β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA，其合成，活性和應(yīng)用制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了下式的β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA(式中AA為Ala，Val，Phe，Tyr，Ser，Thr，Gln，Asp和Glu殘基)，公開了它們的制備方法，公開了它們的抗腫瘤活性和抗血栓活性，因而本發(fā)明專利技術(shù)公開了它們在制備抗腫瘤藥物和抗血栓藥物中的應(yīng)用。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA，涉及它們的制備方法，涉及它們的抗腫瘤活性和抗血栓活性，因而本專利技術(shù)涉及它們在制備抗腫瘤藥物和抗血栓藥物中的應(yīng)用。本專利技術(shù)屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
技術(shù)介紹
β-咔啉是重要的天然產(chǎn)物，具有廣泛的藥理作用，例如抗血栓作用和抗腫瘤作用。專利技術(shù)人曾經(jīng)公開了下式的β-咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-寡肽在0.1μmol/kg口服劑量下可以抑制腫瘤生長。因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)中含Arg(NO2)-抗粘附寡肽基，結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜，制備相對(duì)繁瑣，所以專利技術(shù)人對(duì)它們不滿意。于是，專利技術(shù)人一直摸索簡化Arg(NO2)-抗粘附寡肽基的途徑。經(jīng)過3年實(shí)驗(yàn)研究，專利技術(shù)人發(fā)現(xiàn)用Arg-AA二肽基代替Arg(NO2)-抗粘附寡肽基得到的化合物不僅在0.1μmol/kg劑量下就具有明確的抗腫瘤作用，而且有額外的抗血栓作用。根據(jù)這個(gè)發(fā)現(xiàn)，專利技術(shù)人提出了本專利技術(shù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的第一個(gè)內(nèi)容是提供下式的β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA(式中AA為Ala，Val，Phe，Tyr，Ser，Thr，Gln，Asp和Glu殘基)本專利技術(shù)的第二個(gè)內(nèi)容是提供β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA的合成方法，該方法包括：(1)L-色氨酸在稀硫酸催化下與甲醛進(jìn)行Pictet-Spengler縮合生成(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸；(2)(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸轉(zhuǎn)化為(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯；(3)(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯用高錳酸鉀氧化為β-咔啉-3-羧酸甲酯；(4)β-咔啉-3-羧酸甲酯在NaOH(2N)溶液中水解生成β-咔啉-3-羧酸；(5)β-咔啉-3-羧酸與Arg(NO2)-OBzl偶聯(lián)生成β-咔啉-3-羧酸-Arg(NO2)-OBzl；(6)β-咔啉-3-羧酸-Arg(NO2)-OBzl在Pd/C催化下氫解生成β-咔啉-3-羧酸-Arg；(7)Boc-Arg(NO2)與AA-OBzl偶聯(lián)生成Boc-Arg(NO2)-AA-OBzl；(8)Boc-Arg(NO2)-AA-OBzl在4N氯化氫-乙酸乙酯溶液中脫Boc生成Arg(NO2)-AA-OBzl；(9)β-咔啉-3-羧酸與Arg(NO2)-AA-OBzl偶聯(lián)生成β-咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-AA-OBzl；(10)β-咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-AA-OBzl在Pd/C催化下氫解生成β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA。本專利技術(shù)的第三個(gè)內(nèi)容是評(píng)價(jià)β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA的抗腫瘤作用。本專利技術(shù)的第四個(gè)內(nèi)容是評(píng)價(jià)β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA的抗血栓作用。附圖說明圖1.目標(biāo)化合物6a-i的合成路線.i)甲醛，濃H2SO4，室溫6小時(shí)；ii)甲醇，SOCl2；iii)KMnO4，丙酮，室溫反應(yīng)10h；iv)2NNaOH，甲醇；v)二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，1-羥基苯并三唑(HOBt)，N-甲基嗎啉(NMM)，四氫呋喃(THF)/DMF；vi)4N氯化氫-乙酸乙酯溶液，EtOAc，冰浴4h；vii)Pd/C，H2，CH3OH.5a中AA＝Ala，5b中AA＝Val，5c中AA＝Ser，5d中AA＝Asp(OBzl)，5e中AA＝Glu(OBzl)，5f中AA＝Tyr，5g中AA＝Thr，5h中AA＝Gln，5i中AA＝Phe；6a中AA＝Ala，6b中AA＝Val，6c中AA＝Ser，6d中AA＝Asp，6e中AA＝Glu，6f中AA＝Tyr，6g中AA＝Thr，6h中AA＝Gln，6i中AA＝Phe。具體實(shí)施方式為了進(jìn)一步闡述本專利技術(shù)，下面給出一系列實(shí)施例。這些實(shí)施例完全是例證性的，它們僅用來對(duì)本專利技術(shù)進(jìn)行具體描述，不應(yīng)當(dāng)理解為對(duì)本專利技術(shù)的限制。實(shí)施例1制備(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸將400mL水中緩慢加入0.2mL濃硫酸，往得到的稀硫酸水溶液中加入10g(24.5mmol)L-色氨酸并超聲振蕩至L-色氨酸完全溶解。往得到的溶液中加入10mL濃度為35％的甲醛溶液，反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，薄層層析監(jiān)測到L-色氨酸消失，終止反應(yīng)。往反應(yīng)溶液中緩慢加濃氨水，調(diào)反應(yīng)混合物至pH6，靜置半小時(shí)。減壓濾出的生成的沉淀用水洗，將濾出的無色固體平鋪于表面皿，置于柜子中空氣干燥即得標(biāo)題物，為無色固體9.9g(93％)，ESI-MS(m/e)：217[M+H]+。實(shí)施例2制備(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯將174mLCH3OH置于在冰鹽浴冷卻的250mL反應(yīng)瓶中并劇烈攪拌，18mLSOCl2通過50mL恒壓分液漏斗緩慢滴加到含甲醇的反應(yīng)瓶中，攪拌30min后撤去冰鹽浴，往反應(yīng)混合物中加入15g(69.6mmol)(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸，室溫反應(yīng)。18h后原料點(diǎn)消失，停止反應(yīng)，進(jìn)行后處理：攪拌下用水泵將反應(yīng)液減壓濃縮至干，殘留物用甲醇溶解，再用水泵減壓濃縮至干，該操作重復(fù)2次，殘留物加入無水乙醚，并盡量使乙醚與殘留物充分接觸，再用水泵減壓濃縮至干，該操作重復(fù)1次。產(chǎn)率：66％，ESI-MS(m/e)：231[M+H]+。實(shí)施例3制備β-咔啉-3-羧酸甲酯冰浴下，用丙酮將3.24g(14.1mmol)(3S)-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯溶解，緩慢將4.86gKMnO4少量多次加入反應(yīng)瓶中，反應(yīng)過夜。后處理：用無水乙醇將未反應(yīng)的KMnO4淬滅，攪拌30min，過濾，過濾完的濾液放置一會(huì)還會(huì)繼續(xù)析出MnO2，再過濾，直到?jīng)]有MnO2析出，合并濾液，減壓濃縮至干，得到1.4g固體。產(chǎn)率：45％，ESI-MS(m/e)：227[M+H]+。實(shí)施例4制備β-咔啉-3-羧酸冰浴下，用CH3OH溶解0.82g(3.63mmol)β-咔啉-3-羧酸甲酯，緩慢滴加2NNaOH溶液，調(diào)pH到14，室溫反應(yīng)。反應(yīng)5h后，溶液開始出現(xiàn)渾濁，有淡黃色沉淀析出，過濾得0.5g(72％)目標(biāo)化合物，為淡黃色固體，ESI-MS(m/e)：213[M+H]+。實(shí)施例5制備β-咔啉-3-羧酸-Arg(NO2)-OBzl(7)稱取100mg(0.47mmol)β-咔啉-3-羧酸，用適量無水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解，加入63.67g1-羥基苯并三唑(HOBt)，冰浴下攪拌約15min后，加入111mg(0.54mmol)溶解在無水DMF中的N，N-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)，活化30min，加入138.75mg(0.44mmol)NG-NO2-R-OBzl，N-甲基嗎啉(NMM)調(diào)pH8，反應(yīng)一天后檢測出現(xiàn)熒光新點(diǎn)，反應(yīng)液吹干后硅膠柱層析純化(二氯甲烷∶甲醇洗脫體系，比例從100∶1變到20∶1)，得到50mg(21％)目標(biāo)化合物，為無色固體。Rf＝0.4(二氯甲烷∶甲醇，30∶1)；Mp115-116℃；ESI-MS(m/e)：504[M+H]+；IR：3262，2924，1732，1661，1624，1584，1524，1498，1462，1449，1391，1351，1255，1191，1164，1121，1104，1062，1032，1018，933，911，888，856，825，783，7本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
下式的β?咔啉?3?甲酰?Arg?AA，式中AA為Ala，Val，Phe，Tyr，Ser，Thr，Gln，Asp和Glu殘基，

【技術(shù)特征摘要】
1.下式的β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA，式中AA為Ala，Val，Phe，Tyr，Ser，Thr，Gln，Asp和Glu殘基，2.權(quán)利要求1的β-咔啉-3-甲酰-Arg-AA的制備方法，該方法包括：(1)L-色氨酸在稀硫酸催化下與甲醛進(jìn)行Pictet-Spengler縮合生成3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸；(2)3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸轉(zhuǎn)化為3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯；(3)3S-1，2，3，4-四氫-β-咔啉-3-羧酸甲酯用高錳酸鉀氧化為β-咔啉-3-羧酸甲酯；(4)β-咔啉-3-羧酸甲酯在2NNaOH溶液中水解生成β-咔啉-3-羧酸；(5)β-咔啉-3-羧酸與NG-NO2-Arg-OBzl偶聯(lián)生成β-咔啉-3-羧酸-NG-NO2-Arg-OBzl；(6)3...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：彭師奇，趙明，王玉記，吳建輝，李琳，
申請(專利權(quán))人：首都醫(yī)科大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：北京;11