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    用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊診斷的MRI/optical雙模態(tài)納米探針的制備方法技術(shù)

    技術(shù)編號(hào):13513349 閱讀:91 留言:0更新日期:2016-08-11 19:45
    本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)設(shè)計(jì)一種醫(yī)學(xué)診斷試劑中的分子探針,尤其是涉及一種用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊診斷的靶向MRI/optical雙模態(tài)納米探針的制備方法,該探針由OPN抗體和二巰基丁二酸(DMSA)修飾的磁性Fe3O4納米顆粒縮合而成,OPN抗體的活性氨基與納米顆粒表面DMSA的活性羧基通過(guò)縮合反應(yīng)穩(wěn)定連接。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)提供用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊MRI/optical雙模態(tài)分子影像學(xué)成像探針及其制備方法,其將豐富動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的診斷方法,通過(guò)MRI/optical雙模態(tài)成像技術(shù),識(shí)別易損斑塊,從而早期預(yù)防心血管事件。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)具有安全可靠的特點(diǎn),提高了診斷的敏感性和特異性。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
    201610076158

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
    一種用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊MRI/optical雙模態(tài)分子影像學(xué)成像探針,其特征在于:由OPN抗體和二巰基丁二酸(DMSA)修飾的磁性Fe3O4納米顆粒縮合而成,OPN抗體的活性氨基與納米顆粒表面DMSA的活性羧基通過(guò)縮合反應(yīng)穩(wěn)定連接。

    【技術(shù)特征摘要】
    1.一種用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊MRI/optical雙模態(tài)分子影像學(xué)成像探針,其特征在于:由OPN抗體和二巰基丁二酸(DMSA)修飾的磁性Fe3O4納米顆??s合而成,OPN抗體的活性氨基與納米顆粒表面DMSA的活性羧基通過(guò)縮合反應(yīng)穩(wěn)定連接。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊MRI/optical雙模態(tài)分子影像學(xué)成像探針,其特征在于:二巰基丁二酸(DMSA)修飾的磁性Fe3O4納米顆粒直徑在7nm左右,大小均一,Zeta電位為-39.2mv,顆粒的飽和磁化強(qiáng)度為51.4emu/g。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊MRI/optical雙模態(tài)分子影像學(xué)成像探針,其特征在于:該探針的制備方法為將10mg DMSA-MNPs分散于5ml pH=9的硼酸鹽緩沖液,加入濃度均為10mg/ml的EDC 0.02ml、Sulfo-NHS 0.01ml,37℃下反應(yīng)30分鐘,加入2mgOPN抗體在4℃過(guò)夜;OPN抗體的活性氨基與納米顆粒表面DMSA的活性羧基通過(guò)縮合反應(yīng)穩(wěn)定連接,經(jīng)離心分離得到OPN靶向的MRI磁性納米探針anti-OPN-DMSA-MNPs。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊MRI/optical雙模態(tài)分子影像學(xué)成像探針,其特征在于:該探針的制備方法具體包括如下步驟:(1)將2.7g FeCl3·6H2O和8.5ml油酸溶于50mL甲醛,在持續(xù)攪拌條件下,緩慢滴定含1.2g NaOH的甲醛溶液100ml,將棕褐色沉淀物用甲醇清洗后真空干燥去除溶劑;所得油酸鹽可在70℃條件下溶解于十八醇,稀釋至0.39mol/ml可于室溫下穩(wěn)定儲(chǔ)存;(2)取2ml該儲(chǔ)存液加入8ml十八醇和1ml油酸,在接入氮?dú)獗Wo(hù)的條件下,將混合物以穩(wěn)定升溫速率加熱至320℃后保持30分鐘,加入過(guò)量乙醇冷卻離心后可獲得Fe3O4納米顆粒(MNPs);(3)取200mg上述Fe3O4納米顆粒溶解于20ml氯仿,加入0.1ml三乙胺后與溶解有100mg二巰基丁二酸(DMSA)的二甲基亞砜溶液20ml充分混勻;加熱至60℃后持續(xù)攪拌12小時(shí),離心后乙醇洗滌沉淀物可獲得DMSA修飾的Fe3O4納米顆粒(DMSA-MNPs);(4)取10mg上述DMSA-MNPs,分散于5ml pH=9的硼酸鹽緩沖液,加入濃度均為10mg/ml的EDC 0.02ml、Sulfo-NHS 0.01ml,37℃下反應(yīng)30分鐘,加入2mgOPN抗體在4℃過(guò)夜;OPN抗體的活性氨基與納米顆粒表面DMSA的活性羧基通過(guò)縮合反應(yīng)可穩(wěn)定連接;(5)室溫下,12000轉(zhuǎn)/分鐘高速離心30分鐘并通過(guò)永磁體輔助磁性分離,棄上清去除游離的OPN抗體,所得沉淀經(jīng)無(wú)菌PBS清洗后超聲分散重懸,即得到OPN靶向的MRI磁性納米探針anti-OPN-DMSA-MNPs;(6)取上述磁共振探針5mg...

    【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:曹豐,喬紅玉,王亞斌,
    申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人:中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院,曹豐
    類(lèi)型:發(fā)明
    國(guó)別省市:北京;11

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