本發明專利技術涉及胰高血糖素樣肽?1及免疫球蛋白雜合Fc融合多肽，更具體地涉及一種基于適合胰高血糖素樣肽?1或其類似物的免疫球蛋白雜合Fc的發現并且相比于現有的融合多肽具有增加半衰期和優秀效能的融合多肽、包含上述融合多肽的糖尿病治療用組合物以及用于制備糖尿病治療用藥劑的上述融合多肽的用途。相比于現有的胰高血糖素樣肽?1，本發明專利技術的融合多肽具有增加的半衰期，并具有優秀的降血糖效能以及對二肽基肽酶?4的抵抗性，在治療糖尿病時，相比于現有的藥劑，表現出優秀的藥物效能，可有效地適用于醫藥品。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)及免疫球蛋白雜合Fc(Fc)融合多肽，更具體地涉及一種基于適合胰高血糖素樣肽-1或其類似物的免疫球蛋白雜合Fc的發現并且相比于現有的融合多肽具有增加半衰期和優秀效能的融合多肽、包含上述融合多肽的糖尿病治療用組合物以及用于制備糖尿病治療用藥劑的上述融合多肽的用途。并且，用于對上述融合多肽進行編碼的多核苷酸、包含上述多核苷酸的表達載體以及包含上述表達載體的宿主細胞也包含在本專利技術的范圍。
技術介紹
糖尿病是由于受到環境影響而使得胰島素分泌出現問題或者胰島素功能出現異常而導致血液中的葡萄糖無法成為細胞的能量源，而是以高比重殘留在血液中的表現出高血糖癥(hyperglycemia)癥狀的代謝性疾病，糖尿病伴有各種并發癥，成為現代社會最要重的慢性疾病。糖尿病大致分為一型糖尿病(Type1diabetes)和二型糖尿病(Type2diabetes)。一型糖尿病占全部糖尿病患者的不足10％，主要在小兒患者中發病，報告顯示，一型糖尿病的發病原因是由于自體免疫疾病等導致胰腺β細胞遭受破壞，無法實現胰島素合成及分泌而導致發病，需要終生注射胰島素。相反地，二型糖尿病占全部糖尿病患者的90％以上，主要在成人患者中發病，尤其，超重和肥胖成人更易發病，報告顯示，二型糖尿病的發病原因是胰腺的胰島素分泌障礙及胰島素抵抗性。為了治療這種糖尿病，根據以往的方式，基本采用運動療法或食療法，但通過這種r>方式難以調節血糖的情況下，將實施糖尿病治療劑的單獨或并用服藥方法。參考美國糖尿病學會(ADA)的指南，首次選擇的藥劑為二甲雙胍(metformin)，第二次、第三次藥物為磺酰脲(sulfonylurea)類、格列奈(glinide)類、噻唑烷二酮(thiazolidinedione)類以及二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制劑等，之后使用胰高血糖素樣肽-1(glucagonlikepeptide-1)激動劑(agonist)等注射劑或胰島素注射劑。但是，在目前臨床使用的現有口服用糖尿治療劑的情況下，除了可持續保持血糖的正常化這一積極作用之外，當長期服用時，將導致各種副作用，例如誘發低血糖、腹瀉、體重增加、心血管疾病、慢性肝炎等，而且最終導致胰腺的β細胞遭受破壞，最后需要注射胰島素。并且，注射胰島素作為最后的治療方法，需要每天實施2～3次皮下注射，不僅很不方便，而且還可能引發作為最大副作用的低血糖誘發。為了完善這種存在問題，近年來作為下一代糖尿病治療劑的重要藥劑就是胰高血糖素樣肽-1。胰高血糖素樣肽-1及其類似物和衍生物在針對二型糖尿病治療的臨床試驗中表現出很好的可行性，刺激胰島素分泌、阻礙胰高血糖素的分泌、阻礙胃空腹化、阻礙胃運動性或腸運動性以及減輕體重等，誘導諸多生物學效果。并且，在長期服用的情況下，也具有胰腺保護功能，不存在低血糖風險，可長期保持合理血糖。但是，在生物體內，借助稱為二肽基肽酶-4的酶，上述胰高血糖素樣肽-1被切割而導致失去活性，由此，具有非常短的生物體內半衰期，很難作為治療劑開發。對此，為了既保持生物學活性，同時為了延長胰高血糖素樣肽-1的半衰期，或者為了減少身體的縮氨酸的去除率，實施了各種接近法。即，目前正在積極地開展著各種胰高血糖素樣肽-1類似物的開發活動，還嘗試了向免疫球蛋白Fc位點結合胰高血糖素樣肽-1的接近法(美國專利US7,452,966B2等)。但是，即便如此，目前為止試圖結合免疫球蛋白Fc的技術在半衰期的局限、抗體依賴細胞介導的細胞毒作用(ADCC)誘導方程、二肽基肽酶-4相關穩定性等方面還不足以商用化。對此，本專利技術人將作為本專利技術人的現有專利的中國專利CN101687933中制備的免疫球蛋白雜合Fc技術與胰高血糖素樣肽-1相結合，選擇胰高血糖素樣肽-1特異性地優化的免疫球蛋白Fc，制備出既具有增加的半衰期，又具有優秀的降血糖效能及對于二肽基肽酶-4的抵抗性的融合多肽，由此完成本專利技術。
技術實現思路
[技術問題]本專利技術的一個目的是提供融合多肽，上述融合多肽包括：(a)胰高血糖素樣肽-1或其類似物，以及(b)包含有限數量的IgD鉸鏈區域的免疫球蛋白Fc多肽。本專利技術的再一個目的是提供以上述融合多肽作為有效成分來包含的糖尿病治療用藥物組合物。本專利技術的另一個目的是提供用于制備糖尿病治療用藥劑的上述融合多肽的用途。本專利技術的還有一個目的是提供用于對上述融合多肽進行編碼的多核苷酸、包含上述多核苷酸的表達載體以及包含上述表達載體的宿主細胞。[解決問題的手段]為了實現上述目的，作為本專利技術的一個實施方式，提供融合多肽，上述融合多肽包括：(a)胰高血糖素樣肽-1或其類似物；以及(b)包含有限數量的IgD鉸鏈區域的免疫球蛋白Fc多肽。具體而言，上述融合多肽可包括：(a)胰高血糖素樣肽-1或其類似物，以及(b)免疫球蛋白Fc多肽；其中，上述免疫球蛋白Fc多肽可包括(i)從序號25的C-末端開始由35個至49個連續的氨基酸序列構成的分離的IgD鉸鏈區域；以及(ii)由序號29的氨基酸序列構成的CH2及CH3區域。優選地，上述胰高血糖素樣肽-1或其類似物的C-末端可與免疫球蛋白Fc多肽的N-末端相結合，在免疫球蛋白Fc多肽內，IgD鉸鏈區域的C-末端可與CH2及CH3區域的N-末端相結合。由此，從N-末端沿著C-末端方向可依次與胰高血糖素樣肽-1或其類似物、IgD鉸鏈區域以及CH2和CH3區域相結合。在本專利技術中，“融合多肽”表示上述胰高血糖素樣肽-1等生物學活性分子與免疫球蛋白Fc多肽相結合的形態，可與“Fc融合多肽”、“結合蛋白質”等術語混用。本專利技術的術語“胰高血糖素樣肽-1(glucagonlikepeptide-1)”是由消化器官分泌的激素的長促胰島素的一種蛋白質，依賴攝取而從腸管內的L細胞中分泌，可增加胰腺的胰島素分泌，抑制胰高血糖素的分泌，由此，可以起到抑制餐后血糖上升的作用。如此，目前胰高血糖素樣肽-1的糖尿病治療用途已廣為所知，也可參與食欲的生理調節，還具有體重減少效果。一方面，上述天然胰高血糖素樣肽-1在生物體內被加工，使得前6個氨基酸從分子中被切割。因此，依據本專利技術所屬行業的慣例，胰高血糖素樣肽-1的氨基末端指定為7號、羧基-末端指定為37號。在根據上述加工而不具有胰島素分泌功能的形態的胰高血糖素樣肽-1(1-37)中，能夠以胰高血糖素樣肽-1(7-37)形態被處理，并成為活性型胰高血糖素樣肽-1(7-37)(序號1的氨基酸序列及序號33的核酸序列本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種融合多肽，包括：(a)胰高血糖素樣肽?1或其類似物，以及(b)免疫球蛋白Fc多肽，其特征在于，所述免疫球蛋白Fc多肽包括：(i)從序號25的C?末端開始由35個至49個連續的氨基酸序列構成的分離的IgD鉸鏈區域，以及(ii)由序號29的氨基酸序列構成的CH2及CH3區域。
【技術特征摘要】
1.一種融合多肽，包括：(a)胰高血糖素樣肽-1或其類似物，以及(b)免疫球蛋白
Fc多肽，其特征在于，
所述免疫球蛋白Fc多肽包括：
(i)從序號25的C-末端開始由35個至49個連續的氨基酸序列構成的分離的IgD
鉸鏈區域，以及
(ii)由序號29的氨基酸序列構成的CH2及CH3區域。
2.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述胰高血糖素樣肽-1或其類似
物的C-末端與免疫球蛋白Fc多肽的N-末端相結合。
3.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述IgD鉸鏈區域的C-末端與
CH2及CH3區域的N-末端相結合。
4.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述胰高血糖素樣肽-1由序號1
或13的氨基酸序列構成。
5.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述胰高血糖素樣肽-1類似物通
過二肽基肽酶-4發生切割位點的突變。
6.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述胰高血糖素樣肽-1類似物由
選自由序號2至12以及序號14至24組成的組中的氨基酸序列構成。
7.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述胰高血糖素樣肽-1類似物由
序號2的氨基酸序列構成。
8.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述IgD鉸鏈區域由選自由序號
26至28組成的組中的氨基酸序列構成。
9.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述IgD鉸鏈區域由序號26或
27的氨基酸序列構成。
10.根據權利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述IgD鉸鏈區域由序號27的
氨基酸序列構成。
11.根據權利要求1所...
【專利技術屬性】
技術研發人員：成永喆，梁世煥，卞美仙，楊尚仁，
申請(專利權)人：天視珍生物技術天津有限公司，
類型：發明
國別省市：天津;12
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