蛋白酶生物轉化提高煙葉品質的方法技術

本發明專利技術公開了以蛋白酶為催化劑提高煙葉吸食品質的方法。利用本發明專利技術提供的酶源及其應用工藝處理煙葉，既不改變煙葉本身的吸食風格，又能有效克服煙葉的缺點，明顯縮短煙葉的醇化期。具有操作簡單、成本低廉及無污染物排放入環境等優點，經本發明專利技術方法處理后煙葉煙香豐富，煙氣粗糙感明顯減輕，喉部刺激降低，協調性好。

【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種提高煙葉品質的方法，具體地說是一種用蛋白酶生物轉 化提高煙葉品質的方法。
技術介紹
在煙草工業中，提高煙葉品質的方法有加香加料法、化學處理法和生物 轉化法。生物轉化法中最常見的是使用生物酶處理煙葉，生物酶處理煙葉是 提高煙草品質的重要方法，它具有工藝簡單、不需高溫高壓等特殊條件、無 污染物質排放環境等優點。目前國內外生物酶處理煙葉都是利用復合酶進行。 因為不同的煙葉有著不同的內在組分含量和不同的煙葉吸食風格，許多煙葉 經復合酶處理后改變了原有風格，甚至增加了外來雜質。這對于不同煙葉的 配伍和保持香煙品牌特色是非常不利的，給配伍和保持香煙品牌特色帶來困 難。這個問題是煙草工業中長期存在的難以解決的技術問題，因此篩選在保 持原有煙葉香氣風格的前提下能夠提高煙葉品質和縮短醇化期的酶制劑及其 處理煙葉的方法具有十分重要意義。
技術實現思路
本專利技術目的在于提供既能保持原有煙葉香氣風格又能夠提高煙葉吸食品 質，同時又縮短醇化期、提高生產效率的酶制劑及其處理煙葉的方法。 本專利技術目的是這樣實現的一種蛋白酶生物轉化提高煙葉品質的方法，包括如下步驟(1 )選取英國Biocatalysts公司的PROMODTM215P蛋白酶或 PEPTIDASETM413P蛋白醇、無錫賽德生物制品有限公司的中性蛋白酶、無錫 杰能科生物科技有限公司的PROTEXTM50F蛋白酶、丹麥諾維信公司的 Neutrase 5.0 BG中性蛋白酶和Protamex復合蛋白酶中的一種或幾種備用；(2) 選取湖南永興B3F、福建龍巖B3F、云南曲靖B3F、云南楚雄B3F、 貴州遵義B3F、四川涼山B2L、云南曲靖C4F、福建龍巖C4F和四川涼山C3F 打葉復烤后少于6個月儲存期的新煙葉備用；(3) 稱取煙葉重量百分比的0.05 0.5蛋白酶，加水配制成5.0%溶液；(4) 將上述溶液均勻噴灑至煙葉中，調節煙葉含水量至20 40%;(5) 在溫度25 50。C下，酶解24小時以上；(6) 將上述煙葉處理樣在100 120°C的條件下滅酶10 30分鐘；冷卻至吊5(7) 噴水至煙葉水分含量為煙葉重量的12~18%;(8) 切絲，炒絲至正常水分；在22。C和60。/。濕度下平衡24小時。 步驟(3)所述的蛋白酶最佳使用量為0.05 0.2%。歩驟(5)所述的反應最佳溫度為30 4(TC。本專利技術要點在于利用優選的蛋白酶在特定的條件下進行生物轉化使煙 葉中不利于吸食品質的蛋白質部分轉化成^煙的香味組分前體，使得煙葉在 保持原有的風格下吸食品質大大提高，并縮短煙葉醇化期6個月以上。本專利技術使用的煙葉為不同產地和不同等級打葉復烤后少于6個月儲存期 的新煙葉為原料。本專利技術方法包括選擇轉化效果最好的蛋白酶；選擇轉化效果最好的煙 葉產地和等級；選擇最佳工藝條件。本專利技術人以不同產地和不同等級的新煙葉為原料，選擇現有優質蛋白酶 處理煙葉。然后結合感官評價，經初選、復選，最終獲得六種能良好地提升 煙葉品質的蛋白酶，它們分別是英國Biocatalysts公司PROMODTM215P蛋 白酶和PEPTIDASETM413P蛋白酶、無錫賽德生物制品有限公司中性蛋白酶、 無錫杰能科生物科技有限公司的PROTEXTM50FP蛋白酶、丹麥諾維信公司的 Neutrase 5.0 BG中性蛋白酶和Protamex復合蛋白酶。本專利技術提供了生物轉化過程的特定條件和優化條件，包括生物轉化底物 的適宜濃度，酶的用量，生物轉化溫度，轉化時間，以及后處理方法等，最 后比較完整地形成了一種以新煙葉為原料生物轉化成高吸食品質的煙葉的方 法。本專利技術方法能有效地將新煙葉中的不利于吸食品質蛋白質轉化成具有煙 草特征香味的物質前體，并且保持了原有的煙葉香氣風格；同時縮短了煙葉 醇化期，提高了生產效率，實現了本專利技術的目的。本專利技術所說的新煙葉為湖南永興B3F、福建龍巖B3F、云南曲靖B3F、云 南楚雄BgF、貴州遵義B3F、四川涼山B2L、云南曲靖C4F、福建龍巖C4F和4四川涼山C3F打葉復烤后少于6個月儲存期的新煙葉的一種。所選用的蛋白酶為英國Biocatalysts公司的PROMODTM215P蛋白酶或PEPTIDASETM413P蛋白酶、無錫賽德生物制品有限公司的中性蛋白酶、無錫杰能科生物科技有 限公司的PROTEXTM50FP蛋白酶、丹麥諾維信公司的Neutrase 5.0 BG中性蛋 白酶和Protamex復合蛋白酶的一種或者其中兩種以上蛋白酶的復合物。 本專利技術方法制造的高吸食品質煙葉具有以下特點1. 保持了煙葉原有外觀性狀處理后與處理前煙葉原有性狀相比，無明顯差異。2. 保持了原有的香氣風格處理后與處理前煙葉相比，香氣風格無明顯差巳 升。3. 不利于吸食品質的蛋白質含量明顯降低。表1為打葉復烤后自然醇化6個月的湖南永興B3F煙葉，以英國 Biocatalysts公司PROMODTM215P蛋白酶生物轉化所得的煙葉蛋白質含量。 由表1可見，經72小時處理后，煙葉中的蛋白質下降了 1.2%。 ？表1:湖南煙葉經蛋白酶PROMODTM215P處理后的蛋白質含量<table>table see original document page 5</column></row><table>4.縮短了醇化時間。表2是醇化6個月和12個月的煙葉蛋白含量變化。比較表1和表2，經 蛋白酶處理72小時的煙葉的蛋白質降低量與12個月醇化期的蛋白降低量相 近。表2:兩個自然醇化期的湖南煙葉的主要成分<table>table see original document page 5</column></row><table>木質素 10.00 9.80煙堿 24.50 2.16果膠 2.40 2.475.影響香氣量關系較大的氨基酸含量明顯上升。煙葉經蛋白酶處理前后氨基酸含量如表3，影響香氣量關系較大的氨基酸 如丙氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、天冬氨酸含量 明顯上升。這些氨基酸對煙葉的吸味調節發揮著重要作用。表3:湖南B3F煙葉經蛋白酶處理前后的氨基酸含量變化氨基酸 處理前(mg/g) 處理后(mg/g)天冬氨酸0.0610扁蘇氨酸0馬0.022絲氨酸0.0150.022谷氨酸0.0940.127甘氨酸0.0270馬丙氨酸0.0320.040胱氨酸0.0080扁纈氨酸0.0360.046蛋氨酸0.0110遍異亮氨酸0.0200.028亮氨酸0.0280.042酪氨酸0馬0.024苯丙氨酸0.0260.036賴氨酸0.0200.022組氨酸0.0100.010精氨酸0.0300扁脯氨酸0.0540.056總氨基酸0.5040.6356.感官評吸效果香氣豐富性明顯增強，雜氣減輕，喉部刺激減輕，余 味明顯改善。6將本專利技術所說的煙葉噴水至水分含量為12 18%，切絲，炒絲至正常水分，在22°(3和60%濕度下平衡24小時，得到處理樣，打煙支，待用。 同時以未經處理樣品、及經12個月醇化后樣品打煙支作為空白對比。 請8人以上專業香煙感官評價技術人員評價，結果為；本專利技術的蛋白酶處理煙葉在香氣豐富性方面好于12個月本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種蛋白酶生物轉化提高煙葉品質的方法，包括如下步驟：　（１）選取英國Ｂｉｏｃａｔａｌｙｓｔｓ公司的ＰＲＯＭＯＤ↑［ＴＭ］２１５Ｐ蛋白酶或ＰＥＰＴＩＤＡＳＥ↑［ＴＭ］４１３Ｐ蛋白酶、無錫賽德生物制品有限公司的中性蛋白酶、無錫杰能科生物科 技有限公司的ＰＲＯＴＥＸ↑［ＴＭ］５０Ｆ蛋白酶、丹麥諾維信公司的Ｎｅｕｔｒａｓｅ　５．０　ＢＧ中性蛋白酶和Ｐｒｏｔａｍｅｘ復合蛋白酶中的一種或幾種備用；　（２）選取湖南永興Ｂ↓［３］Ｆ、福建龍巖Ｂ↓［３］Ｆ、云南曲靖Ｂ↓［３］Ｆ、 云南楚雄Ｂ↓［３］Ｆ、貴州遵義Ｂ↓［３］Ｆ、四川涼山Ｂ↓［２］Ｌ、云南曲靖Ｃ↓［４］Ｆ、福建龍巖Ｃ↓［４］Ｆ和四川涼山Ｃ↓［３］Ｆ打葉復烤后少于６個月儲存期的新煙葉備用；　（３）稱取煙葉重量百分比的０．０５～０．５蛋白酶，加水配制成５ ．０％溶液；　（４）將上述溶液均勻噴灑至煙葉中，調節煙葉含水量至２０～４０％；　（５）在溫度２５～５０℃下，酶解２４小時以上；　（６）將上述煙葉處理樣在１００～１２０℃的條件下滅酶１０～３０分鐘；冷卻至常溫；　（７） 噴水至煙葉水分含量為煙葉重量的１２～１８％；　（８）切絲，炒絲至正常水分；在２２℃和６０％濕度下平衡２４小時。...

【技術特征摘要】
1. 一種蛋白酶生物轉化提高煙葉品質的方法，包括如下步驟(1)選取英國Biocatalysts公司的PROMODTM215P蛋白酶或PEPTIDASETM413P蛋白酶、無錫賽德生物制品有限公司的中性蛋白酶、無錫杰能科生物科技有限公司的PROTEXTM50F蛋白酶、丹麥諾維信公司的Neutrase 5.0 BG中性蛋白酶和Protamex復合蛋白酶中的一種或幾種備用；(2)選取湖南永興B3F、福建龍巖B3F、云南曲靖B3F、云南楚雄B3F、貴州遵義B3F、四川涼山B2L、云南曲靖C4F、福建龍巖C4F和四川涼山C3F打葉復烤后少于6個月儲存期的新煙葉備用；(3)稱取煙葉重量百分比的0...

【專利技術屬性】
技術研發人員：呂騰飛，黃漢榮，羅昌榮，
申請(專利權)人：華寶食用香精香料上海有限公司，無錫華海香料有限公司，
類型：發明
國別省市：31[中國|上海]