本發明專利技術的目的是提供一種更有效率的生產抗生素的方法，特別是省略諾西肽生產中的預培養步驟，并且簡單且容易地收集和接種固定量的微生物細胞量，從而使抗生素的生產可以更有效率的進行。本發明專利技術的特征在于當制備抗生素諸如諾西肽時，使用預培養中使用的抗生素生產菌諸如屬于鏈霉菌屬的放線菌，作為通過接種到固體載體上獲得的接種物。
【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及微生物，更具體地，涉及接種物，其包括接種至固體載體的抗生素生產菌，和使用所述接種物生產抗生素的方法。
技術介紹
諾西肽(Nosiheptide)是一種含硫多肽類抗生素。因為諾西肽有促進動物生長效果、改善飼料效率效果等，其是一種可商購獲得的動物飼料添加劑。關于諾西肽的生產方法，已知包括培養活躍鏈霉菌(Streptomyces actuosus)NRRL2954、U-227的生產方法(參見，例如專利文件1和2)[文件列表]專利文件專利文件1：JP-B-40-880專利文件2：JP-A-61-25495專利技術概述：專利技術所要解決的問題抗生素的實際生產中，作為預培養的步驟，抗生素生產菌被培養于固體培養基，且將定量的細胞數量接種于小規模的液體培養基(種子培養基)并且培養以制備種子培養基。隨后，將種子培養基接種至更大規模的生產用液體培養基(主要培養基)中并培養以生產抗生素。這個生產過程中在固體培養基上的預培養步驟需要大概1-2周，并且通過接種定量細胞數量的種子培養基的制備是重要的，且它們還會影響隨后的抗生素的生產力。特別地，當定量的微生物細胞的收集通常是以一接菌環的量作為標準時，這個操作被復雜化并且很大程度上是依靠操作者的經驗和感覺，且需要一個簡便化的操作。解決問題的方式本專利技術人為實現抗生素的高效生產力已進行了集中研究，試圖解決上文提及的問題，且發現一旦將用于抗生素生產的預培養的抗生素生產菌接種于固體載體以獲得接種物后，1.每次抗生素生產中都進行的在固體培養基上的培養可被省略，并且2.通過自動化的接種和培養(若干個)使用定量抗生素生產菌接種r>
的接種物，種子培養基可以被方便和有效率地制備，并且成功實現高效抗生素生產。另外，他們還發現，通過使用接種物，抗生素生產菌可以被長期穩定的冷藏保存，使本專利技術得以完成。因此，本專利技術涉及以下的：[1]一種抗生素生產菌的接種物，其包括接種至固體載體的抗生素生產菌；[2]上文提及的[1]的接種物，其中所述固體載體是植物來源的固體物質；[3]上文提及的[1]或[2]的接種物，其中于所述固體載體是一種或多種選自稻粒、麥麩、大豆種子的物質；[4]上文提及的[1]至[3]中任意一項所述的接種物，其中于所述的抗生素生產菌是屬于鏈霉菌屬(Streptomyces sp.)的放線菌；[5]上文提及的[4]所述的接種物，其中所述鏈霉菌屬的放線菌是一種或多種活躍鏈霉菌(Streptomyces actuosus)；[6]上文提及的[5]所述的接種物，其中所述的一種或多種活躍鏈霉菌是選自活躍鏈霉菌NRRL2954、活躍鏈霉菌U-227和具有其等同性能的菌株；[7]制備種子培養基的方法，其包括添加上文提及的[1]-[6]中任一項所述的接種物到生長培養基中并對其培養的步驟；[8]生產抗生素的方法，其包括添加上文提及的[1]-[6]中任一項所述的接種物到用于生產抗生素的培養基中并對其培養的步驟，或者添加上文提及的[7]所述方法制備的種子培養基到用于生產抗生素的培養基中并對其培養的步驟；[9]生產諾西肽的方法，其包括添加上文提及的[5]或[6]中所述的接種物到生產諾西肽的培養基中并對其培養的步驟。專利技術效果根據本專利技術，可以提供使用定量的抗生素生產菌接種并能夠長期保存的接種物使用本專利技術的接種物，在固體培養基上需要約1-2周的作為用于實際生產前所需的預培養步驟的培養可以被省略，并且用于制備種子培養基而慣例依靠操作者經驗和感覺的定量的微生物細胞接種可以容易且確定地執行。根據本專利技術的種子培養基的容易的制備方法和本專利技術的抗生素的制備方法，可以縮短操作時間，可以降低生產成本，并且可以實現有效率的生產力。本專利技術特別適合于生產諾西肽。具體實施方案本專利技術的接種物通過在固體載體上接種抗生素生產菌獲得。作為抗生素生產菌，主要涉及放線菌。作為生產抗生素的放線菌，主要涉及鏈霉菌屬，擬無枝酸菌屬(Amycolatopsis sp.)，糖多孢菌屬(Saccharopolyspora sp.)等。在本專利技術中，優選使用屬于鏈霉菌屬的放線菌。屬于鏈霉菌屬的放線菌的例子包括：活躍鏈霉菌、抗生素鏈霉菌(Streptomyces antibioticus)、阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)、加利利鏈霉菌(Streptomyces galilaeus)、青灰色鏈霉菌(Streptomyces laucogriseus)、灰色鏈霉菌(Streptomyces griseus)、吸水鏈霉菌檸檬變種(Streptomyces hygroscopicus var.limoneus)、卡那鏈霉菌(Streptomyces kanamycetius)、微小鏈霉菌(Streptomyces parvulus)、纖胡鏈霉菌(Streptomyces peuceticus)、輪枝鏈霉菌(Streptomyces verticillus)、筑波鏈霉菌(Streptomyces tsukubaensis)等。在本專利技術的更優選的實施方案中，使用的諾西肽的生產細菌是活躍鏈霉菌、抗生素鏈霉菌和青灰色鏈霉菌。進一步優選地，使用了活躍鏈霉菌。作為活躍鏈霉菌，使用NRRL2954、U-227或者具有其等同性能的菌株是優選的，且特別優選的是U-227及具有其等同性能的菌株。U-227在國內保藏編號是FERMP-7705，并保藏在技術與評價國家研究所國際專利生物保藏中心(National Institute of Technology and Evaluation the International Patent Organism Depositary(NPMD))(2-5-8，Kazusakamatari，木更津市，千葉縣，日本)保藏編號NITE BP-01698(原始保藏日期2013年8月28日)。如本文使用的，“具有等同性能的菌株”意思是是通過NRRL2954或U-227的傳代獲得的菌株。在本專利技術中，可以使用選自上述抗生素生產菌中的一種，或可以選擇兩種或更多種并組合使用。本專利技術使用的用于接種抗生素生產菌的固體載體是一種作為抗生素生產菌生存的營養來源的固體物質，并且不會對抗生素生產菌的生存造出不利影響，或者不會對抗生素生產菌的生存產生直接影響但是能夠保持存活率，并且其實例包括的固體物質來源于動物和植物、合成的生物可降解物質諸如生物可降解樹脂等、合成的部分可降解材料諸如生物可降解樹脂與非生物降解樹脂的混合物等等。來源于動物和植物的固體物質優選用于本專利技術的目的，且更優選地使
用植物來源的固體物質。動物和植物來源的固體物質的實例包括：禾本科植物、豆科植物等的谷物、種子、莖、根、種皮、果皮等，或者它們的研磨產物諸如稻粒、麥麩、大豆種子、谷殼、米糠、麥芽根、玉米桿、甘蔗渣等；果殼，堅果仁，或者堅果的研磨產物諸如核桃等；木粉諸如鋸屑、刨花、散裝木頭等；魚肉；再生紙；多糖如纖維素、淀粉、葡聚糖、瓊脂等及它們的粉末或者顆粒；蛋白質如明膠等或者它們的粉末或顆粒，可以選擇并使用其中的一種或多種。在本專利技術中，植物來源的固體物質更優選使用如禾本科植物、豆科植物等的谷粒、種子或者它們的研磨產物，植物來源的多糖如纖維素、瓊脂等或者它們的粉末或者本文檔來自技高網...
【技術保護點】
抗生素生產菌的接種物，其包括接種至固體載體的抗生素生產菌。
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2013.10.08 JP 2013-2108781.抗生素生產菌的接種物，其包括接種至固體載體的抗生素生產菌。2.根據權利要求1所述的接種物，其中所述固體載體是植物來源的固體物質。3.根據權利要求1或2所述的接種物，其中所述固體載體選自稻米、麥麩和大豆種子中的一種或多種。4.根據權利要求1-3中任一項所述的接種物，其中所述抗生素生產菌是屬于鏈霉菌屬的放線菌。5.根據權利要求4所述的接種物，其中所述屬于鏈霉菌屬的放線菌是一種或多種活躍鏈霉菌。6.根據權利要求5所述的接種...
【專利技術屬性】
技術研發人員：南條育子，古賀裕康，恒光俊哉，
申請(專利權)人：日本農藥株式會社，
類型：發明
國別省市：日本;JP
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