本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的方法，包括以下步驟：1、配制一定濃度的瓊脂溶液，攪拌，加熱溶解；2、配制適宜濃度的殼聚糖溶液，攪拌，溶解；3、瓊脂溶液加入殼聚糖溶液，攪拌；4、用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)溶液PH，使殼聚糖絮凝；5、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；6、讓濾液降溫，使其凝膠，將凝膠冷凍脫水，烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂糖。本發(fā)明專利技術(shù)所使用的制備方法簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)，環(huán)保，制備的瓊脂糖凝膠性能好，強(qiáng)度高，電內(nèi)滲低，可以低于0.1，穩(wěn)定性好，室溫下可以保存5年。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生化領(lǐng)域，具體涉及一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的生產(chǎn)工藝。
技術(shù)介紹
瓊脂（Agar）是從大型海藻石花菜、江蘺等提取制成，廣泛應(yīng)用于食品和生化等行業(yè)。瓊脂包含兩個(gè)主要組分，一個(gè)組分是電中性的瓊脂糖，另一個(gè)組分是含有硫酸基、丙酮酸基等帶負(fù)電荷基團(tuán)的瓊膠酯（Agaropectin）。瓊脂糖是由1，3連結(jié)的β-D-半乳糖和1，4連結(jié)的3，6-脫水α-L-半乳糖相間聯(lián)結(jié)而成的鏈狀多糖，廣泛應(yīng)用于電泳、凝膠擴(kuò)散和色譜。在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，瓊脂糖中過多的瓊膠酯使凝膠在直流電場(chǎng)下產(chǎn)生對(duì)流，影響樣品的遷移和分離，直接表現(xiàn)為電內(nèi)滲（electroendosmosis）和蛋白質(zhì)吸附。從瓊脂中制備瓊脂糖首要任務(wù)是盡可能去除瓊脂中的瓊膠酯，降低電內(nèi)滲，商品化低電內(nèi)滲瓊脂糖要求電內(nèi)滲低于0.13，更好的要求電內(nèi)滲低于0.10，瓊脂糖制備過程中同時(shí)去除瓊脂中少量的蛋白質(zhì)、不溶性雜質(zhì)、可溶性鹽和色素，提高瓊脂糖純度、凝膠性能和品質(zhì)穩(wěn)定性。1937年荒木首次從瓊脂中分離出瓊脂糖（Agarose），直到1961年Hjertin首先發(fā)現(xiàn)了瓊脂糖優(yōu)異的使用性能后才引起了越來越多的關(guān)注，開始工業(yè)化生產(chǎn)瓊脂糖，研究開發(fā)了多種瓊脂糖的制備方法，這些方法存在明顯不足，如乙酰化法反應(yīng)過程中瓊脂糖被降解，制得的產(chǎn)品是棕色，季銨鹽沉淀法難于把瓊膠酯絮凝物從瓊脂糖溶液分離，聚乙二醇沉淀法需要多次重復(fù)工藝過程，DEAE-纖維素法對(duì)不同來源的瓊脂適用性差，色譜法所用試劑昂貴，這些方法存在操作繁瑣、試劑昂貴和瓊脂糖得率低等問題，不是商業(yè)化生產(chǎn)的理想工藝。殼聚糖（Chitosan）是帶有正電荷的天然多糖，無毒，無害，主要從蟹殼和蝦殼提取制得，殼聚糖不溶于水，溶于稀酸，溶于稀酸的殼聚糖在堿性條件下會(huì)再徹底沉淀。通過電中和凝聚和架橋絮凝作用，殼聚糖吸附帶負(fù)電荷的物質(zhì)，殼聚糖分子中游離的氨基和羥基與多種金屬離子形成穩(wěn)定的螯合物，殼聚糖廣泛應(yīng)用于污水處理，果汁加工等行業(yè)，殼聚糖作為保健食品，用于調(diào)節(jié)血脂，提高免疫力。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的方法，該方法簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)，環(huán)保，制得的低電內(nèi)滲瓊脂糖品質(zhì)優(yōu)良，凝膠性能優(yōu)異。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)的解決方案是：一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的方法，所述低電內(nèi)滲瓊脂糖，其電內(nèi)滲值低于0.1，包括如下步驟：步驟a、配制質(zhì)量百分比濃度為0.8-4.0％的瓊脂溶液，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于70-90℃的水浴鍋中恒溫；步驟b、配制質(zhì)量百分比濃度為0.3%-1.5%殼聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶劑配制殼聚糖溶液，室溫?cái)嚢枞芙猓徊襟Ec、將步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，兩種溶液的體積比為10∶1-5∶1，攪拌混勻，于70-90℃的水浴鍋中恒溫；步驟d、用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至7.2-9.0，使殼聚糖絮凝，攪拌0.5-3小時(shí)；步驟e、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟f、讓濾液降溫，使其凝膠4-6小時(shí)，將凝膠于-20℃冷凍12小時(shí)，脫水，50-60℃烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂糖。所述步驟b中殼聚糖分子量為25，000以上，脫乙酰度75%-95%。所述步驟a采用的瓊脂來源于江蘺、石花菜或雞毛菜屬海洋紅藻。所述低電內(nèi)滲瓊脂糖，其電內(nèi)滲值為0.06- 0.10。所述步驟b中室溫?cái)嚢枞芙?-5小時(shí)。所述瓊脂糖對(duì)瓊脂收率為80%以上，室溫下瓊脂糖保質(zhì)期不低于5年。本專利技術(shù)方法簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)，環(huán)保，經(jīng)本專利技術(shù)制得的低電內(nèi)滲瓊脂糖電內(nèi)滲低于0.1，品質(zhì)優(yōu)良，凝膠性能優(yōu)異，該方法適用于各種來源的海洋紅藻瓊脂，是理想的商業(yè)化生產(chǎn)工藝。具體實(shí)施方式本專利技術(shù)揭示了一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的方法，所述低電內(nèi)滲瓊脂糖，其電內(nèi)滲值低于0.1，為0.06- 0.10，包括如下步驟：步驟a、配制質(zhì)量百分比濃度為0.8-4.0％的瓊脂溶液，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于70-90℃的水浴鍋中恒溫；采用的瓊脂來源于江蘺、石花菜或雞毛菜屬海洋紅藻；步驟b、配制質(zhì)量百分比濃度為0.3%-1.5%殼聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶劑配制殼聚糖溶液，室溫?cái)嚢枞芙?-5小時(shí)；殼聚糖分子量為25，000以上，脫乙酰度75%-95%；步驟c、將步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，兩種溶液的體積比為10∶1-5∶1，攪拌混勻，于70-90℃的水浴鍋中恒溫；步驟d、用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至7.2-9.0，使殼聚糖絮凝，攪拌0.5-3.0小時(shí)；步驟e、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟f、讓濾液降溫，使其凝膠4-6小時(shí)，將凝膠于-20℃冷凍12小時(shí)，脫水，50-60℃烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂糖。所述瓊脂糖對(duì)瓊脂收率為80%以上，室溫下瓊脂糖保質(zhì)期不低于5年。實(shí)施例1：步驟a、稱取10g瓊脂粉（石花菜瓊脂），加入500ml去離子水，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于85℃的水浴鍋中恒溫；步驟b、稱取0.3g殼聚糖，加入80ml去離子水，攪拌，加入0.8ml冰醋酸，室溫?cái)嚢枞芙猓渲袣ぞ厶堑姆肿恿繛?0，000，脫乙酰度88%；步驟c、步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，攪拌混勻，于75℃的水浴鍋中恒溫；步驟d、用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至7.2，使殼聚糖絮凝，攪拌2.5小時(shí)；10%氫氧化鈉溶液配制方法：稱取1g氫氧化鈉，加入9ml去離子水，攪拌溶解；步驟e、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟f、讓濾液降溫，使其凝膠5小時(shí)，將凝膠于-20℃冷凍12小時(shí)，脫水，50℃烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂糖8.25g，得率為82.5%，經(jīng)測(cè)定其電內(nèi)滲值為0.08，凝膠強(qiáng)度1385 g/cm2 (含1%瓊脂糖)。實(shí)施例2：步驟a、稱取4g瓊脂粉（江蘺瓊脂），加入480ml去離子水，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于75℃的水浴鍋中恒溫；步驟b、稱取0.5g殼聚糖，加入80ml去離子水，攪拌，加入0.8ml冰醋酸，室溫?cái)嚢枞芙猓渲袣ぞ厶堑姆肿恿繛?0，000，脫乙酰度76%；步驟c、步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，攪拌混勻，于80℃的水浴鍋中恒溫；用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至8.0，使殼聚糖絮凝，攪拌1小時(shí)；步驟d、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟e、讓濾液降溫，使其凝膠6小時(shí)，將凝膠于-20℃冷凍12小時(shí)，脫水，55℃烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂糖3.34g，得率為83.5%，經(jīng)測(cè)定其電內(nèi)滲值為0.08，凝膠強(qiáng)度1325 g/cm2 (含1%瓊脂糖)。實(shí)施例3：步驟a、稱取18g瓊脂粉（江蘺瓊脂），加入600ml去離子水，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于85℃的水浴鍋中恒溫；步驟b、稱取1.0g殼聚糖，加入80ml去離子水，攪拌，加入0.8ml冰醋酸，室溫?cái)嚢枞芙猓渲袣ぞ厶堑姆肿恿繛?00，000，脫乙酰度83%；步驟c、步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，攪拌混勻，于70-90℃的水浴鍋中恒溫；用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至9.0，使殼聚糖絮凝，攪拌2小時(shí)；步驟d、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟e、讓濾液降溫，使其凝膠6本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的方法，所述低電內(nèi)滲瓊脂糖，其電內(nèi)滲值低于0.1，包括如下步驟：步驟a、配制質(zhì)量百分比濃度為0.8?4.0％的瓊脂溶液，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于70?90℃的水浴鍋中恒溫；步驟b、配制質(zhì)量百分比濃度為0.3%?1.5%殼聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶劑配制殼聚糖溶液，室溫?cái)嚢枞芙猓徊襟Ec、將步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，兩種溶液的體積比為10∶1?5∶1，攪拌混勻，于70?90℃的水浴鍋中恒溫；步驟d、用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至7.2?9.0，使殼聚糖絮凝，攪拌0.5?3小時(shí)；步驟e、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟f、讓濾液降溫，使其凝膠4?6小時(shí)，將凝膠于?20℃冷凍12小時(shí)，脫水，50?60℃烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂糖。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種用殼聚糖絮凝法從瓊脂中分離制備低電內(nèi)滲瓊脂糖的方法，所述低電內(nèi)滲瓊脂糖，其電內(nèi)滲值低于0.1，包括如下步驟：步驟a、配制質(zhì)量百分比濃度為0.8-4.0％的瓊脂溶液，加熱攪拌完全溶解成澄清溶液，并置于70-90℃的水浴鍋中恒溫；步驟b、配制質(zhì)量百分比濃度為0.3%-1.5%殼聚糖溶液，以1%醋酸溶液做溶劑配制殼聚糖溶液，室溫?cái)嚢枞芙猓徊襟Ec、將步驟a所得的瓊脂溶液加入步驟b所得的殼聚糖溶液，兩種溶液的體積比為10∶1-5∶1，攪拌混勻，于70-90℃的水浴鍋中恒溫；步驟d、用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟c所得溶液PH至7.2-9.0，使殼聚糖絮凝，攪拌0.5-3小時(shí)；步驟e、趁熱過濾，去濾渣，收集濾液；步驟f、讓濾液降溫，使其凝膠4-6小時(shí)，將凝膠于-20℃冷凍12小時(shí)，脫水，50-60℃烘干，粉碎得低電內(nèi)滲瓊脂...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：傅天保，楊耀聰，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：廈門太陽馬生物工程有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：福建;35
還沒有人留言評(píng)論。發(fā)表了對(duì)其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。