本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)提供了一種在肉雞初級(jí)生產(chǎn)階段彎曲菌的減除方法，能安全有效的降低雞肉體內(nèi)彎曲菌數(shù)量且不影響肉雞生產(chǎn)。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)利用蘋(píng)果酸對(duì)肉雞出欄前飲水進(jìn)行處理。蘋(píng)果酸添加入肉雞日常飲水中。最佳抑菌條件為：所述蘋(píng)果酸濃度為0.075％、飼喂方式為肉雞出欄前飲水中持續(xù)添加1周。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)的方法使飼喂丙酸后的肉雞泄殖腔彎曲菌數(shù)量達(dá)到較低水平，同時(shí)不影響肉雞的腸道健康、生產(chǎn)性能及肉品質(zhì)。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)較傳統(tǒng)的飼喂抗生素防治方法更安全，更高效，且對(duì)肉雞生產(chǎn)的影響較小。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)屬于養(yǎng)殖場(chǎng)減除細(xì)菌的技術(shù)，特別是飼養(yǎng)過(guò)程中肉雞彎曲菌攜帶量的減除方法。
技術(shù)介紹
彎曲菌(Campylobacter)，一種革蘭陰性菌，是全世界細(xì)菌性腹瀉病的主要誘因之一。特定血清型的彎曲菌還可作為格林-巴利綜合癥(Guillain-Barré syndrome,GBS)的前驅(qū)因子，對(duì)健康造成嚴(yán)重?fù)p害。歐盟2009年內(nèi)報(bào)道了2017711例彎曲菌相關(guān)病例，而2013年增加到了214779例。與2006-2008年期間的數(shù)據(jù)相比，2014年美國(guó)該病原菌相關(guān)病例數(shù)量上升了13％。彎曲菌普遍分布于環(huán)境中，且定植的原始部位是盲腸和小腸。被污染的禽肉是該腸道病原菌的主要來(lái)源，肉雞是該病原菌的天然宿主，被感染后其消化道內(nèi)可攜帶大量彎曲菌，尤其在盲腸中的數(shù)量極為龐大，高達(dá)106-108CFU/g。養(yǎng)殖過(guò)程中肉雞的彎曲菌腸道定植是后續(xù)胴體加工過(guò)程中彎曲菌交叉污染的主要原因，使彎曲菌通過(guò)禽肉生產(chǎn)鏈傳播至零售環(huán)節(jié)成為可能。研究表明，通過(guò)在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)減少?gòu)澢谌怆u體內(nèi)的定植可以降低彎曲菌通過(guò)食物鏈傳播至人類(lèi)的風(fēng)險(xiǎn)，從而減少?gòu)澢±陌l(fā)生，對(duì)社會(huì)公共衛(wèi)生具有重要意義。飼喂抗菌劑是降低肉雞體內(nèi)彎曲菌數(shù)量傳統(tǒng)而有效的措施，主要抗菌劑有抗生素、微生物制劑、植物天然提取物及有機(jī)酸等。但抗生素的使用存在引發(fā)菌株耐藥性和藥物殘留等安全隱患。據(jù)EFSA報(bào)道，從人類(lèi)病例中獲得的彎曲菌分離株對(duì)臨床常見(jiàn)抗生素具有高耐藥性。此外，來(lái)自食物及野雞、雞肉、豬和牛等動(dòng)物源性的彎曲菌分離株對(duì)于喹諾酮類(lèi)藥物的抗性極高。為此歐盟和美國(guó)已禁止以非治療性目的在動(dòng)物飼料中添加抗生素。所以我們要尋找更安全有效 的減菌措施來(lái)替代目前并不完善的防控措施。在眾多抗生素替代產(chǎn)品中，有機(jī)酸以其廣譜性抑菌、天然無(wú)公害等優(yōu)勢(shì)吸引了研究者們的注意，已有文獻(xiàn)證實(shí)有機(jī)酸作為飲水或飼料添加劑可以減少肉雞彎曲菌及其他腸道病原菌的攜帶量，但也有研究表明，在日糧中添加有機(jī)酸后肉雞的腸道生長(zhǎng)、生產(chǎn)性能和肉品質(zhì)會(huì)受到顯著影響。消化器官生長(zhǎng)發(fā)育的好壞決定著動(dòng)物的生長(zhǎng)快慢和健康，有機(jī)酸主要作用于家禽腸道，通常通過(guò)測(cè)定腸道的重量、長(zhǎng)度及pH來(lái)評(píng)價(jià)其對(duì)消化器官的影響。評(píng)價(jià)肉雞生產(chǎn)性能的指標(biāo)主要有體重、平均日增重。GB102212-88規(guī)定了肉是由水分，蛋白質(zhì)，脂肪，維生素及其他微量物質(zhì)組成的復(fù)雜生物系統(tǒng)，肌肉中各種物質(zhì)的種類(lèi)、數(shù)量及其組成方式是肉品質(zhì)的決定因素。因此測(cè)定肌肉常規(guī)成分可用于評(píng)價(jià)雞肉口感與營(yíng)養(yǎng)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)目的在于提供一種應(yīng)用低濃度蘋(píng)果酸在肉雞初階生產(chǎn)過(guò)程中彎曲菌的減除方法，能安全有效的降低肉雞體內(nèi)彎曲菌數(shù)量且影響肉雞腸道、生產(chǎn)性能及肉品質(zhì)。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專(zhuān)利技術(shù)采用以下技術(shù)方案：一種肉雞生產(chǎn)初級(jí)階段彎曲菌的減菌方法，利用蘋(píng)果酸對(duì)肉雞出欄前飲水進(jìn)行處理，將飲水的pH調(diào)整至3.6～4.0。飲水pH為4.0(蘋(píng)果酸終濃度為0.075％)。上述方法具體步驟為：將蘋(píng)果酸溶于無(wú)菌蒸餾水中配制成母液，添加于肉雞飲水中。優(yōu)選地，飲水pH為4.0，所述蘋(píng)果酸在飲水中的最終質(zhì)量濃度為0.075％、酸化飲水飼喂時(shí)間為出欄前1～3周。本專(zhuān)利技術(shù)還公開(kāi)了蘋(píng)果酸在制備肉雞初階生產(chǎn)過(guò)程中彎曲菌的減菌劑中的應(yīng)用。所述應(yīng)用具體是：在肉雞出欄前飲水中添加蘋(píng)果酸，將飲水的pH調(diào)整至3.6～4.0。 優(yōu)選地，上述應(yīng)用中所述蘋(píng)果酸的質(zhì)量濃度為0.075％，肉雞初階生產(chǎn)過(guò)程是指肉雞出欄前1～3周。本專(zhuān)利技術(shù)的有益效果是：本專(zhuān)利技術(shù)的方法使飲用蘋(píng)果酸的肉雞彎曲菌攜帶量達(dá)到較低水平，同時(shí)不影響雞的腸道健康、生產(chǎn)性能及肉品質(zhì)。本專(zhuān)利技術(shù)較傳統(tǒng)的防控方法更安全，更高效，且對(duì)肉雞生產(chǎn)的影響較小。由于有機(jī)酸具有一定腐蝕性，過(guò)量添加可能影響飼料及飲水的適口性，降低采食及飲水量，本專(zhuān)利技術(shù)所使用的蘋(píng)果酸濃度較低，酸度范圍合理，能夠在有效降低肉雞腸道彎曲菌載量的同時(shí)對(duì)肉雞的生產(chǎn)性能不造成不利影響。另外，由于彎曲菌病是人獸共患病，處理或食用污染的雞肉產(chǎn)品及其交叉污染物，是人感染彎曲菌的最重要途徑，同時(shí)雞攜帶彎曲菌的比例可達(dá)100％，而且雞腸道內(nèi)容物的含菌量可達(dá)109/克。本專(zhuān)利技術(shù)是專(zhuān)門(mén)針對(duì)肉雞初級(jí)生產(chǎn)階段，開(kāi)展如何降低腸道彎曲菌攜帶量做的一系列研究，意在研發(fā)出針對(duì)于彎曲菌的最佳抑菌條件，旨在有效的降低肉雞彎曲菌攜帶量，這不同于傳統(tǒng)的抗菌劑治療方法。附圖說(shuō)明圖1是不同質(zhì)量濃度蘋(píng)果酸對(duì)彎曲菌抑制效率的比較；圖2是與蘋(píng)果酸共培養(yǎng)20h后彎曲菌的掃描電鏡圖片；圖3是蘋(píng)果酸對(duì)彎曲菌蛋白質(zhì)外泄的影響；圖4是蘋(píng)果酸對(duì)彎曲菌核酸滲漏的影響；圖5是蘋(píng)果酸對(duì)肉雞增重的影響。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本專(zhuān)利技術(shù)作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1體外致死臨界濃度的篩選首先對(duì)0.05％、0.10％、0.15％三個(gè)質(zhì)量濃度的蘋(píng)果酸對(duì)彎曲菌的抑制效率 進(jìn)行比較。將培養(yǎng)狀態(tài)相同的彎曲菌與不同質(zhì)量濃度的蘋(píng)果酸42℃共培養(yǎng)30h，彎曲菌起始濃度為5×107CFU/mL，每10h平板計(jì)數(shù)一次，繪制添加各濃度蘋(píng)果酸后空腸彎曲菌11168菌株的生長(zhǎng)曲線。結(jié)果表明，0.05％、0.1％、0.15％三個(gè)質(zhì)量濃度的蘋(píng)果酸中，在30h內(nèi)可將對(duì)空腸彎曲菌11168菌株濃度降低至不可檢測(cè)水平的只有0.15％質(zhì)量濃度的蘋(píng)果酸(見(jiàn)圖1)。實(shí)施例2實(shí)際應(yīng)用為了判斷方案的可行性，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)肉雞進(jìn)行試驗(yàn)以驗(yàn)證蘋(píng)果酸對(duì)肉雞腸道中彎曲菌的作用效果。按商品肉雞的飼養(yǎng)要求控制環(huán)境溫度及濕度，入雛前1周，熏蒸消毒并將雞籠及用具全部沖洗干凈，全程定期消毒。采用籠養(yǎng)方式，通過(guò)塑料飲水器供水，自由釆食、飲水。飼養(yǎng)期間各組免疫程序相同。選用個(gè)體差異相對(duì)較小的5周齡肉雞60只，隨機(jī)分成三個(gè)組，蘋(píng)果酸組、酒石酸組和對(duì)照組。兩個(gè)處理組分別用蘋(píng)果酸、酒石酸將肉雞日常飲用水pH調(diào)為4.0(蘋(píng)果酸質(zhì)量濃度為0.075％，酒石酸的質(zhì)量濃度為0.059％)；對(duì)照組則供應(yīng)養(yǎng)殖場(chǎng)日常飲水。有機(jī)酸飼喂3周，于有機(jī)酸飼喂當(dāng)天及飼喂后的第1、2、3周采集各組肉雞肛拭樣品測(cè)定彎曲菌陽(yáng)性率、攜帶量及腸道微生物菌落總數(shù)。由表1和表2可知，蘋(píng)果酸和酒石酸對(duì)肉雞彎曲菌攜帶率無(wú)影響，但應(yīng)用1周時(shí)蘋(píng)果酸可使彎曲菌數(shù)量顯著降低0.41個(gè)數(shù)量級(jí)(P＝0.0139)，抑菌率為61.10％；而酒石酸組與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。由表3可知，蘋(píng)果酸和酒石酸應(yīng)用各周對(duì)肉雞腸道微生物區(qū)系無(wú)顯著影響(P>0.05)。表明飼喂0.075％蘋(píng)果酸不會(huì)影響肉雞腸道微生態(tài)平衡，且可有效降低彎曲菌的攜帶量。表1肉雞泄殖腔彎曲菌陽(yáng)性率計(jì)算結(jié)果(％)表2肉雞泄殖腔彎曲菌攜帶量測(cè)定結(jié)果(log10CFU/g)表3肉雞腸道菌落總數(shù)測(cè)定結(jié)果(log10CFU/g)實(shí)施例3對(duì)彎曲菌影響的測(cè)定應(yīng)用掃描電鏡(SEM)對(duì)蘋(píng)果酸組彎曲菌的細(xì)胞壁進(jìn)行觀察，具體操作方法如下：取800μL MH液體培養(yǎng)基，、加入100μL 1.5％(w/v)的蘋(píng)果酸，以100μL的MH液體培養(yǎng)基代替作為對(duì)照。在CCDA固體培養(yǎng)基上復(fù)蘇細(xì)菌，于42℃微需氧條件下培養(yǎng)24h后用MH液體培養(yǎng)基收獲細(xì)菌，并用MH培養(yǎng)基調(diào)整彎曲菌的接種濃度為5×108CFU/mL。向配制好的有機(jī)酸溶液中加入稀釋好的菌液100μL。42℃搖床，120rpm微需氧條件下培養(yǎng)。于20h取菌懸液做為待測(cè)樣品，保證兩實(shí)驗(yàn)組同時(shí)進(jìn)行。4℃，500本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種應(yīng)用蘋(píng)果酸在肉雞初階生產(chǎn)過(guò)程中彎曲菌的減除方法，其特征在于：用蘋(píng)果酸對(duì)肉雞出欄前飲水進(jìn)行處理。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種應(yīng)用蘋(píng)果酸在肉雞初階生產(chǎn)過(guò)程中彎曲菌的減除方法，其特征在于：用蘋(píng)果酸對(duì)肉雞出欄前飲水進(jìn)行處理。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：在肉雞出欄前飲水中添加蘋(píng)果酸，將其pH調(diào)整至3.6～4.0。3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：處理后飲水的pH值為4.0，蘋(píng)果酸的終質(zhì)量濃度為0.075％。4.如權(quán)利要求2所述的方法，...
【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：焦新安，黃金林，楊文彬，孫林，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：揚(yáng)州大學(xué)，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：江蘇;32
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