益母草堿代謝物及其制備方法技術

本發明專利技術屬藥物合成領域，具體涉及益母草堿主要代謝物及其制備方法。本發明專利技術以葡糖糖醛酸內酯，4-氨基丁醇，丁香酸為起始原料，經過多步反應，合成得到式(1)結構的益母草堿與葡萄糖醛酸結合的主要代謝物。本發明專利技術制得的新化學結構的益母草堿與葡萄糖醛酸結合的益母草堿主要代謝物化合物，具有良好的藥理活性前景，可用于進一步藥理活性評價，本發明專利技術的方法具有合成路線簡單，易于控制，原料廉價易得，產物自身穩定性好等優點。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬藥物合成領域，涉及益母草堿代謝物，具體涉及益母草堿主要代謝物及其制備方法。本專利技術以葡糖糖醛酸內酯，4-氨基丁醇，丁香酸為起始原料，經過多步反應，合成得到益母草堿與葡萄糖醛酸結合的主要代謝物。
技術介紹
現有技術公開了益母草堿作為國家I類新藥候選藥物被研究開發，且經藥理研究表明其具有良好的心肌保護作用。有關藥代動力學研究表明益母草堿在體內迅速與葡萄糖醛酸結合被代謝為益母草堿葡萄糖醛酸復合物。隨著本領域研究者對益母草堿研究的深入，其代謝物的藥理活性及作用機理等引起研究者的關注。迄今，尚未見有關益母草堿主要代謝物及其制備方法和活性等的研究報道。本申請的專利技術人擬提供益母草堿代謝物及其制備方法，并通過動物實驗研究益母草堿其主要代謝物對藥物整體的治療效果以及副作用的影響。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供益母草堿代謝物及其制備方法，具體涉及益母草堿與葡萄糖醛酸結合的主要代謝物及其制備方法。本專利技術的進一步目的是提供益母草堿主要代謝物其體內的藥理活性及作用機理，了解其對藥物整體的治療效果以及副作用的影響。本專利技術以葡糖糖醛酸內酯，4-氨基丁醇，丁香酸為起始原料，經過多步反應，合成獲得益母草堿與葡萄糖醛酸結合的益母草堿主要代謝物及其合成方法。本專利技術的制備方法操作性強，反應條件簡單，易于控制，制得的益母草堿主要代謝物可用于進一步藥理活性評價。具體的，本專利技術所述的益母草堿主要代謝物，具有式(1)的結構，本專利技術所述的益母草堿主要代謝物通過下述反應式(I)，(II)制備：反應式(I)：其中采用試劑：(i)MeOH,NaOH；(ii)HClO4,Ac2O；(iii)0℃，HBr/MeOH(1:2)，N2反應式(II)：其中采用試劑：(iv)N,N-二叔丁羰基-S-異硫脲，DMF；(v)Et3N,AcOH,DCM；(vi)DIC,DPTS,DMAP；(vii)MeONa,DCM；(viii)K2CO3aq,DBAB,HBr/AcOH(1:2)(ix)TFA,DCM；(x)guanidine,DCM/EtOH(1:9)；上述反應式(I)中，以葡萄糖醛酸內酯為原料，通過XX反應，葡萄糖醛酸甲酯的乙酰化，Br取代反應，合成得到化合物4.上述反應式(II)中，以4-氨基丁醇，丁香酸，中間體2為原料，通過胺的取代，酚羥基的乙?；?，酯縮合，酯的堿水解，鹵取代，強酸以及堿性條件下脫除保護基，得到結構式(1)的益母草堿主要代謝物。更具體的，本專利技術的制備益母草堿主要代謝物的方法，其包括步驟；i:將葡萄糖醛酸內酯，氫氧化鈉加入到甲醇中，攪拌溶解；待完全溶解后，繼續攪
拌1h，反應液呈黃色透明狀，減壓蒸出全部的甲醇，得到葡萄糖醛酸甲酯；ⅱ：將葡萄糖醛酸甲酯溶于乙酸酐溶液后，滴加高氯酸與乙酸酐的混合液攪拌過夜，柱層析后得到化合物3(2S,3R,4S,5S,6S)-6-(甲氧甲酰基)四氫-2H-吡喃-2,3,4,5-四-乙?；?四-乙酯；iii:向(2S,3R,4S,5S,6S)-6-(甲氧甲酰基)四氫-2H-吡喃-2,3,4,5-四-乙?；?四-乙酯在氮氣保護下加入33％的HBr乙酸溶液0℃下反應4h，得到化合物4：(2S,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧甲酰基)四氫-2H-吡喃-3,4,5-三-乙?；?三乙酯；iv:4-氨基-1-丁醇與N.N-二叔丁羰基-S-甲基異硫脲溶于DMF，攪拌過夜后，水洗反應液，二氯甲烷萃取，合并有機相，蒸干溶劑，得化合物5；v:二氯甲烷中，加入三乙胺與醋酸酐，反應5h后，蒸干溶劑，加入鹽酸溶液調節PH,析出白色晶體，得化合物6；vi:化合物5與化合物6溶于二氯甲烷中，加入DPTS與DIC,攪拌過夜，柱層析得化合物7；vii:化合物7溶于無水二氯甲烷中，加入甲醇鈉，攪拌過夜后，鹽酸調節PH，二氯甲烷萃取，合并有機相，蒸干溶劑，得化合物8；viii:化合物8與化合物4溶于三氯甲烷后，加入催化劑TBAB與0.2mol/L K2C03溶液，攪拌24h后柱層析，得化合物9；ⅸ：化合物9溶于三氟乙酸：二氯甲烷＝1：1混合溶液中，反應12h后，加入飽和碳酸氫鈉溶液，二氯甲烷萃取，合并有機相，蒸干溶劑，得化合物10；ⅹ：化合物10溶于二氯甲烷/甲醇(1:9)混合溶液，加入胍乙醇溶液，有黃色固體析出，柱層析后得式(1)結構的益母草堿主要代謝物。本專利技術進一步通過動物實驗證實所述的益母草堿其主要代謝物在大鼠體內對藥物整體的治療效果以及副作用有至關重要的作用，同時實驗數據顯示所述的益母草堿主要代謝物存在較好的藥理活性。本專利技術與已有技術相比具有如下效果：制得新的化學結構的益母草堿與葡萄糖醛酸結合的益母草堿主要代謝物化合物，具有良好的藥理活性前景，且本專利技術的方法具有合成路線簡單，易于控制，原料廉價易得，產物自身穩定性好等優點。具體實施方式實施例1合成(2S,3S,4S,5R,6R)-1-甲基-3,4,5,6-四-羥基-四氫-2H-吡喃-2-甲酯在250mL燒瓶中加入甲醇100mL、氫氧化鈉0.4g(O.01mmol)，攪拌溶解，加人17.6g(0.1mmol)葡醛酸內酯，室溫下攪拌，期間加入少量氫氧化鈉，保持反應液pH>8，共加入氫氧化鈉約0.6g，待原料溶解完全后，繼續攪拌1h，反應液呈黃色透明狀，減壓蒸出全部的甲醇，得黃色糖漿狀粘稠物16.8g,收率100％。實施例2合成(2S,3R,4S,5S,6S)-6-(甲氧甲酰基)四氫-2H-吡喃-2,3,4,5-四-乙?；?四-乙酯在250mL燒瓶中，加入60mL(0.6mo1)乙酸酐，11g(0.05mo1)化合物2，溶解后，滴加高氯酸與乙酸酐的混合液(高氯酸0.3mL，乙酸酐10mL)，控制滴加速度，使反應液溫度不超過40℃，滴加完后，反應攪拌過夜，PE:EA＝3:1體系，硅膠柱層析分離，得白色固體14.1g，收率86％。實施例3合成化合物415g(0.04mol)(2S,3R,4S,5S,6S)-6-(甲氧甲酰基)四氫-2H-吡喃-2,3,4,5-四-乙?；?四-乙酯在氮氣保護條件下溶于33％HBr醋酸溶液(20mL),0℃下攪拌4h后，加入100mL二氯甲烷，分別用冰水與飽和碳酸氫鈉洗滌5次，合并有機層，加入無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得(2S,3R,4S,5S,6S)-2-溴-6-(甲氧甲酰基)四氫-2H-吡喃-3,4,5-三-乙?；?三乙酯(化合物3)，收率100％。實施例4 4-氨基丁醇反應生成化合物58.9g(0.1mol)4-氨基丁醇與29g(0.1mol)N,N-二叔丁羰基-S-甲基異硫脲溶于50mL N,N-二甲基甲酰胺溶液中，攪拌過夜后，加入大量的水洗滌反應液5次，加入二氯甲烷萃取，合并有機相后，加入無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑后得化合物3去24g，收率XXX。實施例5合成乙?；∠闼?丁香酸19.8g(0.1mol)加入100ml二氯甲烷中，緩緩滴入三乙胺30mL(0.2mol)，待溶液澄清后加入醋酸酐15ml(0.15mol)，5h后，反應完畢，蒸干反應溶劑，然后向其中加入1N的HCL溶液，調節PH為5左右，大量白色晶體析出，抽濾得乙酰丁香酸6.20g，收率80％。實施例6化合物5與化合物6縮合生成化合物7乙酰丁香酸6，32.4g本文檔來自技高網...

【技術保護點】
益母草堿代謝物，其特征在于，其為益母草堿與葡萄糖醛酸結合的主要代謝物，具有式(1)的結構，

【技術特征摘要】
1.益母草堿代謝物，其特征在于，其為益母草堿與葡萄糖醛酸結合的主要代謝物，具有式(1)的結構，2.權利要求1所述的益母草堿代謝物的制備方法，其特征在于，通過下述反應式(I)或(II)制備：反應式(I)：反應式(II)：上述反應式(I)中，以葡萄糖醛酸內酯為原料，通過XX反應，葡萄糖醛酸甲酯的乙酰化，Br取代反應，合成得到化合物4.上述反應式(II)中，以4-氨基丁醇，丁香酸，中間體2為原料，通過胺的取代，酚羥基的乙酰化，酯縮合，酯的堿水解，鹵取代，強酸以及堿性條件下脫除保護基，得到結構式(1)的益母草堿主要代謝物。3.按權利要求2所述的益母草堿代謝物的制備方法，其特征在于，所述反應式(I)中采用試劑：(i)MeOH,NaOH；(ii)HClO4,Ac2O；(iii)0℃，HBr/MeOH(1:2)，N2。4.按權利要求2所述的益母草堿代謝物的制備方法，其特征在于，所述反應式(II)中采用試劑：(iv)N,N-二叔丁羰基-S-異硫脲，DMF；(v)Et3N,AcOH,DCM；(vi)DIC,DPTS,DMAP；(vii)MeONa,DCM；(viii)K2CO3aq,DBAB,HBr/AcOH(1:2)(ix)
\tTFA,DCM；(x)guanidine,DCM/EtOH(1:9)。5.按權利要求2-4任一所述的益母草堿代謝物的制備方法，其特征在于，其包括步驟；i:將葡萄糖醛酸內酯，氫氧化鈉加入到甲醇中，攪拌溶解。待完全溶解后，繼續攪拌1h，反應液呈黃色透明狀，減壓蒸出全部的甲醇，得到葡萄糖醛酸甲酯；ⅱ：將葡萄糖醛...

【專利技術屬性】
技術研發人員：朱依諄，古險峰，王瑩，
申請(專利權)人：復旦大學，
類型：發明
國別省市：上海;31