一種卡特蘭快速培養繁殖方法技術

本發明專利技術涉及植物培養技術領域，具體涉及一種卡特蘭快速培養繁殖方法，包括以下步驟：材料選取、外植體預處理、外植體消毒、誘導培養、超聲波處理、增殖培養、生根培養、壯苗培養和移栽。通過本發明專利技術能對卡特蘭進行快速培養繁殖，效率高，并且培養后的卡特蘭苗株成苗率高，苗株品質好，栽培后適應性強，通過生物技術手段在短時間內，滿足了商業化生產的需求，為企業規模化、產業化培養卡特蘭提供了技術支持。同時本組培繁殖方法消毒效果好、褐變率低，從而大大提高了成苗率及工作效率，節約了資源。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及植物培養
，具體涉及一種卡特蘭快速培養繁殖方法。
技術介紹
卡特蘭，是國際上最有名的蘭花之一。原產美洲熱帶，為巴西、哥倫比亞等國國花。品種在數千個以上，顏色有白、黃、綠、紅紫等。繁殖用分株、組織培養或無菌播種，性喜溫暖、潮濕和充足的光照。卡特蘭高效繁殖的主要手段就是組織培養。國外一些發達國家常常采用工廠化育苗技術以及組織培養快繁技術，不僅可以創造巨大的經濟效益，同時也培育了很多優良品種，然而我國關于卡特蘭組織培養的快繁技術研究仍然處于初級階段，在很大程度上阻礙了卡特蘭的規模化生產。并且現有的其他蘭花品種的組織培養不能直接運用到卡特蘭培養上，所以現在目前急需一種卡特蘭快速培養繁殖方法。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種苗株品質好、培養繁殖快的卡特蘭快速培養繁殖方法。為了達到上述目的，本專利技術采用的技術方案為：一種卡特蘭快速培養繁殖方法，包括以下步驟：(1)材料選取：選取無病蟲害長勢良好的卡特蘭植株，進行5～8d的遮光處理，遮光處理后，選取長勢健壯植株上的新芽作為外植體；(2)外植體預處理：用抗氧化劑溶液洗滌剛切割的外植體花芽傷口表面；(3)外植體消毒：用軟刷毛將選取的外植體花芽在水池中進行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗潔精清洗干凈，置于流水下沖洗30min，然后在超凈臺上剝除外植體花芽最外面的一層苞葉，在經高溫滅菌過的75％酒精中浸泡1～2s，然后在浸泡在10％的次氯酸鈉溶液中初次消毒10min，初次消毒后，用無菌水沖洗5遍，再剝去一層苞葉，放入5％的次氯酸鈉溶液中再次消毒5min，接著采用重復消毒的方式，每次次氯酸鈉的濃度為上次消毒的一半，消毒時間也為上次消毒的一半，直至剝至留下最后的芽體，最后切取5mm左右的芽尖，泡在0.5％的次氯酸鈉溶液中消毒1min，用無菌水沖洗6～8次，用消毒濾紙吸干表面水分后放置于培養皿中備用；(4)誘導培養：將消毒后的外植體，接種在誘導培養基中進行培養，先進行7～10d的弱光照培養，光照強度為500～700lx，然后在進行常規光照培養，光照強度為1500～2000lx，培養溫度為24～26℃，光照時間為13h/d；所述誘導培養基為：1/2MS+0.4～0.8mg/L 6-BA+0.05～0.08mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L瓊脂+10～15％椰汁+490～510mg/L檸檬酸+5～7g/L PVP，pH值為5.4～5.5；(5)超聲波處理：將誘導出的原球莖放在頻率為25kHz的超聲波中處理3～4min；(6)增殖培養：超聲波處理后轉移至增殖培養基中繼續培養，所述增殖培養基為：1/2MS+1～2mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L瓊脂+10～15％椰汁+490～510mg/L檸檬酸+2～4g/L PVP，pH值為5.4～5.5；培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(7)生根培養：增殖培養后，轉入生根培養基中培養，所述生根培養基為：1/2MS+0.1～0.3mg/L NAA+140～160g/L香蕉泥+90～110mg/L檸檬酸+28～32g/L食糖+5～9g/L瓊脂，pH為5.4～5.5，培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(8)壯苗培養：選擇高3cm以上的無菌苗轉入壯苗培養基中培養，所述壯苗培養基為：1/2MS+0.3～0.7mg/L 6-BA+0.1～0.2mg/L GA3+10～20g/L蔗糖+10～20mg/L葡萄糖+190～200g/L香蕉泥+4～6g/L瓊脂，pH為5.4～5.5，培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(9)移栽：當試管苗生長至5～7cm高，葉2～3片時，將試管苗放在自然光下煉苗5～7天，打開瓶蓋煉苗1～2天；然后取出培養苗，用清水洗凈附著在根部的培養基，清洗時注意不要損害根部，然后移栽至培養基質中，保持濕度和通風，空氣濕度為75～85％，溫度為20～25℃。如上所述的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，進一步說明為，所述抗氧化劑溶液選用谷胱甘肽或抗壞血酸。如上所述的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，進一步說明為，所述誘導培養基為：1/2MS+0.6mg/L 6-BA+0.07mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L瓊脂+13％椰汁+500mg/L檸檬酸+6g/L PVP。如上所述的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，進一步說明為，所述增殖培養基為：1/2MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+13g/L蔗糖+7g/L瓊脂+13％椰汁+500mg/L檸檬酸+3g/L PVP。如上所述的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，進一步說明為，所述生根培養基為：1/2MS+0.2mg/L NAA+150g/L香蕉泥+100mg/L檸檬酸+30g/L食糖+7g/L瓊脂。如上所述的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，進一步說明為，所述壯苗培養基為：1/2MS+0.5mg/L 6-BA+0.15mg/L GA3+15g/L蔗糖+15mg/L葡萄糖+195g/L香蕉泥+5g/L瓊脂。如上所述的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，進一步說明為，所述壯苗培養步驟中，采用大口徑蘭花玻璃瓶進行無菌苗培養。本專利技術的有益效果是：通過本專利技術能對卡特蘭進行快速培養繁殖，效率高，并且培養后的卡特蘭苗株成苗率高，苗株品質好，栽培后適應性強，通過生物技術手段在短時間內，滿足了商業化生產的需求，為企業規模化、產業化培養卡特蘭提供了技術支持。同時本組培繁殖方法消毒效果好、褐變率低，從而大大提高了成苗率及工作效率，節約了資源。附圖說明圖1為本專利技術流程示意圖。具體實施方式下面結合附圖對本專利技術實施方式做進一步的闡述。如圖1所示，本專利技術提供的一種卡特蘭快速培養繁殖方法，包括以下步驟：材料選取、外植體預處理、外植體消毒、誘導培養、超聲波處理、增殖培養、生根培養、壯苗培養和移栽，本方法消毒效果好、培養繁殖快、成苗率高及褐變率低，從而能夠降低卡特蘭在組培過程中的褐變率，增大成苗率，提高工作效率，下面對方法中的每個步驟做詳細闡述。(1)材料選取：選取無病蟲害長勢良好的卡特蘭植株，進行5～8d的遮光處理，遮光處理后，選取長勢健壯植株上的新芽作為外植體；采用無病蟲害長勢良好的卡特蘭植株能夠降低苗株的發病率，保證在組培過程中不受其他因素的干擾，增加外植體成活率，并且經過遮光處理，能夠降低褐變率。(2)外植體預處理：用抗氧化劑溶液洗滌剛切割的外植體花芽傷口表面；能夠最大程度地減少氧氣與外植體切面接觸的機會，同時充分的析出外植體中水溶性的多酚物質和醌類物質，較少酚類物質的氧化，從而有效地減輕卡特蘭外植體在組織培養過程中的褐變，作為優選，所述抗氧化劑選用谷胱甘肽溶液，還可以選用抗壞血酸，還可以將幾種抗氧化劑結合在一起使用。(3)外植體消毒：用軟刷毛將選取的外植體花芽在水池中進行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗潔精清洗干凈，置于流水下沖洗30min，然后在超凈臺上剝除外植體花芽最外面的一層苞葉，在經高溫本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種卡特蘭快速培養繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)材料選取：選取無病蟲害長勢良好的卡特蘭植株，進行5～8d的遮光處理，遮光處理后，選取長勢健壯植株上的新芽作為外植體；(2)外植體預處理：用抗氧化劑溶液洗滌剛切割的外植體花芽傷口表面；(3)外植體消毒：用軟刷毛將選取的外植體花芽在水池中進行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗潔精清洗干凈，置于流水下沖洗30min，然后在超凈臺上剝除外植體花芽最外面的一層苞葉，在經高溫滅菌過的75％酒精中浸泡1～2s，然后在浸泡在10％的次氯酸鈉溶液中初次消毒10min，初次消毒后，用無菌水沖洗5遍，再剝去一層苞葉，放入5％的次氯酸鈉溶液中再次消毒5min，接著采用重復消毒的方式，每次次氯酸鈉的濃度為上次消毒的一半，消毒時間也為上次消毒的一半，直至剝至留下最后的芽體，最后切取5mm左右的芽尖，泡在0.5％的次氯酸鈉溶液中消毒1min，用無菌水沖洗6～8次，用消毒濾紙吸干表面水分后放置于培養皿中備用；(4)誘導培養：將消毒后的外植體，接種在誘導培養基中進行培養，先進行7～10d的弱光照培養，光照強度為500～700lx，然后在進行常規光照培養，光照強度為1500～2000lx，培養溫度為24～26℃，光照時間為13h/d；所述誘導培養基為：1/2MS+0.4～0.8mg/L?6?BA+0.05～0.08mg/L?NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L瓊脂+10～15％椰汁+490～510mg/L檸檬酸+5～7g/L?PVP，pH值為5.4～5.5；(5)超聲波處理：將誘導出的原球莖放在頻率為25kHz的超聲波中處理3～4min；(6)增殖培養：超聲波處理后轉移至增殖培養基中繼續培養，所述增殖培養基為：1/2MS+1～2mg/L?6?BA+0.4～0.6mg/L?NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L瓊脂+10～15％椰汁+490～510mg/L檸檬酸+2～4g/L?PVP，pH值為5.4～5.5；培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(7)生根培養：增殖培養后，轉入生根培養基中培養，所述生根培養基為：1/2MS+0.1～0.3mg/L?NAA+140～160g/L香蕉泥+90～110mg/L檸檬酸+28～32g/L食糖+5～9g/L瓊脂，pH為5.4～5.5，培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(8)壯苗培養：選擇高3cm以上的無菌苗轉入壯苗培養基中培養，所述壯苗培養基為：1/2MS+0.3～0.7mg/L?6?BA+0.1～0.2mg/L?GA3+10～20g/L蔗糖+10～20mg/L葡萄糖+190～200g/L香蕉泥+4～6g/L瓊脂，pH為5.4～5.5，培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(9)移栽：當試管苗生長至5～7cm高，葉2～3片時，將試管苗放在自然光下煉苗5～7天，打開瓶蓋煉苗1～2天；然后取出培養苗，用清水洗凈附著在根部的培養基，清洗時注意不要損害根部，然后移栽至培養基質中，保持濕度和通風，空氣濕度為75～85％，溫度為20～25℃。...

【技術特征摘要】
1.一種卡特蘭快速培養繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)材料選取：選取無病蟲害長勢良好的卡特蘭植株，進行5～8d的遮光處理，遮光處理后，選取長勢健壯植株上的新芽作為外植體；(2)外植體預處理：用抗氧化劑溶液洗滌剛切割的外植體花芽傷口表面；(3)外植體消毒：用軟刷毛將選取的外植體花芽在水池中進行初步清洗，去除表面的泥沙，然后用洗潔精清洗干凈，置于流水下沖洗30min，然后在超凈臺上剝除外植體花芽最外面的一層苞葉，在經高溫滅菌過的75％酒精中浸泡1～2s，然后在浸泡在10％的次氯酸鈉溶液中初次消毒10min，初次消毒后，用無菌水沖洗5遍，再剝去一層苞葉，放入5％的次氯酸鈉溶液中再次消毒5min，接著采用重復消毒的方式，每次次氯酸鈉的濃度為上次消毒的一半，消毒時間也為上次消毒的一半，直至剝至留下最后的芽體，最后切取5mm左右的芽尖，泡在0.5％的次氯酸鈉溶液中消毒1min，用無菌水沖洗6～8次，用消毒濾紙吸干表面水分后放置于培養皿中備用；(4)誘導培養：將消毒后的外植體，接種在誘導培養基中進行培養，先進行7～10d的弱光照培養，光照強度為500～700lx，然后在進行常規光照培養，光照強度為1500～2000lx，培養溫度為24～26℃，光照時間為13h/d；所述誘導培養基為：1/2MS+0.4～0.8mg/L 6-BA+0.05～0.08mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L瓊脂+10～15％椰汁+490～510mg/L檸檬酸+5～7g/L PVP，pH值為5.4～5.5；(5)超聲波處理：將誘導出的原球莖放在頻率為25kHz的超聲波中處理3～4min；(6)增殖培養：超聲波處理后轉移至增殖培養基中繼續培養，所述增殖培養基為：1/2MS+1～2mg/L 6-BA+0.4～0.6mg/L NAA+10～15g/L蔗糖+6～8g/L瓊脂+10～15％椰汁+490～510mg/L檸檬酸+2～4g/L PVP，pH值為5.4～5.5；培養溫度25～28℃，光照時間為13h/d，光照強度為1500～2000lx；(7)生根培養：增殖培養后，轉入生根培養基中培養，所述生根培養基為：1/2MS+0.1～0.3mg/L NAA+140～160g/L香蕉泥+90～1...

【專利技術屬性】
技術研發人員：茍興明，劉若東，
申請(專利權)人：成都東山蘭韻農業有限公司，
類型：發明
國別省市：四川;51