一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法技術

本發明專利技術涉及一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法，屬于家禽血液生化標記技術領域，其具體步驟為：1）采集待測武定雞的血液，制備血清，檢測血清中IGF-1的濃度值；2）將步驟1）測得的濃度值與武定雞血液生化標記進行對比，將待測武定雞區別為快長型武定雞和慢長型武定雞。本發明專利技術通過測定生長軸上相關基因GH、GHBP和IGF-1在慢長型和快長型武定雞中的濃度變化，結合測量的武定雞的體尺指數，確定慢長型和快長型武定雞體型血液生化標記，不斷篩選優質雞只，為武定雞的早期育種提供理論基礎，同時也是探索武定雞的育種新方法，為云南地方雞種在育種工作中提供新思路。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于家禽血液生化標記
，具體地說，涉及一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法。
技術介紹
隨著家禽市場的飛速發展，人們生活水平的提高，人們對禽類產品的要求越來越高。人們對地方雞種的消費呈上升趨勢，致使其價格遠高于快大型肉雞；基于這種良好的市場開發利用前景，有針對性的選擇相關的表型性狀進行研究，努力培育適應市場需求的新品種和新產品，對地方品種資源的保護和開發具有深遠地意義。體型性狀是重要的表型性狀之一，由微效多基因控制，在生長發育中呈現動態變化，體型的大小除了從外觀上用肉眼觀察外，還可以運用常規技術進行測量，通過對數據的分析可以對體型性狀加以評定。目前，生長發育的測定項目主要是對體重和體尺的測量。其中體尺是反映家禽身體各部分是否發育完全，是否勻稱和符合某一生產類型、品種的特征。通常是用卡尺或皮尺進行測量。生長軸相關基因對雞體型的大小的研究，也是最近的熱點之一。Leung等和Scanes等都在早期對矮小型雞做過相關方面的研究，認為矮小型雞的代謝低，脛長短，體脂大量積蓄，最初推測是生長激素失活或單脫碘化酶存在缺陷才導致矮小型雞甲狀腺機能衰退、體型矮小等表型特征，隨后在大量的研究中，通過不斷地挖掘，發現通過介導生長激素(GH)來調控IGFs的表達，從而在體內起著重要的調節生長發育的作用。由于生長軸上相關基因的缺失結構的變異會影響到其表達蛋白的結構和功能，從而影響GH結合的結合活性，致使生長受到抑制。吳桂琴等對矮小型雞和普通型雞進行研究發現，8周齡時矮小型雞的脛長比普通雞的要短約10mm；性成熟后，即20周齡時，其脛長要普通雞的短20多mm；從基因表達中，IGF-1的表達趨勢無論是剛出生，快速生長發育時期，還是性成熟后，矮小雞肝臟中IGF-1mRNA的表達水平均遠遠低于普通雞，差別更是達到2個數量級。此外，Tanaka等研究發現雞肝臟中IGF-1mRNA的表達呈GH依賴模式，而其在其他組織中的表達并不依賴于GH的作用。武定雞是云南省楚雄彝族自治州的地方良種肉用雞，素以體大著稱，以肉質肥嫩鮮美聞名，備受人們喜愛。迄今為止，尚無有關生長軸相關基因GH、GHBP和IGF-1對慢長型和快長型武定雞的體型變化影響的研究，為滿足人們對地方雞種的需求，有必要探討一種能選育快長型云南武定雞的新方法，通過對生長軸相關基因的研究，建立一個血液生化標記，為云南武定雞的早期選育做鋪墊。
技術實現思路
針對上述問題，本專利技術提出一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法，通過測定生長軸上相關基因GH、GHBP和IGF-1在慢長型和快長型武定雞中的濃度變化，結合測量的武定雞的體尺指數，確定慢長型和快長型武定雞體型血液生化標記，篩選優質雞只，為武定雞的早期育種提供理論基礎，同時也是探索武定雞的育種新方法，為云南地方雞種在育種工作中提供新思路。為實現上述目的，本專利技術是通過如下技術方案實現的：一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法，具體步驟為：1)采集待測武定雞的血液，制備血清，檢測血清中雞胰島素樣生長因子(IGF-1)的濃度值；2)將步驟1)測得的濃度值與武定雞血液生化標記進行對比，將待測武定雞區別為快長型武定雞和慢長型武定雞；所述武定雞血液生化標記的確立步驟為：a、從武定雞資源群體中隨機選擇慢長武定雞家系和快長武定雞家系，分別測量體尺指標，采集血液，收集血漿；b、選用GH、GHBP和IGF-1酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒，應用雙抗體夾心法測定樣品中雞的相關基因的水平，然后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，最后通過標準曲線計算樣品中GH、GHBP和IGF-1的含量；c、根據步驟b所得數據，得出慢長型武定雞和快長型武定雞各生長相關基因的濃度值，再根據所選取武定雞的體尺指標，進行生長相關基因與體尺的相關性分析；d、根據步驟c所得到的分析結果確定武定雞的血液生化標記。進一步地，所述的云南武定雞的血液生化標記為IGF-1基因的濃度值，在一月齡時，當IGF-1基因的濃度值在2.36±0.05ug/l以下，判定為慢長型武定雞，當IGF-1基因的濃度值在2.36±0.05ug/l以上，判定為快長型武定雞；在二月齡時，當IGF-1基因的濃度值在2.55±0.04ug/l以下，判定為慢長型武定雞，當IGF-1基因的濃度值在2.55±0.04ug/l以上，判定為快長型武定雞。進一步地，在一月齡時，當IGF-1基因的濃度值在2.36ug/l以下，判定為慢長型武定雞，當IGF-1基因的濃度值在2.36ug/l以上，判定為快長型武定雞；在二月齡時，當IGF-1基因的濃度值在2.55ug/l以下，判定為慢長型武定雞，當IGF-1基因的濃度值在2.55ug/l以上，判定為快長型武定雞。進一步地，所述的體尺指標包括體斜長、胸寬、胸深、龍骨長、脛長、脛圍和骨盆寬。進一步地，選用含有EDTA二鉀的抗凝劑的采血管采集血液，混合后，采用低溫3000rpm離心10分鐘，仔細收集上清，獲得血漿。本專利技術的有益效果：本專利技術通過測定生長軸上相關基因GH、GHBP和IGF-1在慢長型和快長型武定雞中的濃度變化，結合測量的武定雞的體尺指數，確定慢長型和快長型武定雞體型血液生化標記，篩選優質雞只，為武定雞的早期育種提供理論基礎，同時也是探索武定雞的育種新方法，為云南地方雞種在育種工作中提供新思路。具體實施方式實施例11.慢長型與快長型武定雞體尺的測量在慢長型武定雞家系和快長型武定雞家系中隨機選取一月齡和二月齡慢長型和快長型武定雞各90只(一月齡各45只，二月齡各45只)，停食12h，分別測量其體斜長、胸寬、胸深、龍骨長、脛長、脛圍和骨盆寬(體斜長為沿體表測量肩關節至坐骨結節間距離；胸寬為肩關節之間的距離；胸深為第一胸椎到龍骨前緣的距離；龍骨長為從龍骨前端到末端的距離；脛長為從脛部上關節到第三、四趾間的直線距離；脛圍為脛部中部的周長；骨盆寬為兩腰角間寬)。2.血液的采集和血漿的制備選擇用含有EDTA二鉀的抗凝劑的采血管收集血液，混合后，采用低溫3000rpm離心10分鐘，仔細收集上清，即為所需要的血漿。3.武定雞生長相關基因酶聯免疫(ELISA)分析按照雞生長因子(GH)、雞生長激素結合蛋白(GHBP)和雞胰島素樣生長因子(IGF-1)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒進行嚴格規范操作，應用雙抗體夾心法測定樣品中雞的相本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法，其特征在于：具體步驟為：1)采集待測武定雞的血液，制備血清，檢測血清中IGF?1基因的濃度值；2)將步驟1)測得的濃度值與武定雞血液生化標記進行對比，將待測武定雞區別為快長型武定雞和慢長型武定雞；所述武定雞血液生化標記的確立步驟為：a、從武定雞資源群體中隨機選擇慢長武定雞家系和快長武定雞家系，分別測量體尺指標，采集血液，收集血漿；b、選用GH、GHBP和IGF?1酶聯免疫分析試劑盒，應用雙抗體夾心法測定樣品中雞的生長基因的水平，然后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，最后通過標準曲線計算樣品中GH、GHBP和IGF?1的含量；c、根據步驟b所得數據，得出慢長型武定雞和快長型武定雞各生長相關基因的濃度值，再根據所選取武定雞的體尺指標，進行生長相關基因與體尺的相關性分析；d、根據步驟c所得到的分析結果確定武定雞的血液生化標記。

【技術特征摘要】
1.一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的方法，其特征在于：
具體步驟為：
1)采集待測武定雞的血液，制備血清，檢測血清中IGF-1基因的濃度值；
2)將步驟1)測得的濃度值與武定雞血液生化標記進行對比，將待測武定雞區
別為快長型武定雞和慢長型武定雞；所述武定雞血液生化標記的確立步驟為：
a、從武定雞資源群體中隨機選擇慢長武定雞家系和快長武定雞家系，分別測量
體尺指標，采集血液，收集血漿；
b、選用GH、GHBP和IGF-1酶聯免疫分析試劑盒，應用雙抗體夾心法測定樣
品中雞的生長基因的水平，然后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度，最后通
過標準曲線計算樣品中GH、GHBP和IGF-1的含量；
c、根據步驟b所得數據，得出慢長型武定雞和快長型武定雞各生長相關基因的
濃度值，再根據所選取武定雞的體尺指標，進行生長相關基因與體尺的相關性
分析；
d、根據步驟c所得到的分析結果確定武定雞的血液生化標記。
2.根據權利要求1所述的一種基于生長軸相關基因血液生化標記選育武定雞的
方法，其特征在于：所述的云南武定雞的血液生化標記為IGF-1基因的濃度值，
在一月齡時，當IGF-1基因的濃度值在2.36±0.05ug/l以下，判...

【專利技術屬性】
技術研發人員：佟薈全，李琦華，榮華，徐志強，李正田，黃英，谷大海，曹振輝，程志斌，劉麗仙，趙筱，豆騰飛，胡文元，林秋葉，汪善榮，賈俊靜，葛長榮，
申請(專利權)人：云南農業大學，
類型：發明
國別省市：云南;53