抗鋸齒蛋白1抗體及使用方法技術

本公開文本提供抗鋸齒蛋白1抗體及其使用方法。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】專利
本專利技術涉及抗鋸齒蛋白(Jagged)抗體及其使用方法。專利技術背景刻缺蛋白(Notch)信號傳導途徑調節一系列多樣的細胞功能(Kopan et al.，Cell 137：216-233(2009))。已經在哺乳動物中鑒定了四種刻缺蛋白受體，即刻缺蛋白1-4，它們共享基本結構元件，包括胞外域，跨膜域，和胞內域。類似地，規范的刻缺蛋白配體共享某些結構相似性，但是也已經鑒定了一些非規范的刻缺蛋白配體(Kopan et al.，Cell 137：216-233(2009))。哺乳動物中的五種規范配體是德耳塔樣(Delta-like)1，德耳塔樣3，德耳塔樣4，鋸齒蛋白1和鋸齒蛋白2。刻缺蛋白配體對刻缺蛋白受體胞外域的結合啟動始于ADAM(解聯蛋白和金屬蛋白酶)家族的α-分泌酶在胞外S2位點處的蛋白水解切割的信號傳導級聯。S2處的切割繼以γ-分泌酶在胞內S3位點處的蛋白水解切割，這導致胞內域釋放和下游事件，最終活化刻缺蛋白依賴性轉錄因子諸如Hes1和Hey。異常刻缺蛋白表達和信號傳導牽涉多種疾病，包括癌癥(Koch et al.，Cell.Mol.Life Sci.64：2746-2762(2007))。清楚的是仍然需要具有最適于開發成治療劑的臨床屬性的藥劑。本文所述專利技術滿足了此需求并提供了其它好處。專利技術概述本專利技術提供抗鋸齒蛋白1抗體及其使用方法。本專利技術人出乎意料地發現，抗鋸齒蛋白1抗體A-1(見圖4和PCT公開文本No.2014/028446)在熱處理和/或凍融條件后在重鏈中受到切割。該抗體較差的穩定性潛在地降低它作為治療劑的價值。分析切割位點沒有揭示已知的蛋白酶切割基序。因此不知道改變抗體序列是否能降低觀察到的切割。而且，因為切割位點在一個重鏈HVR中，所以即使氨基酸改變會降低切割，也不知道是否能在沒有顯著降低該抗體對鋸齒蛋白1的親和力的情況下進行此類改變。專利技術人令人驚訝地發現突變HVR-H3中第101位處的氨基酸降低切割且親和力只有輕微損失。在一些實施方案中，提供了一種結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體，其中該抗體包含包含氨基酸序列SEQ ID NO：55或59的HVR-H3，其中X為除S以外的任何氨基酸。在一些實施方案中，該抗體包含至少一個，至少兩個，至少三個，至少四個，或五個選自下述的HVR：包含氨基酸序列SEQ ID NO：35或78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28或36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16或40的HVR-L3。在一些實施方案中，該抗體包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；或(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；或(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3。在本文所述任何實施方案中，該抗體可包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。在一些實施方案中，結合鋸齒蛋白1的分離的抗體包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或(c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。在一些實施方案中，結合鋸齒蛋白1的分離的抗體包含與氨基酸序列SEQ ID NO：54，58，或62具有至少95％同一性的VH序列。在一些實施方案中，結合鋸齒蛋白1的分離的抗體包含與氨基酸序列SEQ ID NO：10，26，或34具有至少95％同一性的VL序列。在一些實施方案中，該抗體包含(a)與氨基酸序列SEQ ID NO：54具有至少95％同一性的VH序列和與氨基酸序列SEQ ID NO：34具有至少95％同一性的VL序列；或(b)與氨基酸序列SEQ ID NO：58具有至少95％同一性的VH序列和與氨基酸序列SEQ ID NO：10具有至少95％同一性的VL序列；或(c)與氨基酸序列SEQ ID NO：62具有至少95％同一性的VH序列和與氨基酸序列SEQ ID NO：26具有至少95％同一性的VL序列。在一些實施方案中，結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體包含(a)VH序列SEQ ID NO：54，其中X為除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：34；或(b)VH序列SEQ ID NO：58，其中X為除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：10；或(c)VH序列SEQ ID NO：62，其中X為除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：26。在一些實施方案中，該抗體包含VH序列SEQ ID NO：54和VL序列SEQ ID NO：34。在一些實施方案中，重鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：56且輕鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。在一些實施方案中，重鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：57且輕鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。在本文所述任何實施方案中，X可以是除S或H以外的任何氨基酸。在本文所述任何實施方案中，X可以選自A，D，E，G，I，K，L，N，Q，R，T，和V。在本文所述任何實施方案中，X可以是T。在一些實施方案中，提供了一種結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體，其中該抗體包含包含氨基酸序列SEQ?ID?NO：55或59的HVR?H3，其中X為除S以外的任何氨基酸。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2014.02.12 US 61/939,1101.一種結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體，其中該抗體包含包含氨基酸序列SEQ ID NO：55或59的HVR-H3，其中X為除S以外的任何氨基酸。2.權利要求1的分離的抗體，其中該抗體包含至少一個，至少兩個，至少三個，至少四個，或五個選自下述的HVR：包含氨基酸序列SEQ ID NO：35或78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28或36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16或40的HVR-L3。3.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中該抗體包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；或b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；或c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3。4.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中該抗體包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。5.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中該抗體包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：55的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HVR-L3；或b)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3；或c)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：28的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：59的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：16的HVR-L3。6.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中該抗體包含與氨基酸序列SEQ ID NO：54，58，或62具有至少95％同一性的VH序列。7.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中該抗體包含與氨基酸序列SEQ ID NO：10，26，或34具有至少95％同一性的VL序列。8.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中該抗體包含：a)與氨基酸序列SEQ ID NO：54具有至少95％同一性的VH序列和與氨基酸序列SEQ ID NO：34具有至少95％同一性的VL序列；或b)與氨基酸序列SEQ ID NO：58具有至少95％同一性的VH序列和與氨基酸序列SEQ ID NO：10具有至少95％同一性的VL序列；或c)與氨基酸序列SEQ ID NO：62具有至少95％同一性的VH序列和與氨基酸序列SEQ ID NO：26具有至少95％同一性的VL序列。9.一種結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體，其包含：a)VH序列SEQ ID NO：54，其中X為除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：34；或b)VH序列SEQ ID NO：58，其中X為除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：10；或c)VH序列SEQ ID NO：62，其中X為除S以外的任何氨基酸，和VL序列SEQ ID NO：26。10.權利要求9的分離的抗體，其中該抗體包含VH序列SEQ ID NO：54和VL序列SEQ ID NO：34。11.權利要求10的分離的抗體，其中重鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：56且輕鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。12.權利要求10的分離的抗體，其中重鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：57且輕鏈包含氨基酸序列SEQ ID NO：53。13.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中X為除S或H以外的任何氨基酸。14.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中X選自A，D，E，G，I，K，L，N，Q，R，T，和V。15.前述權利要求任一項的分離的抗體，其中X為T。16.一種結合人鋸齒蛋白1的分離的抗體，其包含：a)包含氨基酸序列SEQ ID NO：78的HVR-H1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：36的HVR-H2；包含氨基酸序列SEQ ID NO：37的HVR-H3；包含氨基酸序列SEQ ID NO：38的HVR-L1；包含氨基酸序列SEQ ID NO：39的HVR-L2；和包含氨基酸序列SEQ ID NO：40的HV...

【專利技術屬性】
技術研發人員：Y·欽，J·Q·杭，C·W·西貝爾，Y·吳，
申請(專利權)人：豪夫邁·羅氏有限公司，
類型：發明
國別省市：瑞士;CH