-肽綴合物、其制備方法、藥物組合物及用途。
技術介紹
抗菌肽具有廣譜殺菌性，能夠抵御外界細菌、真菌、原蟲和病毒等微生物的侵害，例如1980年瑞典科學家于天蠶蛹中首次發現的抗菌肽。目前，各國科學家已經陸續發現了2000多種不同種類的抗菌肽，雖然這些抗菌肽的氨基酸序列、肽鏈長度和結構各異，但是不同種類抗菌肽具有以下的共同特性：(1)抗菌肽由10-50個氨基酸縮合形成；(2)抗菌肽一般是帶2-9個正電荷的陽離子肽；(3)抗菌肽含有大約50％非極性氨基酸殘基，同時兼具親水性和疏水性。抗菌肽的陽離子特性及親水、疏水的兩親特性使抗菌肽得以通過靜電相互作用附著于細菌細胞膜表面上的陰離子組分，從而促使疏水基團通過疏水相互作用或范德華力嵌入細菌細胞膜發揮殺菌效力。賴氨酸和精氨酸是抗菌肽構成中使用較為頻繁的堿性氨基酸。五環三萜類化合物種類繁多，具有廣泛的藥理作用和重要的生物活性，尤其在抗炎抗菌、護膚、抗腫瘤和機體免疫調節方面顯示出令人關注的藥理特性。比如，1995年RoseneiL.Brum等從蠟燭樹((Vochysiadivergens)皮中分離提取的五環三萜化合物樺木酸(Betulinicacid)對金葡萄球菌具有抑制作用；2007年G.P.P.Kamatou等由16種南非鼠尾草屬中分離提取的齊墩果酸(Oleanolicacid)及熊果酸(Ursolicacid)經活性篩選后表明均具有抗菌活性。目前尚需具有更好抗菌活性的全新結構的抗菌類化合物。
技術實現思路
本專利技術的專利技術人創造性地將抗菌肽與五環三萜類化合物相結合，設計出了全新結構的綴合物，經活性篩選發現，新化合物具有優異的抗菌活性，最低抑菌濃度甚至能夠達到幾個μM水平。由此提供了下述專利技術：本專利技術的一個方面提供了式(I)所示的五環三萜-肽綴合物或其藥學上可接受的鹽，XA-L-P(I)其中，XA為五環三萜類化合物或其酯化衍生物；P為多肽，其長度為2-50個氨基酸，并且含有一個或多個精氨酸和/或賴氨酸；所述多肽的C末端為游離的羧基或者酰胺化；L為連接臂。本專利技術的任一實施方式中，所述多肽中精氨酸和/或賴氨酸的含量為≥50％、≥60％、≥70％、≥80％、≥90％或為100％；具體地，所述精氨酸為L-精氨酸；具體地，所述賴氨酸為L-賴氨酸。本專利技術的任一實施方式中，多肽長度為2－40個氨基酸、2－30個氨基酸、2－20個氨基酸、2－15個氨基酸、2－12個氨基酸、2－10個氨基酸、2個氨基酸、3個氨基酸、4個氨基酸、5個氨基酸、6個氨基酸、7個氨基酸、8個氨基酸、9個氨基酸或者10個氨基酸。在本專利技術的一個實施方案中，所述多肽為抗菌肽。在本專利技術的一個實施方案中，所述多肽為非抗菌肽。本專利技術的任一實施方式中，L為疊氮乙酸；具體地，疊氮乙酸通過羧基與多肽N末端的α-氨基縮合連接，疊氮乙酸的疊氮基與XA的炔基通過銅催化的Husigen環加成反應連接。本專利技術的任一實施方式中，所述五環三萜類化合物為樺木酸、齊墩果酸或熊果酸。本專利技術的任一實施方式中，所述酯化衍生物為五環三萜類化合物的酯化衍生物；具體地，酯化位點為五環三萜類化合物的3位羥基和/或28位羧基；更具體地，所述酯化衍生物含有炔基；進一步具體地，樺木酸、齊墩果酸和熊果酸的28位羧基進行酯化反應分別得到含炔基的BAo、OAo和UAo(結構式見下面)，樺木酸、齊墩果酸和熊果酸的3位羥基進行酯化反應分別得到含炔基的BAc、OAc和UAc(結構式見下面)。本專利技術的任一實施方式中，XA選自如下的結構式：本專利技術的具體的實施方式中，其選自如下的綴合物或其藥學上可接受的鹽：(1)BAc-L-R；(2)OAc-L-R；(3)UAc-L-R；(4)BAo-L-R；(5)OAo-L-R；(6)UAo-L-R；(7)BAc-L-RR；(8)OAc-L-RR；(9)UAc-L-RR；(10)BAo-L-RR；(11)OAo-L-RR；(12)UAo-L-RR；(13)BAc-L-RRR；(14)OAc-L-RRR；(15)UAc-L-RRR；(16)BAo-L-RRR；(17)OAo-L-RRR；(18)UAo-L-RRR；(19)BAc-L-RRRRRR；(20)OAc-L-RRRRRR；(21)UAc-L-RRRRRR；(22)BAo-L-RRRRRR；(23)OAo-L-RRRRRR；(24)UAo-L-RRRRRR；(25)BAc-L-RRRRRRRR；(26)OAc-L-RRRRRRRR；(27)UAc-L-RRRRRRRR；(28)BAo-L-RRRRRRRR；(29)OAo-L-RRRRRRRR；(30)UAo-L-RRRRRRRR；其中，L為疊氮乙酸，R表示L-精氨酸。上面的綴合物中，RRRRRR表示為SEQIDNO：1，RRRRRRRR表示為SEQIDNO：2。本專利技術的另一方面提供了一種藥物組合物，包含上面任一項所述的五環三萜-肽綴合物和/或其藥學上可接受的鹽；任選地，其還包含藥學上可接受的輔料。本專利技術另一方面提供了所述五環三萜-肽綴合物的制備方法，包括下述步驟：將五環三萜類化合物的酯化衍生物與多肽-疊氮乙酸修飾物在亞銅離子催化下經Husigen環加成反應，得到終產物；其中，所述五環三萜類化合物的酯化衍生物由五環三萜類化合物進行酯化反應制得；所述多肽-疊氮乙酸修飾物由疊氮乙酸通過羧基與多肽N末端的α-氨基縮合連接制得。不拘于理論的限制，五環三萜類化合物的環內/外都具有雙鍵。采用一般意義上的固相合成法將五環三萜類化合物或以氨基烷酸作連接臂的五環三萜類化合物與肽樹脂直接反應時，酸裂解(TFA)條件下五環三萜的雙鍵將移位或者成環，無法形成五環三萜-肽綴合物。而且五環三萜類化合物也無法直接與裂解后的肽樹脂進行連接。本專利技術任一實施方式中，所述多肽-疊氮乙酸修飾物由如下步驟制得：經Fmoc固相合成得到氨基端裸露的肽樹脂，再用疊氮乙酸對裸露的氨基端進行封端；封端后的肽樹脂經裂解、純化得到多肽-疊氮乙酸修飾物。本專利技術任一實施方式中，封端時向氨基端裸露的肽樹脂中加入疊氮乙酸、HBTU、HOBT及DIEA，室本文檔來自技高網...

【技術保護點】
式(I)所示的五環三萜?肽綴合物或其藥學上可接受的鹽，XA?L?P(I)其中，XA為五環三萜類化合物或其酯化衍生物；P為多肽，其長度為2?50個氨基酸，并且含有一個或多個精氨酸和/或賴氨酸；所述多肽的C末端為游離的羧基或者酰胺化；L為連接臂。

【技術特征摘要】
1.式(I)所示的五環三萜-肽綴合物或其藥學上可接受的鹽，
XA-L-P
(I)
其中，
XA為五環三萜類化合物或其酯化衍生物；
P為多肽，其長度為2-50個氨基酸，并且含有一個或多個精氨酸
和/或賴氨酸；所述多肽的C末端為游離的羧基或者酰胺化；
L為連接臂。
2.根據權利要求1所述的五環三萜-肽綴合物或其藥學上可接受
的鹽，其特征在于如下的(1)－(7)項中的任意一項或者多項：
(1)所述多肽中精氨酸和/或賴氨酸的含量為≥50％、≥60％、
≥70％、≥80％、≥90％或為100％；
(2)所述精氨酸為L-精氨酸；
(3)所述賴氨酸為L-賴氨酸；
(4)所述多肽的長度為2－40、2－30、2－20、2－15、2－12、
2－10、2、3、4、5、6、7、8、9或者10個氨基酸；
(5)所述五環三萜類化合物為樺木酸、齊墩果酸或熊果酸；
(6)所述酯化衍生物為五環三萜類化合物的酯化衍生物；具體地，
酯化位點為五環三萜類化合物的3位羥基和/或28位羧基；更具體地，
所述酯化衍生物含有炔基；
(7)L為疊氮乙酸；具體地，疊氮乙酸通過羧基與多肽N末端
的α-氨基縮合連接，疊氮乙酸的疊氮基與XA的炔基通過銅催化的
Husigen環加成反應連接。
3.根據權利要求1或2所述的五環三萜-肽綴合物或其藥學上可
接受的鹽，其中，XA選自如下的結構式：
4.根據權利要求3所述的五環三萜-肽綴合物或其藥學上可接受的
鹽，其選自如下的綴合物或其藥學上可接受的鹽：
BAc-L-RR；
OAc-L-RR；
UAc-L-RR；
BAo-L-RR；
OAo-L-RR；
UAo-L-RR；
BAc-L-RRR；
OAc-L-RRR；
UAc-L-RRR；
BAo-L-RRR；
OAo-L-RRR；
UAo-L-RRR；
BAc-L-RRRRRR；
OAc-L-RRRRRR；
UAc-L-RRRRRR；
BAo-L-RRRRRR；
OAo-L-RRRRRR；
UAo-L-RRRRRR；
BAc-L-RRRRRRRR；
OAc-L-RRRRRRRR；
UAc-L-RRRRRRRR；
BAo-L-RRRRRRRR；
OAo-L-RRRRRRRR；
UAo-L-RRRRRRRR；
其中，L為疊氮乙酸，R...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉克良，娜荷芽，李相鵬，王晨宏，
申請(專利權)人：中國人民解放軍軍事醫學科學院毒物藥物研究所，
類型：發明
國別省市：北京;11