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    薰衣草抗腫瘤提取物及其組合物的制備方法和醫藥用途技術

    技術編號:13796668 閱讀:95 留言:0更新日期:2016-10-06 16:16
    本發明專利技術屬醫藥技術領域,具體涉及一種維吾爾藥薰衣草抗腫瘤提取物及其組合物的制備方法和其在肝癌、肺癌、胃癌、腸癌、胰腺癌、結腸癌、宮頸癌、腦膠質瘤等惡性腫瘤的預防及治療上的用途。所述的提取物通過如下方法獲得:維吾爾藥薰衣草經有機溶劑超聲提取,提取液濃縮后,用硅膠柱分離,上樣后的硅膠柱,先用體積比100:5的石油醚:丙酮混合溶劑洗脫,繼用體積比100:12的石油醚:丙酮混合溶劑洗脫,石油醚:丙酮100:12混合溶劑洗脫液干燥后即得;或先用體積比100:17的石油醚:丙酮混合溶劑洗脫,繼用體積比100:30的石油醚:丙酮混合溶劑洗脫,石油醚:丙酮100:30混合溶劑洗脫液干燥后即得。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬醫藥
    ,具體涉及一種維吾爾藥薰衣草抗腫瘤提取物及其組合物的制備方法或/和其在肝癌、肺癌、胃癌、腸癌、胰腺癌等惡性腫瘤的預防及治療上的用途。
    技術介紹
    本品為唇形科薰衣草屬植物,學名LavandμLa angustifolia Mill。分布于我國新疆。成年植株既耐低溫,又耐高溫,在收獲季節能耐高溫40℃左右。薰衣草是一種性喜干燥、需水不多的植物,年降雨量在600-800mm比較適合。返青期和現蕾期,植株生長較快,需水量多;開花期需水量少;結實期水量要適宜;冬季休眠期要進行冬灌或有積雪覆蓋。薰衣草屬長日照植物,生長發育期要求日照充足,全年要求日照時數在2000h以上。植株若在陰濕環境中,則會發育不良、衰老較快。薰衣草根系發達,性喜土層深厚、疏松、透氣良好而富含硅鈣質的肥沃土壤。酸性或堿性強的土壤及黏性重、排水不良或地下水位高的地塊,都不宜種植。薰衣草具有鎮靜催眠,解痙,抗菌,神經保護,降脂等功效。本專利技術通過系統地篩選研究,意外地發現薰衣草提取物具有顯著抗腫瘤活性,即薰衣草提取物對乳腺癌、宮頸癌、肝癌、肺癌、胃癌、結腸癌、胰腺癌、腦膠質瘤等惡性腫瘤的具有很好的預防及治療作用,可以應用于癌癥的預防和治療。
    技術實現思路
    本專利技術所解決的技術問題是提供一種薰衣草提取物。本專利技術還提供了以薰衣草提取物為主要活性成分的組合物。本專利技術同時提供了薰衣草提取物及其組合物的制備和在制備抗腫瘤藥物中的應用。本專利技術是通過如下技術方案實現的:維吾爾藥薰衣草經超聲提取,提取液濃縮后,用硅膠(SiO2)柱分離,上樣后的硅膠柱,用石油醚:丙酮混合溶劑梯度洗脫(石油醚:丙酮,比例見表1),各石油醚:丙酮比例混合溶劑洗脫液,濃縮,干燥后,利用體外抗腫瘤活性篩選體系測試其抗腫瘤活性,意外地發現先用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:0-100:5,體積比)洗脫,繼用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:6-100:12,體積比)洗脫,石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:6-100:12,體積比)洗脫液干燥后,具有顯著地抗腫瘤活性。優選地,先用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:5,體積比)洗脫,繼用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:12,體積比)洗脫,石油醚:丙酮100:12洗脫液干燥即得。本專利技術的抗腫瘤活性
    的化合物,可以通過以上方法,得到富集,從而與其他雜質類成分分離開。該活性提取物從未見文獻報道,其100:6-100:12薄層色譜(TLC)分析表征如圖1,TLC分析條件:GF254硅膠板,展開系統:石油醚:乙酸乙酯:丙酮=3:1:1,顯色方法:香草醛濃硫酸顯色。維吾爾藥薰衣草經超聲提取,提取液濃縮后,用硅膠(SiO2)柱分離,上樣后的硅膠柱,用石油醚:丙酮混合溶劑梯度洗脫(石油醚:丙酮,比例見表1),各石油醚:丙酮比例混合溶劑洗脫液,濃縮,干燥后,利用體外抗腫瘤活性篩選體系測試其抗腫瘤活性,意外地發現先用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:17,體積比)洗脫,繼用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:20-100:30,體積比)洗脫,石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:20-100:30,體積比)洗脫液干燥后,具有顯著地抗腫瘤活性。優選地,先用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:17,體積比)洗脫,繼用石油醚:丙酮混合溶劑(石油醚:丙酮,100:30,體積比)洗脫,石油醚:丙酮100:30洗脫液干燥即得。本專利技術的抗腫瘤活性的化合物,可以通過以上方法,得到富集,從而與其他雜質類成分分離開。該活性提取物從未見文獻報道,其100:20-100:30的TLC分析表征如圖2,TLC分析條件:GF254硅膠板,展開系統:石油醚:乙酸乙酯:丙酮=3:1:1,顯色方法:香草醛濃硫酸顯色。具體,發現過程如下:1、薰衣草超聲提取物的制備取維吾爾藥薰衣草20g,經100ml甲醇超聲提取15min,提取液濃縮后,得提取物SN0339A,樣品1.3065g,將醇提后的藥渣經200ml水煮沸提取2h,提取液濃縮后,得提取物SN0339B,樣品0.6071g,樣品合并共1.9136g,留樣0.8098g,剩余1.1038g上柱,拌樣硅膠3g,空白硅膠10g,梯度洗脫溶劑為石油醚-丙酮系統。2、石油醚:丙酮混合溶劑梯度洗脫方法和結果取維吾爾藥薰衣草20g,經100ml甲醇超聲提取15min,提取液濃縮后,得提取物SN0339A,樣品1.3065g,將醇提后的藥渣經200ml水煮沸提取2h,提取液濃縮后,得提取物SN0339B,樣品0.6071g,樣品合并共1.9136g,留樣0.8098g,剩余1.1038g上柱,甲醇溶解,共用甲醇15ml。上硅膠柱色譜,拌樣硅膠3g,空白硅膠10g,玻璃柱內徑2.0cm,石油醚:丙酮系統梯度洗脫(條件見表1),柱體積25ml,每個梯度洗脫200ml,得到各個濃度提取洗脫液的洗脫物,回收溶劑,即得石油醚:丙酮梯度洗脫提取物,收率見表1,TLC分析結果見圖3,TLC分析條件:GF254硅膠板,展開系統:石油醚:乙酸乙酯:丙酮=3:1:1,顯色方法:香草醛濃硫酸顯色。表1梯度(石-丙)體積(ml)編號重量(mg)100:00200SN0339AB011.7100:01200SN0339AB028.0100:02200SN0339AB037.3100:03200SN0339AB0413.8100:04200SN0339AB0515.3100:05200SN0339AB061.3100:06200SN0339AB0718.2100:08200SN0339AB081.8100:10200SN0339AB091.2100:12200SN0339AB103.1100:14200SN0339AB1118.1100:17200SN0339AB1219.1100:20200SN0339AB1313.5100:25200SN0339AB1417100:30200SN0339AB1521.5100:50200SN0339AB168.0100:100200SN0339AB174.30:100200SN0339AB1866.3純甲醇200SN0339AB1912573、抗腫瘤活性篩選方法和結果1)實驗條件a)細胞株信息人肝癌細胞株HepG2購于中國典型培養物保藏中心細胞庫。b)藥品及試劑樣品無菌條件下,DMSO溶解配置成母液濃度為100mg/mL,使用時用RPMI-1640培養液稀釋至所需濃度(DMSO≤1‰)。RPMI Medium 1640培養基干粉購于美國GIBCO公司。胎牛血清購于北京元亨圣馬生物技術研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴鹽(MTT)。c)儀器CO2培養箱(SANYO,日本)垂直層流潔凈工作臺(上海上凈凈化設備有限公司)倒置生物顯微鏡(重慶光電儀器有限公司)低/高速臺式離心機(上海安亭科學儀器廠)電子天平(奧豪斯儀器有限公司)酶標儀(伯樂生命醫學產品有限公司)立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫療器械廠)鼓風干燥箱(上海躍進醫療器械廠)PH計(SARTORIUS,德國)2)實驗方法和過程人肝癌細胞株HepG2細胞以4本文檔來自技高網
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    【技術保護點】
    一種維吾爾藥薰衣草提取物,其特征為維吾爾藥薰衣草經溶劑超聲提取,提取液濃縮后,用硅膠柱分離,上樣后的硅膠柱,先用體積比100:0?100:5的石油醚?丙酮混合溶劑洗脫,繼用體積比100:6?100:12的石油醚?丙酮混合溶劑洗脫,石油醚?丙酮100:6?100:12混合溶劑洗脫液經回收有機溶劑,干燥即得;或先用體積比100:17的石油醚?丙酮混合溶劑洗脫,繼用體積比100:20?100:30的石油醚?丙酮混合溶劑洗脫,石油醚?丙酮100:20?100:30混合溶劑洗脫液經回收有機溶劑,干燥即得。

    【技術特征摘要】
    1.一種維吾爾藥薰衣草提取物,其特征為維吾爾藥薰衣草經溶劑超聲提取,提取液濃縮后,用硅膠柱分離,上樣后的硅膠柱,先用體積比100:0-100:5的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫,繼用體積比100:6-100:12的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫,石油醚-丙酮100:6-100:12混合溶劑洗脫液經回收有機溶劑,干燥即得;或先用體積比100:17的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫,繼用體積比100:20-100:30的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫,石油醚-丙酮100:20-100:30混合溶劑洗脫液經回收有機溶劑,干燥即得。2.如權利要求1所述的一種維吾爾藥薰衣草提取物,其特征為,所述的提取用有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑,優選甲醇或95%乙醇,提取用有機溶劑用量為藥材重量的2-50倍(重量/體積比)。3.如權利要求1所述維的維吾爾藥薰衣草提取物,其特征為,洗脫液的用量為2-50倍柱體積。4.如權利要求1所述的維吾爾藥薰衣草提取物,其特征為,先用體積比100:5的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫1...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:王金輝黃健張萃
    申請(專利權)人:沈陽藥科大學
    類型:發明
    國別省市:遼寧;21

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