人血清中幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1的檢測方法及其應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種人血清中幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1的檢測方法及其應(yīng)用。取Dynabeads?Protein?G超純水清洗，用EBC裂解液再清洗，溶于EBC裂解液中平均分成兩份，對兩份Dynabeads?Protein?G溶液進(jìn)行分別孵育處理，再混合孵育獲得產(chǎn)物，產(chǎn)物棄上清用EBC裂解液清洗三次，得到的沉淀用EBC裂解液重懸，再加入SDS上樣緩沖液煮沸，用Western?blot方法檢測幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1(CHI3L1)。本發(fā)明專利技術(shù)方法簡單有效，特異性好，且準(zhǔn)確率極高。因此避免了傳統(tǒng)的用于血清中蛋白檢測的ELISA方法產(chǎn)生的背景高，準(zhǔn)確性低等缺點(diǎn)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
201610305748

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種人血清中幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1的檢測方法，其特點(diǎn)在于包括以下步驟：1)取40～60μl?Dynabeads?Protein?G，超純水清洗三次后，用1ml的EBC裂解液再清洗兩次，將清洗后的Dynabeads?Protein?G溶于200μl的EBC裂解液中，平均分成兩份；2)對兩份Dynabeads?Protein?G溶液進(jìn)行分別孵育處理，再混合孵育獲得產(chǎn)物；3)將步驟2)得到的產(chǎn)物棄上清，用EBC裂解液清洗三次，得到的沉淀用50～100μl?EBC裂解液重懸，再加入SDS上樣緩沖液在100℃煮沸10min；4)用Western?blot方法檢測步驟3)得到的產(chǎn)物，檢測幾丁質(zhì)酶3樣蛋白1(CHI3L1)。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：章曉波，陳玉磊，
申請(專利權(quán))人：浙江大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：浙江;33