FcRn拮抗劑及使用方法技術

提供了新的FcRn拮抗劑組合物，其包含相對于天然Fc區以增加的親和力和降低的pH依賴性與FcRn特異性結合的變體Fc區。還提供了具有增強的CD16結合親和力的FcRn拮抗劑。還提供了使用這些FcRn拮抗劑組合物來治療抗體介導的病癥(例如自身免疫病)的方法、編碼所述FcRn拮抗劑組合物的核酸、用于制備所述FcRn拮抗劑組合物的重組表達載體和宿主細胞以及包含所述FcRn拮抗劑組合物的藥物組合物。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】相關申請本申請要求于2013年12月24日提交的美國臨時申請61/920,547的優先權，其在此通過引用整體并入。
技術介紹
免疫球蛋白γ(IgG)抗體在很多病癥的病理學中起關鍵作用，例如自身免疫病、炎性疾病和其中病理學以過表達IgG抗體為特征的病癥(例如，高丙球蛋白血癥)(參見，例如Junghans，Immunologic Research 16(1)：29(1997))。IgG在血清中的半衰期相對于其他血漿蛋白的血清半衰期而言延長(Roopenian等，J.Immunology 170：3528(2003)；Junghans和Anderson，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93：5512(1996))。這一長半衰期部分地歸因于IgG的Fc區與Fc受體(FcRn)的結合。盡管FcRn最初表征為母體IgG的新生轉運受體，但是其還在成體中起保護IgG免受降解的功能。FcRn與胞飲的IgG結合并且保護IgG免于通過將其再循環回胞外室而轉運至降解性溶酶體。IgG與FcRn的pH依賴性結合促進該再循環，其中與在細胞外生理pH下相比，IgG/FcRn相互作用在酸性內體pH下更強。當IgG的血清濃度達到超過可利用FcRn分子的水平時，未結合的IgG無法受到保護而免受降解機制并且因此血清半衰期將降低。因此，抑制IgG與FcRn結合通過阻止IgG的IgG內體再循環而降低IgG的血清半衰期。因此，拮抗IgG與FcRn結合的藥劑可用于調節、治療或預防抗體介導的病癥(antibody-mediated disorder)，例如自身免疫病、炎性疾病等。拮抗IgGFc與FcRn結合之方法的一個實例涉及產生針對FcRn的封閉抗體(blocking antibody)(參見例如WO2002/43658)。而且，已鑒定到結合并拮抗FcRn功能的肽(參見例如US6,212,022和US8,101,186)。另外，還已鑒定到包含FcRn結合增強并且pH依賴性降低的變體Fc受體的全長IgG抗體，其拮抗FcRn與IgG結合(參見，例如8,163,881)。然而，本領域中需要拮抗FcRn與IgG結合以用于治療抗體介導的病癥的改良藥劑。
技術實現思路
本公開內容提供了新的FcRn拮抗劑組合物。這些組合物一般性地包含相對于天然Fc區以增加的親和力和降低的pH依賴性與FcRn特異性結合的變體Fc區或其FcRn結合片段。本專利技術部分地基于以下出人意料的發現：分離的變體Fc區(例如，在EU第252、254、256、433、434和436位(EU編號)分別包含氨基酸Y、T、E、K、F和Y的變體Fc區)是在體內比包含該變體Fc區之全長抗體更有效的FcRn拮抗劑。本公開內容的FcRn拮抗劑組合物特別地可用于降低含Fc劑(例如，抗體和免疫粘附素)的血清水平。因此，本公開內容還提供了使用本文中公開的FcRn拮抗劑組合物來治療抗體介導的病癥(例如自身免疫病)的方法。還提供了編碼FcRn拮抗劑組合物的核酸、用于制備FcRn拮抗劑組合物的重組表達載體和宿主細胞，以及包含FcRn拮抗劑組合物的藥物組合物。本文中公開的FcRn拮抗劑特別地優于先前所述的FcRn拮抗劑組合物和用于抗體介導之病癥的已知治療。例如，本文中公開的FcRn拮抗劑比靜脈內γ球蛋白(intravenous gamma globulin，IVIG)(用于很多抗體介導之病癥的當前治療)更小且更有效。因此，所公開FcRn拮抗劑的有效劑量可遠遠低于IVIG的有效劑量。此外，IVIG分離且純化自人供體，因而具有相當大的批間差異。本文中公開的FcRn拮抗劑組合物可重組產生或化學合成，因此具有遠遠更高的同質性。如本文中所證明的，本文中公開的FcRn拮抗劑還出人意料地比包含變體Fc受體的全長IgG抗體更有效，例如如Vaccaro等，Nature Biotech 23(9)1283-1288(1997)中所示。因此，在一個方面，本公開內容提供了包含變體Fc區或其FcRn結合片段的分離的FcRn拮抗劑，其中所述Fc區或片段在EU第252、254、256、433、434和436位分別包含氨基酸Y、T、E、K、F和Y，并且其中所述FcRn拮抗劑不是全長抗體。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑不包含抗體可變區或CH1結構域。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑不包含游離的半胱氨酸殘基。在某些實施方案中，所述Fc區是IgG Fc區(例如，人IgG Fc區)。在某些實施方案中，所述Fc區是IgG1 Fc區(例如，人IgG1 Fc區)。在某些實施方案中，所述Fc區是嵌合Fc區。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含SEQ ID NO：1中所示的變體Fc區氨基酸序列。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含變體Fc區，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列由SEQ ID NO：1、2或3中所示的氨基酸序列組成。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑由變體Fc區組成，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列由SEQ ID NO：2中所示的氨基酸序列組成。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含這樣的變體Fc區：相對于野生型IgG1 Fc區對Fcγ受體的親和力，其對Fc受體的親和力改變(增加或降低)。在某些實施方案中，所述變體Fc對CD16a的親和力增加。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含在EU第297位不含N-連接聚糖的變體Fc區。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含在EU第297位含有無巖藻糖基化之N-連接聚糖的變體Fc區。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含在EU第297位含有具有等分(bisecting)GlcNac的N-連接聚糖的變體Fc區。在某些實施方案中，所述FcRn拮抗劑包含與半衰期延長體(half-life extender)連接的變體Fc區。在某些實施方案中，所述半衰期延長體是聚乙二醇或人血清白蛋白。在某些實施方案中，本公開內容提供了FcRn拮抗劑組合物，其包含多個本文中公開的FcRn拮抗劑分子，其中至少50％(任選地，至少60％、70％、80％、90％、95％或99％)的所述分子包含具有無巖藻糖基化之N-連接聚糖的變體Fc區或其FcRn結合片段。在某些實施方案中，本公開內容提供了FcRn拮抗劑組合物，其包含多個本文中公開的FcRn拮抗劑分子，其中至少50％(任選地，至少60％、70％、80％、90％、95％或99％)的所述分子包含變體Fc區或其FcRn結合片段，所述變體Fc區或其FcRn結合片段包含具有等分GlcNac的N-連接聚糖。在某些實施方案中，本公開內容提供了FcRn拮抗劑組合物，其包含多個本文中公開的FcRn拮抗劑分子，其中所述組合物中超過95％的FcRn拮抗劑分子是單體(例如，超過95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％)。在某些實施方案中，本公開內容提供了FcRn拮抗劑組合物，其包含多個本文中公開的FcRn拮抗劑分子，其中所述組合物中少于5％的FcRn拮抗劑分子以聚集體存在(例如，少于5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0本文檔來自技高網...

【技術保護點】
包含變體Fc區或其FcRn結合片段的分離的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列由SEQ?ID?NO：1、2或3中所示的氨基酸序列組成，并且其中所述FcRn?拮抗劑不包含抗體可變區或CH1結構域。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2013.12.24 US 61/920,5471.包含變體Fc區或其FcRn結合片段的分離的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列由SEQ ID NO：1、2或3中所示的氨基酸序列組成，并且其中所述FcRn-拮抗劑不包含抗體可變區或CH1結構域。2.權利要求1所述的FcRn拮抗劑，其中相對于野生型IgG1 Fc區對Fcγ受體的親和力，所述變體Fc區對Fcγ受體的親和力增加。3.包含變體Fc區或其FcRn結合片段的分離的FcRn拮抗劑，其中所述Fc區的Fc結構域在EU第252、254、256、433、434和436位分別包含氨基酸Y、T、E、K、F和Y，并且其中相對于野生型IgG1 Fc區對Fcγ受體的親和力，所述Fc區對Fcγ受體的親和力增加。4.權利要求3所述的FcRn拮抗劑，其中所述Fc區是IgG Fc區。5.權利要求3所述的FcRn拮抗劑，其中所述Fc區是IgG1 Fc區。6.權利要求3所述的FcRn拮抗劑，其中所述Fc區是嵌合Fc區。7.權利要求3所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列包含SEQ ID NO：1、2或3中所示的氨基酸序列。8.權利要求3所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列由SEQ ID NO：1、2或3中所示的氨基酸序列組成。9.權利要求3所述的FcRn拮抗劑，其由變體Fc區組成，其中所述變體Fc區之Fc結構域的氨基酸序列由SEQ ID NO：1、2或3中所示的氨基酸序列組成。10.權利要求2至9中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述FcRn拮抗劑不包含抗體可變區或CH1結構域。11.權利要求1至10中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述FcRn拮抗劑不包含游離的半胱氨酸殘基。12.權利要求1至11中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區對CD16a的親和力增加。13.權利要求1至12中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區的Fc結構域在EU第297位不包含N-連接的聚糖。14.權利要求1至12中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區的Fc結構域包含在EU第297位具有無巖藻糖基化之N-連接聚糖的Fc結構域。15.權利要求1至12中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區的Fc結構域在所述Fc結構域之EU第297位包含具有等分GlcNac的N-連接聚糖。16.前述權利要求中任一項所述的FcRn拮抗劑，其中所述變體Fc區與半衰期延長體連接。17.權利要求16所述的FcRn拮抗劑，其中所述半衰期延長體是聚乙二醇或人血清白蛋白。18.FcRn拮抗劑組合物，其包含多個權利要求14所述的FcRn拮抗劑分子，其中至少50％(任選地，至少60％、70％、80％、90％、95％或99％)的所述分子包含變體Fc區或其FcRn結合片段，所述變體Fc區或其FcRn結合片段包含無巖藻糖基化的N-連接聚糖。19.FcRn拮抗劑組合物，其包含多個權利要求15所述的FcRn拮抗劑分子，其中至少50％(任選地，至少60％、70％、80％、90％、95％或99％)的所述分子包含變體Fc區或其FcRn結合片段，所述變體Fc區或其FcRn結合片段包含具有等分GlcNac的N-連接聚糖。20.藥物組合物，其包含前述權利要求中任一項所述的FcRn拮抗劑或FcRn拮抗劑組合物，以及可藥用載體或賦形劑。21.在對象中抑制FcRn功能的方法，所述方法包括向所述對象施用有效量的權利要求20所述的藥物組合物。22.在已施用含Fc劑的對象中降低所述含Fc劑的血清水平的方法，所述方法包括向所述對象同時或依次施用有效量的權利要求20所述的藥物組合物。23.權利要求22所述的方法，其中所述含Fc劑是抗體或免疫粘附素。24.權利要求22所述的方法，其中所述含Fc劑是治療劑或診斷劑。25.權利要求22所述的方法，其中所述含Fc劑是成像劑。26.權利要求22所述的方法，其中所述含Fc劑是抗體藥物綴合物。27.在對象中治療抗體介導的病癥的方法，所述方法包括向所述對象施用有效量的權利要求20所述的藥物組合物。...

【專利技術屬性】
技術研發人員：彼得·烏爾里希茨，克里斯托弗·布朗什托，托爾斯滕·德賴爾，喬納斯·德哈德，E·薩利·沃德歐泊，尼古拉斯·G·H·恩根內，
申請(專利權)人：阿爾金X有限公司，德克薩斯大學系統董事會，
類型：發明
國別省市：荷蘭;NL