一種用于結腸癌預后判斷的方法及試劑盒技術

本發明專利技術提供了一種用于結腸癌預后判斷的方法，包括檢測一種多肽的氨基酸序列，所述氨基酸序列選自SEQ?NO.1所示序列或選自與SEQ?NO.1所示序列顯示至少99％同一性的序列。本發明專利技術提供了一種結腸癌預后評估判斷新標記物：HOXB?AS3多肽。臨床研究證實，其在結腸癌組織中低表達或不表達與結腸癌患者預后差呈正相關，結腸癌組織中HOXB?AS3多肽低水平的患者具有更高的死亡率和更短的生存期。由此可知，采用HOXB?AS3多肽作為生物標志物有效地提高了臨床中使用試劑盒進行結腸癌預后判斷的陽性符合率。并且通過檢測本發明專利技術的多肽在生物學樣品組織切片中的水平，可有助于判斷結腸癌的發生及其惡性程度和轉移。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及腫瘤的診斷和治療領域，具體而言，涉及一種用于結腸癌預后判斷的方法及試劑盒。
技術介紹
結腸癌是世界上一種常見的消化系統惡性腫瘤，其發病率在各類腫瘤中排第3位。全球每年新發病例約為120萬例，每年死亡人數高達60萬。近年來，隨著人們生活水平的提高，生活方式、飲食結構的改變，人口老齡化的加劇，結腸癌發病率在我國逐年上升，并且呈現出年輕化的趨勢，其發病率和死亡率分別位居我國腫瘤發病率和死亡率的第3和5位。早期局限性結腸癌患者的5年生存率可達90％，然而僅有不到40％的結腸癌患者在早期得到確證。大多數結腸癌患者就診時，其已經中晚期和大概40～50％發生了遠處轉移，晚期結腸癌患者生存率則降到11％左右。隨著結腸癌診療技術的不斷發展，結腸癌的預后有了很大的改善，但晚期結腸癌患者的預后仍然不盡如意。臨床治療失敗的最主要原因是結腸癌發生了轉移或復發。因此，鑒定能用于提示結腸癌轉移復發的新的標記物，有助于臨床上評估結腸癌患者的預后，判斷手術切除后是否需要進一步的輔助治療(如化療)。目前，TNM分期是判斷結腸癌患者預后的最重要臨床預測指標。然而，許多結腸癌患者即使TNM分期屬于早期，腫瘤仍然發生轉移和復發，說明部分目前臨床診療技術上發現沒有發生轉移的結腸癌，仍然存在轉移復發的潛能。因此，很需要研究開發出更好的用于評估結腸癌患者預后的新標記物。
技術實現思路
有鑒于此，本專利技術提供了一種用于結腸癌預后判斷的方法，包括檢測一種多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列選自SEQ NO.1所示序列或選自與SEQ NO.1所示序列顯示至少99％同一性的序列。在某些實施方式中，所述的多肽為HOXB-AS3多肽。在某些實施方式中，所述檢測HOXB-AS3多肽的抗原表位肽序列選自SEQ NO.2或選自與SEQ NO.2所示序列顯示至少99％同一性的序列。在某些實施方式中，所述抗原表位肽的純度>85％。在某些實施方式中，所述抗原表位肽偶聯有鑰孔戚血藍蛋白作為載體蛋白，增強抗原表位肽的免疫原性。在某些實施方式中，所述檢測一種多肽的氨基酸序列的步驟之前，還包括下列步驟：提供分離的待測試的生物學樣品；將所述生物學樣品進行石蠟包埋并制成組織切片。在某些實施方式中，所述檢測一種多肽的氨基酸序列的步驟之后，還包括下列步驟：依據所述羊抗兔二抗上偶聯的二氨基聯苯胺對所述組織切片中結腸癌細胞染色的強度和面積進行評分；所述細胞染色的強度評分和所述細胞的染色面積評分相加，獲得HOXB-AS3多肽表達水平的最終評分；依據所述最終評分判斷HOXB-AS3多肽在結腸癌組織中表達水平，從而實現對結腸癌的診斷或預后判斷。在某些實施方式中，還包括對結腸癌組織免疫組化染色切片進行成像的步驟。本專利技術還提供了一種用于結腸癌預后判斷的試劑盒，所述試劑盒應用結腸癌預后判斷的方法進行結腸癌預后判斷。本專利技術提供的一種用于結腸癌預后判斷的方法及試劑盒的優點在于：(1)提供一種結腸癌預后評估判斷新標記物：HOXB-AS3多肽。臨床研究證實，其在結腸癌組織中低表達或不表達與結腸癌患者預后差呈正相關，結腸癌組織中HOXB-AS3多肽低水平的患者具有更高的死亡率和更短的生存期。由此可知，采用HOXB-AS3多肽作為生物標志物有效的提高了臨床中使用試劑盒進行結腸癌預后判斷的陽性符合率。(2)本專利技術的多肽HOXB-AS3可作為結腸癌預后判斷的生物標志物。并且通過使用本專利技術的多肽的特異性抗體來檢測本專利技術的多肽在生物學樣品的組織切片中的水平，可有助于判斷結腸癌的發生及其惡性程度和轉移。(3)在本專利技術之前，還沒有出現涉及本專利技術蛋白多肽用于結腸癌預后評估診斷的公開報道，更沒有出現證實HOXB-AS3長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)編碼一種活性多肽 的公開報道，也就更沒有出現HOXB-AS3多肽用于結腸癌預后評估診斷的公開報道。綜上所述，本專利技術具有上述諸多的優點及實用價值，并在同類產品中未見有類似的方法公開發表或使用而確屬創新。附圖說明應當理解的是，以下附圖僅示出了本專利技術的某些實施例，因此不應被看作是對范圍的限定，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。圖1為本專利技術實施例2中抗HOXB-AS3抗體能夠特異識別和檢測HOXB-AS3多肽的結果圖；圖2為本專利技術實施例3的HOXB-AS3多肽在同一來源不同侵襲轉移潛能結腸癌細胞中表達的結果；圖3為本專利技術實施例4的HOXB-AS3多肽在3對新鮮冰凍成對的結腸癌組織與其對應癌傍結腸組織中的結果。圖4本專利技術實施例5中HOXB-AS3多肽在結腸癌和對應癌傍正常結腸組織中表達的示意圖；圖4a表示對應癌傍正常結腸組織；圖4b表示結腸癌組織；圖5為本專利技術實施例5的HOXB-AS3多肽在90對成對的結腸癌組織與其對應癌傍結腸石蠟組織中表達結果；圖6為本專利技術實施例5中HOXB-AS3多肽表達水平高低與結腸癌患者死亡率關系的結果；圖7為本專利技術實施例5中HOXB-AS3多肽不同表達水平對結 腸癌患者預后判斷的Kaplan-Meier分析曲線圖。具體實施方式下面結合具體實施例的方式對本專利技術的權利要求做進一步的詳細說明，在下面的描述中闡述了很多具體細節以便于充分理解本專利技術。但是本專利技術能夠以很多不同于在此描述的其它方式來實施，本領域技術人員可以在不違背本專利技術內涵的情況下做類似改進，因此本專利技術不受下面公開的具體實施的限制。本專利技術提供了一種用于結腸癌預后判斷的方法，包括檢測一種多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列選自SEQ NO.1所示序列或選自與SEQ NO.1所示序列顯示至少99％同一性的序列。進一步的，所述的多肽為HOXB-AS3多肽。上述，需要理解的是，提供一種結腸癌預后評估判斷新標記物：HOXB-AS3多肽。臨床研究證實，其在結腸癌組織中低表達或不表達與結腸癌患者預后差呈正相關，結腸癌組織中HOXB-AS3多肽低水平的患者具有更高的死亡率和更短的生存期。由此可知，采用HOXB-AS多肽作為生物標志物有效的提高了臨床中使用試劑盒進行結腸癌診斷或預后判斷的陽性符合率。可以理解的是，本專利技術的多肽HOXB-AS3可作為結腸癌預后判斷的生物標志物。并且通過使用本專利技術的多肽的特異性抗體來檢測本專利技術的多肽在生物學樣品的組織切片中的水平，可有助于判斷結腸癌的發生及其惡性程度和轉移。在本專利技術之前，還沒有出現涉及本專利技術蛋白多肽用于結腸癌 預后評估診斷的公開報道，更沒有出現證實HOXB-AS長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)編碼一種活性多肽的公開報道，也就更沒有出現HOXB-AS3多肽用于結腸癌預后評估診斷的公開報道。進一步的，所述檢測HOXB-AS3多肽的抗原表位肽序列選自SEQ NO.2或選自與SEQ NO.2所示序列顯示至少99％同一性的序列。進一步的，所述抗原表位肽的純度>85％。進一步的，所述抗原表位肽偶聯有鑰孔戚血藍蛋白KLH作為載體蛋白，增強抗原表位肽的免疫原性。進一步的，所述檢測一種多肽的氨基酸序列的步驟之前，還包括下列步驟：提供分離的待測試的生物學樣品；將所述生物學樣品進行石蠟包埋并制成組織切片。進一步的，所述檢測一種多肽的氨基酸序列的步驟之本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：包括檢測一種多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列選自SEQ?NO.1所示序列或選自與SEQ?NO.1所示序列顯示至少99％同一性的序列。

【技術特征摘要】
1.一種用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：包括檢測一種多肽的氨基酸序列；所述氨基酸序列選自SEQ NO.1所示序列或選自與SEQ NO.1所示序列顯示至少99％同一性的序列。2.如權利要求1所述的用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：所述的多肽為HOXB-AS3多肽。3.如權利要求1所述的用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：所述檢測HOXB-AS3多肽的抗原表位肽序列選自SEQ NO.2或選自與SEQ NO.2所示序列顯示至少99％同一性的序列。4.如權利要求3所述的用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：所述抗原表位肽的純度>85％。5.如權利要求3所述的用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：所述抗原表位肽偶聯有鑰孔戚血藍蛋白作為載體蛋白，增強抗原表位肽的免疫原性。6.如權利要求5所述的用于結腸癌預后判斷的方法，其特征在于：所述檢測一種多肽的...

【專利技術屬性】
技術研發人員：晏光榮，黃金舟，陳敏，
申請(專利權)人：廣州醫科大學附屬第三醫院，
類型：發明
國別省市：廣東;44