本發(fā)明專利技術(shù)公開(kāi)了一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，包括：改良MS+0.5～0.8mg·L?1IAA?+0.3～0.5mgL?1?IBA?+0.5～0.6mgL?1NAA?+0.2～0.3?gL?1活性炭+2～3gL?1蔗糖，pH=5.6?～?5.8。本發(fā)明專利技術(shù)同時(shí)公開(kāi)了其培養(yǎng)方法。本發(fā)明專利技術(shù)步驟簡(jiǎn)單，易于操作，通過(guò)改良基本培養(yǎng)基及成分、調(diào)整培養(yǎng)條件等配套措施，使得試管苗的出芽率超過(guò)了98%，且移栽苗成活率高，生長(zhǎng)快，大大縮短了油用牡丹培養(yǎng)的周期，降低了生產(chǎn)升本，提高了用牡丹的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法，屬于植物生物學(xué)
技術(shù)介紹
油用牡丹是一種新興的木本油料作物，具備突出的\三高一低\的特點(diǎn):高產(chǎn)出(五年生畝產(chǎn)可達(dá)300公斤，畝綜合效益可達(dá)萬(wàn)元)、高含油率(籽含油率22%)、高品質(zhì)(不飽和脂肪酸含量92%)、低成本(油用牡丹耐旱耐貧瘠，適合荒山綠化造林、林下種植;一年種百年收，成本低)。現(xiàn)在用于商業(yè)生產(chǎn)中的油用牡丹僅有鳳丹和紫斑兩個(gè)品種，且是適合中國(guó)絕大部分區(qū)域種植、高產(chǎn)籽油用牡丹的原種，其中，鳳丹籽含油22%以上，高于國(guó)產(chǎn)大豆17.5%的含油率，同時(shí)牡丹籽油還含有眾多的藥用牡丹有效成分。牡丹可通過(guò)播種、分株、嫁接、扦插、壓條和組培等方法進(jìn)行繁殖。油用牡丹一般采用播種繁殖的方法進(jìn)行，種籽播種苗當(dāng)年一般只有頂芽生長(zhǎng)，當(dāng)年生長(zhǎng)量小，僅5‐10cm。油用牡丹的經(jīng)濟(jì)部位為果實(shí)，而牡丹是單生枝頂并結(jié)果，因此油用牡丹的發(fā)枝數(shù)量對(duì)產(chǎn)量的形成具有重要意義。1年生的牡丹苗從根頸向上一般只有一個(gè)頂芽生長(zhǎng)，而且當(dāng)年生長(zhǎng)長(zhǎng)度僅5‐10cm，根頸處對(duì)生有一對(duì)隱芽，若不進(jìn)行人工干預(yù)不會(huì)萌發(fā)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為了解決上述問(wèn)題，本專利技術(shù)的目的在于提供一種步驟簡(jiǎn)單、萌芽率高及成長(zhǎng)快的油用牡丹的組織培養(yǎng)基及其培養(yǎng)方法。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本專利技術(shù)的技術(shù)方案為：一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，，包括：改良MS+0.5～0.8mg·L-1IAA +0.3～0.5mgL-1IBA +0.5～0.6mgL-1NAA +0.2～0.3 gL-1活性炭+2～3gL-1蔗糖，pH=5.6 ～ 5.8。進(jìn)一步，上述的改良MS包括常量營(yíng)養(yǎng)元素、微量營(yíng)養(yǎng)元素和有機(jī)試劑。其中，常量營(yíng)養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：硝酸鉀1800 mg/L；硝酸銨1650 mg/L；二水氯化鈣350mg/L；無(wú)水磷酸二氫鉀300mg/L；七水硫酸鎂：360 mg/L；乙二胺四乙酸二鈉20.5mg/L。微量營(yíng)養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：四水硫酸錳18.6 mg/L；七水硫酸鋅7.5mg/L；硼酸4.8 mg/L；碘化鉀1.5mg/L；鉬酸鈉0.5mg/L；六水氯化鈷0.1 mg/L。有機(jī)試劑的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：鹽酸硫胺素0.5 mg/L；煙酸0.5 mg/L；甘氨酸：0.5 mg/L；鹽酸吡哆醇0.5 mg/L；肌醇100.0 mg/L。更進(jìn)一步，一種油用牡丹的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：（1）選取油用牡丹的深黃色果實(shí)作為外植體；（2）對(duì)外植體進(jìn)行消毒：首先，用清水沖洗外植體3-5次，每次5-8min，然后利用純凈水沖洗外植體2-3次，每次8-10min，重新結(jié)束后，將外植體移至超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理；（3）播種：利用無(wú)菌紙吸干外植體表面的水分，然后用消毒刀具將外植體剪開(kāi)，將外植體的種子放入油用牡丹的組織培養(yǎng)基中進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度為20-25℃，光照時(shí)間為10-12h/d，光照強(qiáng)度為1000lx，培養(yǎng)3-4個(gè)月至長(zhǎng)出幼苗，苗高4-5cm時(shí)，進(jìn)行移栽；（4） 移栽：打開(kāi)瓶蓋，靜置7-10d后，取出試管苗，用清水洗去基部的培養(yǎng)基，保持室內(nèi)溫度為20-25℃，置于培養(yǎng)室內(nèi)，并通過(guò)薄膜袋保濕，15d后去除薄膜袋，每天澆水一次， 30d后移栽到試驗(yàn)區(qū)，進(jìn)行常規(guī)管理。且步驟（2）所述的消毒處理方法為：首先用75%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒30-45s，然后用無(wú)菌水沖洗外植體2-3次，沖洗時(shí)間為每次3-5min，最后用濃度為0.1%的升汞消毒6-8min，再用無(wú)菌水沖洗外植體2-3次，沖洗時(shí)間為每次3-5min。本專利技術(shù)的有益效果為：本專利技術(shù)步驟簡(jiǎn)單，易于操作，通過(guò)改良基本培養(yǎng)基及成分、調(diào)整培養(yǎng)條件等配套措施，使得試管苗的出芽率超過(guò)了98%，且移栽苗成活率高，生長(zhǎng)快，大大縮短了油用牡丹培養(yǎng)的周期，降低了生產(chǎn)升本，提高了用牡丹的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。本專利技術(shù)以下所有實(shí)施例采用的改良MS均包括常量營(yíng)養(yǎng)元素、微量營(yíng)養(yǎng)元素和有機(jī)試劑。且常量營(yíng)養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：硝酸鉀1800 mg/L；硝酸銨1650 mg/L；二水氯化鈣350mg/L；無(wú)水磷酸二氫鉀300mg/L；七水硫酸鎂：360 mg/L；乙二胺四乙酸二鈉20.5mg/L。微量營(yíng)養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：四水硫酸錳18.6 mg/L；七水硫酸鋅7.5mg/L；硼酸4.8 mg/L；碘化鉀1.5mg/L；鉬酸鈉0.5mg/L；六水氯化鈷0.1 mg/L。有機(jī)試劑的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：鹽酸硫胺素0.5 mg/L；煙酸0.5 mg/L；甘氨酸：0.5 mg/L；鹽酸吡哆醇0.5 mg/L；肌醇100.0 mg/L。實(shí)施例1：（1）選取油用牡丹的深黃色果實(shí)作為外植體；（2）對(duì)外植體進(jìn)行消毒：首先，用清水沖洗外植體4次，每次6min，然后利用純凈水沖洗外植體2次，每次9min，重新結(jié)束后，將外植體移至超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理，具體步驟為：首先用75%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒40s，然后用無(wú)菌水沖洗外植體3次，沖洗時(shí)間為每次4min，最后用濃度為0.1%的升汞消毒7min，再用無(wú)菌水沖洗外植體3次，沖洗時(shí)間為每次4min；（3）播種：利用無(wú)菌紙吸干外植體表面的水分，然后用消毒刀具將外植體剪開(kāi)，將外植體的種子放入油用牡丹的組織培養(yǎng)基中進(jìn)行組織培養(yǎng)，所述的組織培養(yǎng)基包括改良MS+0.6mg·L-1IAA +0.4mgL-1 IBA +0.6mgL-1NAA +0.2gL-1活性炭+2.5gL-1蔗糖，pH=5.7，且培養(yǎng)條件為：溫度為22℃，光照時(shí)間為11h/d，光照強(qiáng)度為1000lx，培養(yǎng)27d后出芽，苗高5cm時(shí)，進(jìn)行移栽；（4） 移栽：打開(kāi)瓶蓋，靜置8d后，取出試管苗，用清水洗去基部的培養(yǎng)基，保持室內(nèi)溫度為22℃，置于培養(yǎng)室內(nèi)，并通過(guò)薄膜袋保濕，15d后去除薄膜袋，每天澆水一次， 30d后移栽到試驗(yàn)區(qū)，進(jìn)行常規(guī)管理。實(shí)施例2：（1）選取油用牡丹的深黃色果實(shí)作為外植體；（2）對(duì)外植體進(jìn)行消毒：首先，用清水沖洗外植體3次，每次8min，然后利用純凈水沖洗外植體2次，每次10min，重新結(jié)束后，將外植體移至超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理，具體步驟為：首先用75%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒30s，然后用無(wú)菌水沖洗外植體2次，沖洗時(shí)間為每次5min，最后用濃度為0.1%的升汞消毒6min，再用無(wú)菌水沖洗外植體2次，沖洗時(shí)間為每次5min；（3）播種：利用無(wú)菌紙吸干外植體表面的水分，然后用消毒刀具將外植體剪開(kāi)，將外植體的種子放入油用牡丹的組織培養(yǎng)基中進(jìn)行組織培養(yǎng)，所述的組織培養(yǎng)基包括改良MS+0.5mg·L-1IAA +0.3mgL-1 IBA +0.5mgL-1NAA +0.2gL-1活性炭+2gL-1蔗糖，pH=5.6，且培養(yǎng)條件為：溫度為20℃，光照時(shí)間為10h/d，光照強(qiáng)度為1000lx，培養(yǎng)30d后出芽，苗高4cm時(shí)，進(jìn)行移栽；（4） 移栽：打開(kāi)瓶蓋，靜置7d后，取出試管苗，用清水洗去基部的培養(yǎng)基，保持室內(nèi)溫度為20℃，置于培養(yǎng)室內(nèi)，并通過(guò)薄膜袋保濕，15d后去除薄膜袋，每天澆水一次， 30d后移栽到試驗(yàn)區(qū)，進(jìn)行常規(guī)管理。實(shí)施例3：（1）選取油用牡丹的深黃色果實(shí)作為外植體；（本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，其特征在于，包括：改良MS+0.5～0.8mg·L?1IAA?+0.3～0.5mgL?1?IBA?+0.5～0.6mgL?1NAA?+0.2～0.3?gL?1活性炭+2～3gL?1蔗糖，pH=5.6?～?5.8。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，其特征在于，包括：改良MS+0.5～0.8mg·L-1IAA +0.3～0.5mgL-1 IBA +0.5～0.6mgL-1NAA +0.2～0.3 gL-1活性炭+2～3gL-1蔗糖，pH=5.6 ～ 5.8。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述的改良MS包括常量營(yíng)養(yǎng)元素、微量營(yíng)養(yǎng)元素和有機(jī)試劑。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述的常量營(yíng)養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：硝酸鉀1800 mg/L；硝酸銨1650 mg/L；二水氯化鈣350mg/L；無(wú)水磷酸二氫鉀300mg/L；七水硫酸鎂：360 mg/L；乙二胺四乙酸二鈉20.5mg/L。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述的微量營(yíng)養(yǎng)元素的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：四水硫酸錳18.6 mg/L；七水硫酸鋅7.5mg/L；硼酸4.8 mg/L；碘化鉀1.5mg/L；鉬酸鈉0.5mg/L；六水氯化鈷0.1 mg/L。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種油用牡丹的組織培養(yǎng)基，其特征在于，所述的有機(jī)試劑的組分和其對(duì)應(yīng)的濃度為：鹽酸硫胺素0.5 mg/L；煙酸0.5 mg/L；甘氨酸：0.5 mg/L；鹽酸吡哆醇...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：秦恒志，李賢蘭，夏楊，劉慶，劉珂，秦相根，夏曉榮，李緒清，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：句容康盛園生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：江蘇;32
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