腸溶性雙層無縫實心益生菌微球及其制備方法和應用技術

本發明專利技術公開了腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，所述益生菌微球以活性微生物為囊材，以海藻酸鈣?殼聚糖凝膠為壁材，并提供了其制備方法和應用。本發明專利技術的有益效果為：本發明專利技術提供的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球及其制備方法和應用，是以益生菌為芯材，以海藻酸鈉和氯化鈣為第一層囊材，以殼聚糖為第二層囊材，利用滴制法或擠壓法制作的直徑為0.5mm?10mm的球，其所用的囊材耐酸性強，能使包埋的乳酸菌順利通過胃酸到達腸道中定植，并在腸道中釋放出益生菌。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及微生物制劑
，具體涉及腸溶性雙層無縫實心益生菌微球及其制備方法和應用。
技術介紹
益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，是定植于人體腸道、生殖系統內，能產生確切健康功效從而改善宿主微生態平衡、發揮有益作用的活性有益微生物的總稱。益生菌的益生作用與其在腸道中的存活數量和生存質量有關,其活菌制劑進入人或動物消化道后多難以經受低pH值的鹽酸、膽汁酸等的作用,難以有足夠的活菌數量到達腸道或定植腸道而發揮作用。目前市場上奶制品和飲料中添加的益生菌大多是采用冷凍干燥、噴霧干燥、流化床干燥等技術生產的粉狀產品,這些產品在食品中是完全釋放的,在產品的環境中或通過胃腸道的過程中得不到有效的保護。海藻酸是存在于褐藻類海洋天然多糖，海藻酸鈉可減緩脂肪糖和膽鹽的吸收，具有降低血清膽固醇、血中甘油三酯和血糖的作用，可預防高血壓、糖尿病、肥胖癥等現代病。它在腸道中能抑制有害金屬如鍶、鎘、鉛等在體內的積累，正是因為褐藻酸鈉這些重要作用，在國內外已日益被人們所重視。日本人把富含有褐藻酸鈉的食品稱為“長壽食品”，美國人則稱其為“奇妙的食品添加劑”。殼聚糖是甲殼素經1,4鍵連接而成的線性聚合物，是迄今所發現的唯一天然堿性多糖，,殼聚糖分子鏈中存在大量伯氨基,在稀酸溶液中(如乙酸)因氨基質子化而溶解,并荷正電成為陽離子聚合物,表現出良好的生物黏附性,利于其黏附并跨越表面負電的疏水性細胞膜。
技術實現思路
本專利技術的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了腸溶性雙層無縫實心益生菌微球及其制備方法和應用。為了實現上述目的，本專利技術提供的技術方案為：腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，所述益生菌微球以活性微生物為囊材，以海藻酸鈣-殼聚糖凝膠為壁材。進一步的，上述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，所述活性微生物為食用菌種。進一步的，上述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，所述益生菌微球中添加有食用色素或食用香精。進一步的，上述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，所述益生菌微球的直徑為0.5mm-10mm。本專利技術的第二個目的是提供了上述腸溶性雙層無縫實心益生菌微球的制備方法，包括以下步驟：1）益生菌菌株經發酵、離心、收集菌體后，與PBS按照質量比1：（3-10）的比例混合，重懸菌體并再次離心得到洗滌后菌體，菌體以生理鹽水按質量比1:1的比例重懸，得到菌懸液；2）配制質量百分比為1-5%的海藻酸鈉溶液，115℃滅菌20min，得到滅菌海藻酸鈉溶液；3）將步驟1）得到的菌懸液與步驟2）得到的滅菌海藻酸鈉溶液按照質量比1：（2-10）的比例混合均勻，得到混合液；4）將步驟3）得到的混合液制成直徑0.5-10mm的液滴，滴入質量百分濃度2%-5%的無菌氯化鈣溶液中，靜置得到一次包埋微球顆粒；5）收集步驟4）得到的一次包埋微球顆粒，加入至質量百分濃度0.3%-2.0%的無菌殼聚糖溶液中進行二次包埋，一次包埋微球顆粒與無菌殼聚糖溶液的比例為質量比1：（1-5），得到二次包埋微球；6）按照益生菌微球的直徑，即0.5mm-10mm選擇適合濾網對步驟5）得到的二次包埋微球進行過濾，并收集得到益生菌微球，置于生理鹽水中，4℃保存備用。本專利技術的第三個目的是提供了上述腸溶性雙層無縫實心益生菌微球在制備食品中的應用。進一步的，上述的應用，所述食品為酸乳、發酵乳、乳酸菌飲料、果汁、發酵果汁、蔬菜汁、發酵蔬菜汁、豆乳、發酵豆乳、果凍、布丁、純凈水、礦泉水、茶飲料、功能性飲料或碳酸飲料。本專利技術的有益效果為：本專利技術提供的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球及其制備方法和應用，是以益生菌為芯材，以海藻酸鈉和氯化鈣為第一層囊材，以殼聚糖為第二層囊材，利用滴制法或擠壓法制作的直徑為0.5mm-10mm的球，其所用的囊材耐酸性強，能使包埋的乳酸菌順利通過胃酸到達腸道中定植，并在腸道中釋放出益生菌。附圖說明圖1顯示為植物乳桿菌微球在生理鹽水中的活菌數變化。圖2顯示為植物乳桿菌微球在酸奶貨架期內的活菌數變化。圖3顯示為干酪乳桿菌微球在生理鹽水中的活菌數變化。圖4顯示為干酪乳桿菌微球在乳酸菌飲料貨架期內的活菌數變化。具體實施方式實施例1：植物乳桿菌微球的制備與應用：（1）配制2%海藻酸鈉100ml、0.5%殼聚糖200ml、生理鹽水100ml、PBS溶液500ml，115℃滅菌20min。（2）將1000ml植物乳桿菌發酵液離心去上清，收集菌體約10g，加50gPBS重懸后再次離心得菌體。（3）菌體與生理鹽水按1:1混合，重懸菌體。（4）2%海藻酸鈉中添加0.05%（質量體積比）梔子黃色素，形成黃色海藻酸鈉溶液。（5）菌體重懸液與（4）中2%海藻酸鈉按1:3混合均勻。（6）用無菌注射器將混合溶液擠成液滴，滴入3%氯化鈣中，鈣化30min形成微球。（7）過濾出微球，加到200ml的0.5%殼聚糖溶液中，在搖床中60rpm/min勻速搖動20min。（8）過濾出微球，用生理鹽水浸泡，4℃保存備用。（9）制作攪拌型酸乳：鮮牛奶加6%白砂糖，均質后進行巴氏殺菌；發酵劑接種到牛奶中，42℃發酵酸度70°T左右終止發酵。（10）微球過濾，用無菌水洗滌去除生理鹽水的咸澀味后加入酸乳中，攪拌均勻后放冰箱后熟即可食用。植物乳桿菌微球的活菌數變化如圖1、圖2所示。實施例2：干酪乳桿菌微球的制備與應用：（1）配制1.5%海藻酸鈉100ml、1.0%殼聚糖200ml、生理鹽水100ml、PBS溶液200ml，115℃滅菌20min。（2）將1000ml干酪乳桿菌發酵液離心去上清，收集菌體約10g，加100gPBS重懸后再次離心得菌體。（3）菌體與生理鹽水按1:1混合，重懸菌體。（4）1.5%海藻酸鈉溶液中加入0.15%（質量體積比）甜橙香精與0.1%（質量體積比）β-胡蘿卜素。（5）菌體重懸液與（4）中1.5%海藻酸鈉按1:5混合均勻。（6）用無菌注射器將混合溶液擠成液滴，滴入4%氯化鈣中，鈣化30min形成微球。（7）過濾出微球，加到200ml的1.0%殼聚糖溶液中，在搖床中60rpm/min勻速搖動20min。（8）過濾出微球，用生理鹽水浸泡，4℃保存備用。（9）添加入乳酸菌飲料中。干酪乳桿菌微球的活菌數變化如圖3、圖4所示。最后應說明的是：以上所述僅為本專利技術的優選實施例而已，并不用于限制本專利技術，盡管參照前述實施例對本專利技術進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本專利技術的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本專利技術的保護范圍之內。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，其特征在于，所述益生菌微球以活性微生物為囊材，以海藻酸鈣??殼聚糖凝膠為壁材。

【技術特征摘要】
1.腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，其特征在于，所述益生菌微球以活性微生物為囊材，以海藻酸鈣-殼聚糖凝膠為壁材。2.根據權利要求1所述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，其特征在于，所述活性微生物為食用菌種。3.根據權利要求2所述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，其特征在于，所述益生菌微球中添加有食用色素或食用香精。4.根據權利要求3所述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球，其特征在于，所述益生菌微球的直徑為0.5mm-10mm。5.根據權利要求1-4任一所述的腸溶性雙層無縫實心益生菌微球的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1）益生菌菌株經發酵、離心、收集菌體后，與PBS按照質量比1：（3-10）的比例混合，重懸菌體并再次離心得到洗滌后菌體，菌體以生理鹽水按質量比1:1的比例重懸，得到菌懸液；2）配制質量百分比為1-5%的海藻酸鈉溶液，115℃滅菌20min，得到滅菌海藻酸鈉溶液；3）將步驟1）得到的菌懸液與步驟2...

【專利技術屬性】
技術研發人員：趙林森，齊世華，馬新穎，張蘭威，馬超，梁叢叢，任磊，夏娟，
申請(專利權)人：河北一然生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：河北;13