一種西紅花酸衍生物GX-D及其制備方法、以及在預(yù)防或治療心腦血管疾病中的應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種西紅花酸酰胺GX?D及其制備方法，其制備方法包括下列步驟：1)取西紅花酸、EDCl(1?乙基?(3?二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽)、HOBt(1?羥基苯并三唑)于反應(yīng)瓶中；冰浴條件下，加入Et3N、CH2Cl2，再加入有機(jī)胺類化合物，在0℃下反應(yīng)2?8小時(shí)，室溫過(guò)夜；2)反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)；將反應(yīng)液過(guò)濾，除去溶劑，加入EA溶解，洗滌；除去溶劑后，得到粗品；3)將粗品用硅膠柱進(jìn)行分離，洗脫，得到產(chǎn)物；本發(fā)明專利技術(shù)涉及的西紅花酰胺衍生物GX?B克服了西紅花酸脂溶極低導(dǎo)致的生物利用度低的問(wèn)題，可以制備成片劑、緩釋片劑、顆粒劑、混懸劑等口服制劑用于預(yù)防或治療心腦血管疾病，臨床應(yīng)用廣泛。

A GX D crocetin derivatives and preparation method thereof, and in the prevention or treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases in the application

The invention relates to a GX D Crocetins amide and a preparation method thereof. The preparation method comprises the following steps: 1) and EDCl (1 Crocetins, ethyl (3 two methyl amino propyl) two carbonyl imine hydrochloride), HOBt (1 hydroxyl benzene and three triazole) into the reaction bottle; the ice bath condition, adding Et3N, CH2Cl2, adding organic amine compounds, the reaction of 2 8 hours, under the temperature of 0 DEG C at room temperature overnight; 2) after the complete reaction, stop the reaction; filtering, reaction liquid to remove the solvent, adding EA solution, washing; after removal of the solvent to obtain a crude product; 3) will the crude product was separated by silica gel column, eluting to obtain the product; the invention relates to the amide derivatives of GX saffron Crocetins B overcomes the problem of low fat soluble lead to very low bioavailability, can be prepared into tablets, sustained-release tablets, granules, oral suspension preparation It is widely used in the prevention and treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種新的西紅花酸衍生物，具體涉及西紅花酸的可藥用酰胺及其制備方法，以及該衍生物在預(yù)防和治療心腦血管疾病中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
西紅花(Crocus sativus L.)又稱藏紅花，是鳶尾科番紅花屬植物番紅花Crocus sativus L.的干燥柱頭。西紅花是一種名貴的中藥材，在治療或預(yù)防心腦血管疾病，以及腫瘤、炎癥、疼痛抑制及對(duì)肝臟、腎臟、神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用等方面臨床應(yīng)用廣泛，且療效顯著。西紅花的主要藥效物質(zhì)包括西紅花酸、藏紅花素、西紅花酸二甲酯、西紅花苦素等，此外還含有桉腦、蒎烯、多種維生素。國(guó)內(nèi)外現(xiàn)代研究表明，西紅花酸(crocetin)是西紅花在體內(nèi)發(fā)揮心腦血管療效的主要活性組分。西紅花酸具有多不飽和共軛烯酸結(jié)構(gòu)，屬類胡蘿卜素物質(zhì)，在抗心血管系統(tǒng)疾病、抗氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化、防治糖尿病并發(fā)癥等方面有明確的生物活性。近年來(lái)，西紅花酸在心血管系統(tǒng)疾病中的防治作用成為許多學(xué)者的研究熱點(diǎn)，大量研究成果也表明西紅花酸具有很好的心血管保護(hù)作用，且其作用是多靶點(diǎn)、多途徑的。這些研究成果預(yù)示著西紅花酸有良好的開發(fā)前景，很有希望開發(fā)成為新型的防治心血管系統(tǒng)疾病的藥物，值得深入研究。然而，西紅花酸的脂溶性和水溶性較差，極難溶于水以及除吡啶和與吡啶相似的有機(jī)堿以外的常用有機(jī)溶劑，難以達(dá)到較高的藥物濃度及給藥劑量，另外，由于藥物脂溶性較高才能容易被胃腸道上皮細(xì)胞黏膜所吸收，而西紅花酸由于其脂溶性極差，從而造成生物利用度低，臨床應(yīng)用受到極大的限制。同時(shí)，通過(guò)西紅花酸衍生物解決溶解性問(wèn)題，仍有許多技術(shù)難點(diǎn)，比如衍生物結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，活性降低等問(wèn)題。為此，本研究以西紅花酸為基礎(chǔ)進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，以期獲得到溶解性較好，且心腦血管活性與西紅花酸本體相當(dāng)?shù)男滤幭葘?dǎo)化合物。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)目的在于提供一種西紅花酸酰胺類衍生物以及其制備方法與用途。本專利技術(shù)的技術(shù)方案如下：一種西紅花酸酰胺GX-D，其結(jié)構(gòu)式如下所示：一種制備西紅花酸酰胺類衍生物GX-D的方法，包括下列步驟：(1)取西紅花酸、EDCl(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽)、HOBt(1-羥基苯并三唑)于反應(yīng)瓶中；冰浴條件下，加入Et3N、CH2Cl2，再加入有機(jī)胺類化合物，在0℃下反應(yīng)2-8小時(shí)，室溫過(guò)夜；(2)反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)；將反應(yīng)液過(guò)濾，除去溶劑，加入EA溶解，洗滌；除去溶劑后，得到粗品；(3)將粗品用硅膠柱進(jìn)行分離，洗脫，得到產(chǎn)物。具體地，步驟(1)中有機(jī)胺類化合物為哌啶。具體地，步驟(1)中反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選為4小時(shí)。具體地，步驟(1)中反應(yīng)的西紅花酸與哌啶的摩爾比為1∶1-1∶8。優(yōu)選地，步驟(1)中反應(yīng)的西紅花酸與哌啶的摩爾比為1∶2。具體地，步驟(2)反應(yīng)中的洗滌方法為：依次用鹽酸、碳酸氫鈉、水洗滌，分別洗滌2-5次。優(yōu)選地，步驟(2)反應(yīng)中的洗滌方法為：依次用鹽酸、碳酸氫鈉、水洗滌，分別洗滌3次。具體地，步驟(3)中洗脫的方法為：先用CHCl3洗脫，再用CHCl3∶CH3OH＝10∶1進(jìn)行洗脫。目前，西紅花酸存在脂溶性極低的問(wèn)題，0.1g西紅花酸不溶于1000ml乙醇、氯仿-乙醇等有機(jī)溶劑，導(dǎo)致西紅花酸生物利用度極低，臨床應(yīng)用受限。西紅花酸GX-1結(jié)構(gòu)如下所示：本專利技術(shù)通過(guò)篩選大量的西紅花酸衍生物，用以解決西紅花酸脂溶性低導(dǎo)致的生物利用度降低的問(wèn)題。本專利技術(shù)合成了一系列西紅花酸衍生物，如GX-M、GX-N等。西紅花酸酰胺GX-M，其結(jié)構(gòu)式如下所示：西紅花酸酰胺GX-N，其結(jié)構(gòu)式如下所示：本專利技術(shù)涉及的西紅花酸酰胺衍生物GX-D，與同類西紅花酸衍生物GX-M、GX-N相比，在相同藥物濃度下，通過(guò)線粒體活性試劑檢測(cè)，GX-D活性明顯優(yōu)于GX-M、GX-N，對(duì)缺氧小室誘導(dǎo)H9c2心肌細(xì)胞缺氧損傷有明顯的保護(hù)作用，可以有效預(yù)防或治療心腦血管疾病。本專利技術(shù)涉及的西紅花酸酰胺衍生物GX-D，脂溶性也遠(yuǎn)高于西紅花酸GX-1，更容易被胃腸道上皮細(xì)胞黏膜所吸收，生物利用度相比于西紅花酸而言得到極大提升。本專利技術(shù)涉及的西紅花酰胺衍生物GX-D通過(guò)細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)證明該化合物安全有效，GX-D脂溶性提升的同時(shí)生物活性并沒(méi)有降低，甚至與西紅花酸一致，同時(shí)克服了西紅花酸脂溶極低導(dǎo)致的生物利用度低的問(wèn)題，GX-D可以制備成片劑、緩釋片劑、顆粒劑、混懸劑、滴丸、注射劑等劑型用于預(yù)防或治療心腦血管疾病，其臨床應(yīng)用更為廣泛。附圖說(shuō)明圖1、GX-D的高分辨MS圖譜：GX-D C28H42N2O2 Found：[M+H]+463.3313Calcd：[M+H]+463.3319(1.31ppm)圖2、GX-D的高分辨NMR圖譜：GX-D：1H NMR spectrum圖3、GX-D的高分辨NMR圖譜：GX-D：13C NMR spectrum具體實(shí)施例實(shí)施例1制備西紅花酸衍生物GX-D取GX-1(購(gòu)自于Sigma公司)(0.5mmol，164mg)，EDCI(1.25mmol，239mg)，HOBt(1.25mmol，169mg)于100ml反應(yīng)瓶。在冰浴條件下，加入Et3N(1.25mmol，172μl)及CH2Cl220ml，最后加入哌啶(1.0mmol)，在0℃條件下反應(yīng)4h，然后室溫反應(yīng)過(guò)夜。利用TLC和LC-MS檢測(cè)產(chǎn)物是否生成，確定反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)。將反應(yīng)液過(guò)濾，真空除去溶劑，加入10ml EA溶解，依次用2％HCl，5％NaHCO3，H2O各10ml分別洗滌3次，最后真空除去溶劑得到粗品。將得到的粗產(chǎn)物GX-D用硅膠柱進(jìn)行分離，先兩個(gè)柱體積的CHCl3進(jìn)行洗脫，然后加大洗脫劑極性CHCl3∶CH3OH＝10∶1進(jìn)行洗脫。最終得到產(chǎn)物GX-D，并用NMR表征其結(jié)構(gòu)，得到黃色粉末，產(chǎn)率：69％。實(shí)施例2：制備西紅花酸衍生物GX-M：分別取西紅花酸GX-1(購(gòu)自于Sigma公司)(0.5mmol，164mg)，EDCI(1.25mmol，239mg)，HOBt(1.25mmol，169mg)于25ml反應(yīng)瓶。在冰浴條件下，加入Et3N(2.5mmol，350μl)及CH2Cl220ml，最后加入4-氟苯甲胺(1.1mmol，125μl)，在0℃條件下反應(yīng)4h，然后室溫反應(yīng)過(guò)夜。利用TCL和LC-MS檢測(cè)產(chǎn)物是否生成，確定反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)。將反應(yīng)液過(guò)濾，真空除去溶劑，加入10ml EA溶解，依次用2％HCl，5％NaHCO3，H2O各10ml分別洗滌3次，最后真空除去溶劑EA得到粗品。將得到的粗產(chǎn)物用硅膠柱進(jìn)行分離，用三個(gè)柱體積的CHCl3進(jìn)行洗脫。得到產(chǎn)物GX-M粗品，然后再次硅膠柱分離，用兩個(gè)柱體積的溶劑(石油醚∶乙酸乙酯＝20∶1)進(jìn)行洗脫，最終得到產(chǎn)物GX-M，并用NMR表征其結(jié)構(gòu)，產(chǎn)率：75％。實(shí)施例3：制備西紅花酸衍生物GX-N：分別取西紅花酸GX-1(購(gòu)自于Sigma公司)(0.5mmol，164mg)，EDCI(1.25mmol，239mg)，HOBt(1.25mmol，169mg)于25ml反應(yīng)瓶。在冰浴條件下，加入Et3N(2.5mmol，350μl)及CH2Cl220ml，最后加入3，5-二氟芐胺(1.1mmol，130μl)，在0℃條件下反應(yīng)4h，然后室溫反應(yīng)過(guò)夜。利用TCL和LC-MS檢測(cè)產(chǎn)物是否生成，確定反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)。將反應(yīng)本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種西紅花酸酰胺GX?D，其結(jié)構(gòu)式為：

【技術(shù)特征摘要】
1.一種西紅花酸酰胺GX-D，其結(jié)構(gòu)式為：2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的西紅花酸酰胺GX-D，其特征在于，其制備方法包括以下步驟：1)取西紅花酸、EDC1(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽)、HOBt(1-羥基苯并三唑)于反應(yīng)瓶中；冰浴條件下，加入Et3N、CH2Cl2，再加入有機(jī)胺類化合物，在0℃下反應(yīng)2-8小時(shí)，室溫過(guò)夜；2)反應(yīng)完全后，停止反應(yīng)；將反應(yīng)液過(guò)濾，除去溶劑，加入EA溶解，洗滌；除去溶劑后，得到粗品；3)將粗品用硅膠柱進(jìn)行分離，洗脫，得到產(chǎn)物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的西紅花酸酰胺GX-D，其特征在于，所述制備方法步驟1)中有機(jī)胺類化合物為哌啶。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的西紅花酸酰胺GX-D，其特征在于，所述制備方法步驟1)中反應(yīng)時(shí)間為4小時(shí)。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的西紅花酸酰胺GX-D，其特征在于，所述...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陸文岐，姜志宏，尚強(qiáng)，高進(jìn)，孔祥生，張潤(rùn)容，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：廣東;44