一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法，包括：將銀杏葉進(jìn)行處理，得到銀杏總內(nèi)酯粗品；將所述銀杏總內(nèi)酯粗品和硅膠混合，得到樣品硅膠；將樣品硅膠在真空液相色譜分離裝置中進(jìn)行梯度洗脫，所述梯度洗脫過程中弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果內(nèi)酯；洗脫比例為(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到銀杏內(nèi)酯C；洗脫比例為(6.2～5.8)：(4.2～3.8)，得到銀杏內(nèi)酯A；洗脫比例為1：(0.5～1.5)，得到銀杏內(nèi)酯B。本發(fā)明專利技術(shù)提供的方法制備得到的白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的收率和純度均較高。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及銀杏
，尤其涉及一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法。
技術(shù)介紹
銀杏內(nèi)酯(英文名：ginkgolide)化合物屬于萜類化合物，由倍半萜內(nèi)酯和二萜內(nèi)酯組成，是銀杏葉中一類重要的活性成分。白果內(nèi)酯(bilobalide；BB)屬倍半萜內(nèi)酯，是目前從銀杏葉中發(fā)現(xiàn)的唯一的一個倍半萜內(nèi)酯化合物。銀杏內(nèi)酯A(ginkgolideA；GA)、銀杏內(nèi)酯B(ginkgolideB；GB)、銀杏內(nèi)酯C(ginkgolideC；GC)、銀杏內(nèi)脂M(ginkgolideM；GM)、銀杏內(nèi)脂J(ginkgolideJ；GJ)為二萜類化合物，其差別在于含有的羥基數(shù)目和羥基連接的位置不同。銀杏內(nèi)酯分子具有獨特的十二碳骨架結(jié)構(gòu)，嵌有一個叔丁基和六個五元環(huán)，包括一個螺壬烷、一個四氫呋喃環(huán)和三個內(nèi)酯環(huán)。銀杏內(nèi)酯對血小板活化因子(PAF)受體有強(qiáng)大的特異性抑制作用，其中銀杏內(nèi)酯的抗PAF活性最高。PAF是血小板多種炎癥組織分泌產(chǎn)生的一種內(nèi)源性磷脂，是迄今發(fā)現(xiàn)的最有效的血小板聚集誘導(dǎo)劑，它與許多疾病的產(chǎn)生、發(fā)展密切相關(guān)。而銀杏內(nèi)酯目前被認(rèn)為是最有臨床應(yīng)用前景的天然PAF受體拮抗劑。申請?zhí)枮?01310624971.9的中國專利公開了一種銀杏內(nèi)酯A與銀杏內(nèi)酯B的精制方法，包括：取銀杏葉提取物浸膏1000g，用水溶液稀釋至0.5g生藥/mL，加入1000mL乙酸乙酯進(jìn)行萃取，共萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液，>于45℃減壓濃縮至無溶劑，加入10％的乙醇使?jié)饪s液濃度為0.5g/mL，濕法裝柱，使藥液通過MCI樹脂，先用30％的乙醇洗脫樹脂除雜，以除去水溶性和大極性雜質(zhì)，共洗脫3BV，洗脫速度為1BV/h，再用40％的乙醇以同樣的流速洗脫樹脂，分別收集前2BV洗脫液和后2BV洗脫液，分別于45℃減壓濃縮至1g/mL浸膏，加入500mL80％乙醇，70℃加熱至溶解，4℃冰箱靜置24小時析晶，析出晶體后抽濾，分別得到銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B的粗品，將得到的銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B的粗品分別同50mL80％的乙醇重結(jié)晶1次，溫度4℃，靜置時間24h。析出晶體，抽濾，母液合并，結(jié)晶分別于80℃烘干，得到銀杏內(nèi)酯A0.76g、銀杏內(nèi)酯B1.07g，銀杏內(nèi)酯A的純度為95.6％，銀杏內(nèi)酯B的純度為96.2％。現(xiàn)有技術(shù)提供的這種銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B的精制方法雖然工藝簡單、損失較少，能夠同時分離純化銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B，但是這種方法制備銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B的純度和收率較低。
技術(shù)實現(xiàn)思路
有鑒于此，本專利技術(shù)的目的在于提供一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法，本專利技術(shù)提供的方法制備白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的純度和收率均較高。本專利技術(shù)提供了一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法，包括：將銀杏葉采用醇類化合物回流提取后經(jīng)過濾過、濃縮、分散、再次濾過，得到濾液；將所述濾液萃取后依次進(jìn)濃縮和干燥，得到銀杏總內(nèi)酯粗品；將所述銀杏總內(nèi)酯粗品在溶劑中和硅膠混合后粉碎，得到樣品硅膠；將所述樣品硅膠在真空液相色譜分離裝置中進(jìn)行梯度洗脫，按照所述梯度洗脫過程中的洗脫液包括弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B，所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果內(nèi)酯；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到銀杏內(nèi)酯C；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(6.2～5.8)：(4.2～3.8)，得到銀杏內(nèi)酯A；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為1：(0.5～1.5)，得到銀杏內(nèi)酯B；所述弱極性溶劑A包括石油醚或環(huán)己烷；所述強(qiáng)極性溶劑B包括乙酸乙酯或丙酮。優(yōu)選的，所述醇類化合物為碳原子數(shù)為1～5的醇類化合物。優(yōu)選的，所述醇類化合物為甲醇或乙醇。優(yōu)選的，所述萃取的試劑為乙酸乙酯。優(yōu)選的，所述溶劑包括甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯。優(yōu)選的，所述硅膠的粒度為80目～100目。優(yōu)選的，所述銀杏總內(nèi)酯粗品和硅膠的質(zhì)量比為1：(0.8～1.2)。優(yōu)選的，所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為8：2，得到白果內(nèi)酯；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為7：3，得到銀杏內(nèi)酯C；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為6：4，得到銀杏內(nèi)酯A；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為1：1，得到銀杏內(nèi)酯B。優(yōu)選的，所述洗脫液為石油醚和乙酸乙酯。優(yōu)選的，所述梯度洗脫過程中洗脫液的用量為6BV～10BV。本專利技術(shù)提供的方法通過對銀杏葉進(jìn)行合適的處理，制備樣品硅膠，采用真空液相色譜分離裝置同時控制梯度洗脫的工藝條件制備銀杏內(nèi)酯，這種方法制備得到的白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的收率和純度均較高。此外，本專利技術(shù)提供的方法能夠同時制備得到白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C，制備過程簡單、快速、制備量大。附圖說明為了更清楚地說明本專利技術(shù)實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本專利技術(shù)的實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)提供的附圖獲得其他的附圖。圖1為本專利技術(shù)實施例提供的制備白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C方法的流程圖；圖2為本專利技術(shù)實施例1制備得到的銀杏總內(nèi)酯粗品的蒸發(fā)光散射檢測圖；圖3為銀杏內(nèi)酯混合對照品的蒸發(fā)光散射檢測圖；圖4為本專利技術(shù)實施例1制備得到的白果內(nèi)酯的蒸發(fā)光散射檢測圖；圖5為本專利技術(shù)實施例1制備得到的銀杏內(nèi)酯A的蒸發(fā)光散射檢測圖；圖6為本專利技術(shù)實施例1制備得到的銀杏內(nèi)酯B的蒸發(fā)光散射檢測圖；圖7為本專利技術(shù)實施例1制備得到的銀杏內(nèi)酯C的蒸發(fā)光散射檢測圖。具體實施方式下面將對本專利技術(shù)實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術(shù)一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術(shù)保護(hù)的范圍。本專利技術(shù)提供了一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法，包括：將銀杏葉采用醇類化合物回流提取后經(jīng)過濾過、濃縮、分散、再次濾過，得到濾液；將所述濾液萃取后依次進(jìn)濃縮和干燥，得到銀杏總內(nèi)酯粗品；將所述銀杏總內(nèi)酯粗品在溶劑中和硅本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法，包括：將銀杏葉采用醇類化合物回流提取后經(jīng)過濾過、濃縮、分散、再次濾過，得到濾液；將所述濾液萃取后依次進(jìn)濃縮和干燥，得到銀杏總內(nèi)酯粗品；將所述銀杏總內(nèi)酯粗品在溶劑中和硅膠混合后粉碎，得到樣品硅膠；將所述樣品硅膠在真空液相色譜分離裝置中進(jìn)行梯度洗脫，所述梯度洗脫過程中的洗脫液包括弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B，所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果內(nèi)酯；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到銀杏內(nèi)酯C；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(6.2～5.8)：(4.2～3.8)，得到銀杏內(nèi)酯A；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為1：(0.5～1.5)，得到銀杏內(nèi)酯B；所述弱極性溶劑A包括石油醚或環(huán)己烷；所述強(qiáng)極性溶劑B包括乙酸乙酯或丙酮。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種白果內(nèi)酯、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B和銀杏內(nèi)酯C的制備方法，
包括：
將銀杏葉采用醇類化合物回流提取后經(jīng)過濾過、濃縮、分散、再次濾過，
得到濾液；
將所述濾液萃取后依次進(jìn)濃縮和干燥，得到銀杏總內(nèi)酯粗品；
將所述銀杏總內(nèi)酯粗品在溶劑中和硅膠混合后粉碎，得到樣品硅膠；
將所述樣品硅膠在真空液相色譜分離裝置中進(jìn)行梯度洗脫，所述梯度洗
脫過程中的洗脫液包括弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B，所述弱極性溶劑A和
強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(8.2～7.8)：(1.8～2.2)，得到白果內(nèi)酯；所述
弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(7.2～6.8)：(3.2～2.8)，得到
銀杏內(nèi)酯C；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比例為(6.2～5.8)：
(4.2～3.8)，得到銀杏內(nèi)酯A；所述弱極性溶劑A和強(qiáng)極性溶劑B的洗脫比
例為1：(0.5～1.5)，得到銀杏內(nèi)酯B；
所述弱極性溶劑A包括石油醚或環(huán)己烷；
所述強(qiáng)極性溶劑B包括乙酸乙酯或丙酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述醇類化合物為碳原子
數(shù)為1～5的醇類化合物...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：蕭偉，倪付勇，劉露，趙祎武，宋亞玲，溫建輝，謝雪，黃文哲，王振中，
申請(專利權(quán))人：江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇;32