一株微生物采油菌W-Y3及其應用制造技術

本發明專利技術公開了一株微生物采油菌W?Y3及其應用。本發明專利技術的微生物采油菌W?Y3已于2016年5月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.12493。通過實驗證明：本發明專利技術的微生物采油菌W?Y3不僅具有降解石油的功能，可用于石油污染的治理和修復，而且還可以用于微生物采油，提高采油率，具有很好的應用前景。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于生物
，具體涉及一株微生物采油菌W-Y3及其應用。
技術介紹
石油污染分布廣泛，涉及采油、煉油、化工、機械等各種工業以及石油泄漏等各種污染環境。石油烴組分復雜多樣，疏水性強而難以被普通微生物所接觸、所降解、所利用。微生物采油技術就是通過向地層中注入營養或微生物，利用油藏中微生物的生長代謝活動，提高原油產量和采收率。傳統的石油功能菌株多分離于水體和土壤中。現有的研究表明，微生物除分別在水體和土壤外，在石油油相中也有廣泛的分布，因此從石油油相中分離相關的功能菌株對石油烴污染治理修復和微生物采油技術具有重要意義。
技術實現思路
本專利技術的一個目的是提供一株紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3。本專利技術提供的紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3的保藏編號為CGMCC No.12493。本專利技術的另一個目的是提供紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3的新用途。本專利技術提供了上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在石油降解中的應用。本專利技術還提供了上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在制備石油降解的產品中的應用。本專利技術還提供了上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在石油污染治理和/或修復中的應用。本專利技術還提供了上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在制備石油污染治理和/或修復的產品中的應用。本專利技術還提供了上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在微生物采油中的應用。本專利技術還提供了上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在制備微生物采油的產品中的應用。本專利技術還有一個目的是提供一種產品。本專利技術提供的產品的活性成分為上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑；所述產品具有如下1)-3)中任一種功能：1)石油降解；2)石油污染治理和/或修復；3)微生物采油。本專利技術還有一個目的是提供一種石油污染治理和/或修復的方法。本專利技術提供的石油污染治理和/或修復的方法包括如下步驟：用上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液處理石油污染物。本專利技術的最后一個目的是提供一種微生物驅油的方法。本專利技術提供的微生物驅油的方法包括如下步驟：在采油的過程中，加入上述紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液。本專利技術提供了一種微生物采油菌W-Y3，該菌株已于2016年5月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.12493。通過實驗證明：本專利技術的微生物采油菌W-Y3不僅具有降解石油的功能，可用于石油污染的治理和修復，而且還可以用于微生物采油，提高采油率，具有良好的應用前景。附圖說明圖1為基于W-Y3菌株16S rDNA的系統發育樹。圖2為降解石油前后全烴組分變化。圖3為物模驅油結果曲線。保藏說明菌種名稱：紅簍菌拉丁名：Rhodocista sp.菌株編號：W-Y3保藏機構：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏機構簡稱：CGMCC地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號保藏日期：2016年5月23日保藏中心登記入冊編號：CGMCC No.12493具體實施方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。下述實施例中的定量試驗，均設置三次重復實驗，結果取平均值。實施例1、W-Y3菌株的分離與鑒定1、W-Y3菌株的分離取1g原油(2015年3月取自滄州市大港油田油井原油)加入到121℃滅菌30min的液體無機鹽培養基(5g/L NaCl、1g/L NH4H2PO4、1g/L(NH4)2SO4、1g/L K2HPO4、3g/L KNO3，pH 7-8)中，37℃、150rpm振蕩培養30d后，稀釋涂布在LB培養基(10g/LNaCl、10g/L蛋白胨、5g/L酵母粉，pH 7-8)平板上，培養7d后，挑取單菌落劃線純化后保存，并將分離純化獲得的分離物命名為W-Y3菌株。2、W-Y3菌株的分子鑒定將W-Y3菌株接種于液體LB培養基(10g/L NaCl、10g/L蛋白胨、5g/L酵母粉，pH 7-8)中，30℃、150rpm振蕩培養24h。取1ml新鮮培養菌液4℃、8000rpm離心5min，收集菌體于2ml離心管中，采用DNA提取試劑盒提取DNA。電泳檢測后，采用通用引物8F/1492R進行PCR擴增，得到含有W-Y3菌株16S rDNA保守區的PCR產物。引物序列如下：8F：5’-AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG-3’；1492R：5’-GGT TAC CTT GTT ACG ACT T-3’。電泳檢測PCR產物并測序，測序結果表明：W-Y3菌株16S rDNA的核苷酸序列如序列1所示?；赪-Y3菌株16S rDNA序列，使用軟件MEGA構建系統發育樹如圖1所示。將序列1提交GenBank，根據BLAST搜索和同源性分析比較的結果，與已知菌種Rhodocista pekingensis的最高相似性僅為96.08％，表明該菌是一種新發現的新菌。綜合上述鑒定結果，W-Y3菌株名稱為紅簍菌，其分類命名為Rhodocista sp.，該菌株已于2016年5月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101)，保藏號為CGMCC No.12493。實施例2、W-Y3菌株在石油污染治理修復中的應用1、W-Y3菌液的獲得將W-Y3菌株接種于液體LB培養基(10g/L氯化鈉、10g/L蛋白胨、5g/L酵母粉，pH 7-8)中，30℃、150rpm振蕩培養24h，得到W-Y3菌液(W-Y3菌液的濃度為108-109CFU/ml)。2、W-Y3菌液降解石油將步驟1得到的W-Y3菌液按照體積分數為5％的比例接種于石油無機鹽培養基(1g/L石油、5g/L NaCl、1g/L NH4H2PO4、1g/L(NH4)2SO4、1g/L K2HPO4、3g/L KNO3，pH 7-8)中(W-Y3菌液的濃度為106-107CFU/ml)，30℃、150rpm振蕩培養7d，得到
W-Y3降解產物。3、按文獻“原油降解菌的分離及其降解性能”中的方法測定W-Y3降解產物中的石油殘余量，并計算石油降解率。石油降解率的公式：(石油加入量-石油參與量)/石油加入量。計算結果表明：石油的降解率為59.9％。4、按行業標準SY/T5779-2008石油和沉積有機質烴類氣相色譜分析方法測定W-Y3菌液降解前后的全烴組分變化。結果如圖2所示，其中，黑色圖譜為降解前石油烴組分，紅色圖譜為降解后石油烴組分。從圖2可以看出，經過W-Y3作用后，石油烴組分顯著降低，說明W-Y3菌株本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一株紅簍菌Rhodocista?sp.W?Y3，其保藏編號為CGMCC?No.12493。

【技術特征摘要】
1.一株紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3，其保藏編號為CGMCC No.12493。2.權利要求1所述的紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在石油降解中的應用。3.權利要求1所述的紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在制備石油降解的產品中的應用。4.權利要求1所述的紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在石油污染治理和/或修復中的應用。5.權利要求1所述的紅簍菌Rhodocista sp.W-Y3或其菌懸液或其培養液或其發酵產物或含有其的菌劑在制備石油污染治理和/或修復的產品中的應用。6.權利要求1所述的紅簍菌Rhodocista sp.W-...

【專利技術屬性】
技術研發人員：池昌橋，吳曉篤，劉澤漢，
申請(專利權)人：北京潤世科技有限公司，
類型：發明
國別省市：北京;11