快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒及使用方法技術

本發明專利技術涉及快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，包括指形管、藥膜和填充物，所述的指形管為一端封閉的玻璃管，所述藥膜為均勻附著在指形管內表面的啶蟲脒藥膜，所述填充物可拆卸的填充在指形管的開口端。本發明專利技術用于田間瓜蚜對啶蟲脒敏感性的快速診斷，縮短了診斷時間，結果準確可靠，避免在抗性種群使用啶蟲脒造成的增加成本、防治無效、污染環境等不良后果。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及害蟲敏感性快速檢測
，具體地說，涉及快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒及使用方法。
技術介紹
瓜蚜(Aphis gossypii Glover)又叫棉蚜，主要為害瓜類蔬菜，以成蟲及若蟲在葉背和嫩莖上吸食植物汁液。在我國除西藏未見報道外，各地均有發生。瓜苗嫩葉及生長點被害后，葉片卷縮，瓜苗萎蔫，甚至枯死。老葉受害，提前枯落，縮短結瓜期，造成減產。寄主包括黃瓜、南瓜、西葫蘆、西瓜、豆類、茄子、菠菜、蔥、洋蔥等蔬菜及棉、煙草、黃秋葵、甜瓜、哈密瓜、食用仙人掌、菜用番木瓜、甜菜等農作物。目前生產上防治瓜蚜主要采用化學防治，確定瓜蚜對常用藥劑的敏感性，正確選擇防治藥劑，才能有效控制瓜蚜為害。傳統的浸葉法、點滴法等生測方法費時費力，不能及時快速指導選藥用藥。近年來，診斷劑量法作為一種簡便的研究病蟲害敏感性的方法逐漸引起研究人員的關注。張潤祥、范仁俊、封云濤等人采用診斷劑量法開發了快速測定評估黃蚜對聯苯菊酯和啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，王少麗、張友軍等人開發了快速檢測殺蟲劑對煙粉虱毒力的試劑盒，高希武、劉曉嵐等人開發了檢測中黑盲蝽、綠盲蝽、禾谷縊管蚜、麥長管蚜抗藥性的方法。但使用診斷劑量法應用于瓜蚜對農藥的敏感性檢測方法尚未見報道。
技術實現思路
本專利技術提供快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒及使用方法，所要解決的技術問題是如何快速測定瓜蚜對啶蟲脒的敏感性水平，在田間快速判斷瓜蚜是否已經對啶蟲脒產生抗藥性，進而決定是否使用啶蟲脒進行防治。本專利技術解決上述技術問題的技術方案如下：本專利技術提供快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，包括指形管、藥膜和填充物，所述的指形管為一端封閉的玻璃管，所述藥膜為均勻附著在指形管內表面的啶蟲脒藥膜，所述填充物可拆卸的填充在指形管的開口端。本專利技術的有益效果是：本專利技術用于田間瓜蚜對啶蟲脒敏感性的快速診斷，縮短了診斷時間，結果準確可靠，避免在抗性種群使用啶蟲脒造成的增加成本、防治無效、污染環境等不良后果。進一步，所述指形管為圓筒形管，所述指形管的長度為8～10cm，內徑為2.5～3cm。采用上述進一步技術方案的有益效果在于：這一尺寸范圍內的指形管既能滿足一定的瓜蚜在其內生存活動，從而保證實驗中瓜蚜的死亡是由于藥膜的作用；這一尺寸的大小與手掌相適應，便于手握。進一步，所述藥膜通過將啶蟲脒丙酮溶液均勻滾施在指形管內壁，所述藥膜中啶蟲脒的含量為0.078μg/cm2。采用上述進一步技術方案的有益效果在于：上述數據是專利技術人經過大量的實驗得出的，能夠有效實現田間瓜蚜對啶蟲脒敏感性的快速診斷的最佳值。進一步，所述填充物為棉塞，所述棉塞為消毒處理的脫脂棉球，所述棉塞的大小與所述指形管的管口大小相匹配。采用上述進一步技術方案的有益效果在于：消毒處理過的脫脂棉球能夠避免雜菌或者其他污染對實驗數據準確性的影響，棉塞的大小與所述指形管的管口大小相匹配能夠保證將瓜蚜放入指形管并塞上棉塞后，實驗過程中瓜蚜不會從棉塞一端爬出。本專利技術還涉及快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒使用方法，使用步驟如下：S1.將所述的診斷試劑盒帶到待防治瓜蚜的田塊，打開填充物，將30頭瓜蚜輕掃入指形管，塞上填充物，放置3h；S2.檢查步驟S1得到的指形管內的活蟲數，并根據瓜蚜的存活率判定該種群對啶蟲脒的敏感性。進一步，所述步驟S2中判定法則為：若指形管內的活蟲數為0，表明受試種群對啶蟲脒敏感，可以使用啶蟲脒進行防治；若指形管內的活蟲數不為0，則表明該種群對啶蟲脒產生了一定抗性，應改用其他敏感度高的藥劑進行防治。附圖說明圖1為本專利技術的快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒的結構示意圖。附圖中，各標號所代表的部件列表如下：1、指形管，2、藥膜。具體實施方式以下結合附圖對本專利技術的原理和特征進行描述，所舉實例只用于解釋本專利技術，并非用于限定本專利技術的范圍。實施例1如圖1所示，本專利技術的快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，包括指形管1、藥膜2和填充物，所述的指形管1為一端封閉的玻璃管，所述藥膜2為均勻附著在指形管1內表面的啶蟲脒藥膜，所述填充物可拆卸的填充在指形管1的開口端。所述指形管1為圓筒形管，所述指形管1的長度為8～10cm，內徑為2.5～3cm。所述藥膜2通過將啶蟲脒丙酮溶液均勻滾施在指形管1內壁，所述藥膜2中啶蟲脒的含量為0.078μg/cm2。優選的，所述填充物為棉塞，所述棉塞為消毒處理的脫脂棉球，所述棉塞的大小與所述指形管1的管口大小相匹配。本專利技術的快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒使用方法，使用步驟如下：S1.將所述的診斷試劑盒帶到待防治瓜蚜的田塊，打開填充物，將30頭瓜蚜輕掃入指形管1，塞上填充物，放置3h；S2.檢查步驟S1得到的指形管1內的活蟲數，并根據瓜蚜的存活率判定該種群對啶蟲脒的敏感性。優選的，所述步驟S2中判定法則為：若指形管1內的活蟲數為0，表明受試種群對啶蟲脒敏感，可以使用啶蟲脒進行防治；若指形管1內的活蟲數不為0，則表明該種群對啶蟲脒產生了一定抗性，應改用其他敏感度高的藥劑進行防治。藥膜濃度是經過以下一系列試驗最終確定的。分別從河北省廊坊市有害生物防治重點野外科學觀測試驗站(LFS)和中國農業科學院植物保護研究所溫室(ZBS)采集黃瓜瓜蚜，采用葉片藥膜法和指形管藥膜法分別測定兩個種群對啶蟲脒的敏感性，測定用量如下表所示：表1 LFS種群和ZBS種群敏感性測定根據實驗室初步的毒力測定結果，對LFS種群進行了啶蟲脒敏感品系選育。用單頭蚜蟲飼養繁殖大量后代，采用葉片藥膜法選用低于初始品系LC50的啶蟲脒濃度作為單頭繁殖種群的篩選藥劑濃度，維持死亡率60～80％左右，經過篩選后得到SS品系。采用指形管藥膜法測定SS品系對LFS種群的啶蟲脒敏感性變異指數為2.18。表2 對啶蟲脒敏感品系選育(葉片藥膜法)表3 對啶蟲脒敏感性變異指數測定(指形管藥膜法，3h)通過多次采用指形管藥膜法測定SS品系對啶蟲脒的敏感性，確定其對啶蟲脒的LC50值、LC90值和LC99值。表4 SS種群敏感性測定(指形管藥膜法，3h)選擇LC90、2×LC90、LC99、2×LC99作為備選診斷劑量，使用LFS種群和SS品系進行比較驗證，最終確定2×LC99即7.20mg/L為診斷劑量，根據所使用的指形管(長9cm，內徑3cm)內表面積(91.8cm2)計算，藥膜劑量為0.078μg/cm2。表5 配方選藥試劑盒診斷劑量確定實施例2將啶蟲脒原藥用丙酮溶解，稀釋成7.20mg/L的啶蟲脒丙酮溶液，取1ml藥液加入到長9cm，內徑3cm的指形管中，充分滾動，使藥液均勻的附著在指形管內壁，形成藥膜，待管中丙酮全部揮發，將棉塞塞住管口，快速診斷試劑盒即制作完畢。將制作好的診斷試劑盒分別帶到北京馬連洼和河北廊坊瓜蚜發生嚴重的黃瓜田，在田間摘取蚜蟲分布較多的葉片，用小毛筆輕輕將蚜蟲掃入診斷試劑盒中，每管30頭，每個種群3管，3h后檢查瓜蚜死亡率。診斷結果為：2個種群的死亡率均為100％，表明北京馬連洼種群和河北廊坊種群的瓜蚜對啶蟲脒敏感，可以使用啶蟲脒進行防治。表6 診斷試劑盒田間應用結果以上所述僅為本專利技術的較佳實施例，并不用以限制本專利技術，凡在本專利技術的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本專利技術的保護本文檔來自技高網...

【技術保護點】
快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，包括指形管(1)、藥膜(2)和填充物，所述的指形管(1)為一端封閉的玻璃管，所述藥膜(2)為均勻附著在指形管(1)內表面的啶蟲脒藥膜，所述填充物可拆卸的填充在指形管(1)的開口端。

【技術特征摘要】
1.快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，包括指形管(1)、藥膜(2)和填充物，所述的指形管(1)為一端封閉的玻璃管，所述藥膜(2)為均勻附著在指形管(1)內表面的啶蟲脒藥膜，所述填充物可拆卸的填充在指形管(1)的開口端。2.根據權利要求1所述的快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，所述指形管(1)為圓筒形管，所述指形管(1)的長度為8～10cm，內徑為2.5～3cm。3.根據權利要求1所述的快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，所述藥膜(2)通過將啶蟲脒丙酮溶液均勻滾施在指形管(1)內壁，所述藥膜(2)中啶蟲脒的含量為0.078μg/cm2。4.根據權利要求1所述的快速測定瓜蚜對啶蟲脒敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，所述填充物為...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張燕寧，蔣紅云，張蘭，馮磊，毛連綱，
申請(專利權)人：中國農業科學院植物保護研究所，
類型：發明
國別省市：北京;11