一種奶香基料的制備方法技術

本發明專利技術提供了一種奶香基料的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：將黃油、乳清粉和水混合后滅菌，然后將所述黃油、乳清粉和水的混合物調節至室溫后加入共固定化酶酶解，酶解結束后除去所述共固定化酶或者使所述共固定化酶失活，取上層油相，即為所述奶香基料；其中所述共固定化酶由以下方法制備而成：(1)在海藻酸鈉溶液中加入脂肪酶A6、脂肪酶MER和蛋白酶MSD，攪拌均勻后得到共混液；(2)將步驟(1)得到的共混液滴入CaCl2水溶液中，靜置固化后形成凝膠顆粒，制得的凝膠顆粒即為所述共固定化酶。采用該方法制備的奶香基料奶香味濃厚、奶香純正、愉悅度好，可用于制作餅干，制備的餅干奶香味明顯，香氣濃郁。

Method for preparing milk fragrant base material

The present invention provides a method for preparing milk base material, the preparation method comprises the following steps: butter, whey powder and water after sterilization, then the mixture of butter, whey powder and water regulation to room temperature after adding co immobilized enzyme hydrolysis, enzymatic hydrolysis after removal go to the co immobilized enzyme or the co immobilized enzyme deactivation, taking the oil phase, the milk base material; wherein the co immobilized enzyme prepared by the following methods: (1) adding lipase A6 and lipase MER and proteinase MSD in sodium alginate solution. Uniformly stirring after blending liquid; (2) the step (1) obtained blend droplets into the aqueous solution of CaCl2, static solidified to form gel particles, gel particles prepared for the immobilized enzyme. The milk base milk prepared by the method has the advantages of strong fragrance, pure milk and good taste, and can be used for making biscuits.

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種香料的制備方法，具體涉及一種奶香基料的制備方法。
技術介紹
德國生理學家威廉·屈內于1878年首次提出了酶這一概念。酶，俗稱酵素，是植物、動物、微生物和人體細胞合成生產的一類特殊蛋白質。由于酶具有提高生物化學反應速度和反應質量的催化能力，通常被稱為生物催化劑。和傳統催化劑相比，酶具有高效性、專一性、多樣性、反應條件溫和等優點，被廣泛應用于各個領域。但其在酸、堿、熱及有機溶液等條件下易發生酶蛋白的變性，使酶活降低或喪失，且酶反應多在溶液中進行，反應后不易回收，反應產物分離提純困難，難以實現工業上的連續化、自動化生產，因此酶工程的應用發展受到了很大的限制。固定化酶是運用化學或物理方法，對酶進行相應處理，使得原本水溶性較強的酶與固態的不溶于水的載體相互結合，或者被載體包埋，使兩者形成一個統一的整體。經固定化后，固定化酶具有比游離酶更多的優點:(1)固定化酶與底物、產物較易分離，反應結束后經離心或過濾等簡單的操作就可回收固定化酶，且酶活力降低較少，可重復多批次使用，減少了生產成本；(2)經固定化處理后，一般穩定性會有較大提高，對pH穩定性、熱穩定性等提高，對抑制劑的敏感性下降。(3)固定化酶適用于自動化、連續化生產，易控制催化過程，而且不會將酶蛋白帶進產品中導致酶的殘留，簡化后期提純工藝，提高了酶的利用效率，降低了生產成本。當然，固定化酶存在缺點:(1)固定化時會損失部分酶活；(2)酶的固定化需要設備和載體，增加了生產成本；(3)只當底物可溶時固定化酶才適用，且不太適用于大分子底物；(4)微生物分泌的胞內酶在分離后才能固定化。隨著固定化酶研究的不斷深入，固定化方法慢慢過渡到了多種方法的組合。但是發展至今，幾乎沒有一種固定化技術適用于任何一種酶，因此要根據具體酶的特性和應用目的，選擇合適的固定化方法。酶的固定化方法可分為4類:吸附法、共價結合法、交聯法和包埋法。吸附法是最早使用的酶的固定化方法之一，吸附法是利用范德華力、離子鍵、氫鍵、物理吸附等作用力,把酶固定在載體上的固定方式。一般可分為物理吸附法和離子吸附法。魯玉俠利用吸附法將脂肪酶固定在大孔陰離子樹脂D201上，得到的固定化酶有較好的操作穩定性。用制備的固定化酶催化天然黃油進行水解反應，水解產物香氣柔和、純厚。共價結合法是指通過共價鍵結合的方法把酶上的非必須功能基與載體表面的功能基結合的固定化方法?；瘜W交聯法是借助雙功能或多功能試劑把酶蛋白分子彼此發生交聯，使酶分子和雙功能團試劑或多功能團試劑之間形成共價鍵，得到三維的交聯網狀結構。在此過程中，酶分子之間發生交聯的同時，分子內部也存在一定程度的交聯?；瘜W交聯法可分為交聯酶晶體和交聯酶聚集體。包埋法是指酶與載體溶液混合后，借助引發劑發生聚合反應，通過物理作用把酶限定在載體的網絡結構中，從而實現酶的固定的方法。其優點是固定化成本低、固定化酶量大、操作簡單易行、固定化條件溫和、酶分子的穩定性高等，但由于酶被固定在載體的內部空間中，反應底物因為傳質阻力的影響需經擴散才能到達酶的活性中心發生催化反應。同時，劇烈的酶解反應有可能會對聚合物的微囊膜或網狀結構造成損壞，導致酶泄漏。在載體材料的選擇上，聚丙烯酞胺、明膠、卡拉膠、殼聚糖和海藻酸鈉等是常見的選擇。高尚欣等研究以海藻酸鈉為載體，以CaCl2-殼聚糖溶液為凝固劑，采用包埋的方法固定化菠蘿莖蛋白酶。試驗表明，此方法制備的固定化酶的熱穩定性和最適溫度提高，反應pH向堿性偏移，酶學性質得到改善。同時，固定化后的酶還具有良好的可操作性，重復使用4次后，相對酶活力仍保留80％以上，固定化效果較好。魯玉俠等海藻酸鈉為載體，CaCl2溶液為凝固劑，采用包埋法固定脂肪酶。試驗表明，此方法制備的固定化酶的熱穩定性較好，60℃下加熱1.5h后，固定化酶的酶活力只下降了30％。而且，其還具有良好的操作穩定性，連續反復使用10次，固定化酶的酶活力仍保留95％以上。共固定化酶始于20世紀80年代，是將兩種或兩種以上的酶固定于同一載體中形成共固定化體系的一種技術。共固定化酶是以單一酶的固定作為基礎，綜合考慮共固定化的酶的最佳固定化方法，經常被研究使用的共固定化方法有交聯法和包埋法。共固定化酶與普通的固定化酶相比，共固定化酶可充分發揮不同酶的特點，同時將其催化特性結合起來，充分體現協同作用，提高催化效率。同時縮短反應時間和減少反應步驟，實現連續化生產，能夠更好的控制產品質量。但是目前，在國內外有關于共固定酶的相關研究報道并不多，且主要集中于糖化酶方面，關于共固定化蛋白酶和脂肪酶的有關研究較少。脂肪酶和蛋白酶是工業化生產應用中最廣泛的兩種酶類，具有廣闊的發展前景。若把脂肪酶和蛋白酶共固定在同一載體上，將其作為酶反應器，可以實現工業化生產，簡化工藝，降低成本。高居易等以脫乙酰殼多糖作為載體，以戊二醛作為交聯劑，將木瓜蛋白酶和胰蛋白酶共固定在載體上，其活性比單酶固定化提高了25％，該方法被廣泛地應用于酒類的抗混濁、澄清等生產中。劉自琴的研究探討了不同蛋白酶對脂肪酶活力的影響，結果發現胰蛋白酶對脂肪酶Palatase20000L的活力有提高作用。同時通過研究共固定化的方法，成功將蛋白酶和脂肪酶共固定化在大孔樹脂上，可有效提高蛋白酶的活力且對脂肪酶的活力損失較少。奶香香精是香精香料領域中投資最大、開發研究最為活躍的香精之一，可以給食品原料賦香，矯正不良氣味，彌補食品中原香氣的不足，輔助和穩定食品中固有香氣。而以酶解乳脂為基料的復合型奶香香精能克服了調配型奶香香精口感單薄的缺陷，是當前研究的熱點。但由于酶的造價比較高，使用游離酶進行酶解反應時，酶只能使用一次而不能回收，導致產物的生產成本較高且后續分離步驟復雜，影響了利用酶應用的商業化。與游離酶相比，固定化酶在保持其高效、專一及溫和酶催化反應特性，同時，還呈現貯存穩定性高、分離回收容易、可多次重復使用、操作連續及可控、工藝簡便等一系列優點。而且，對蛋白酶和脂肪酶進行共固定化可充分體現協同作用，提高催化效率，縮短反應時間和減少反應步驟，實現連續化生產，能夠更好的控制產品質量。
技術實現思路
本專利技術的目的在于克服現有技術存在的不足之處而提供了一種奶香基料的制備方法，本專利技術還提供了采用該方法制備的奶香基料。為實現上述目的，所采取的技術方案：一種奶香基料的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：將黃油、乳清粉和水混合后滅菌，然后將所述黃油、乳清粉和水的混合物調節至室溫后加入共固定化酶酶解，酶解結束后除去所述共固定化酶或者使所述共固定化酶失活，取上層油相，即為所述奶香基料；其中所述共固定化酶由以下方法制備而成：(1)在海藻酸鈉溶液中加入脂肪酶A6、脂肪酶MER和蛋白酶MSD，攪拌均勻后得到共混液；(2)將步驟(1)得到的共混液滴入CaCl2水溶液中，靜置固化后形成凝膠顆粒，制得的凝膠顆粒即為所述共固定化酶。優選地，所述共固定化酶與所述黃油的重量比為0.5:1～1.5:1。更優選地，所述共固定化酶與所述黃油的重量比為1:1。優選地，所述酶解溫度為30～40℃。更優選地，所述酶解溫度為40℃。優選地，所述酶解時的轉速為150r/min，所述酶解時間為1～3h。更優選地，所述酶解時間為2h。優選地，所述滅菌溫度為75℃，滅菌時間為20min。優選地，本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種奶香基料的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：將黃油、乳清粉和水混合后滅菌，然后將所述黃油、乳清粉和水的混合物調節至室溫后加入共固定化酶酶解，酶解結束后除去所述共固定化酶或者使所述共固定化酶失活，取上層油相，即為所述奶香基料；其中所述共固定化酶由以下方法制備而成：(1)在海藻酸鈉溶液中加入脂肪酶A6、脂肪酶MER和蛋白酶MSD，攪拌均勻后得到共混液；(2)將步驟(1)得到的共混液滴入CaCl2水溶液中，靜置固化后形成凝膠顆粒，制得的凝膠顆粒即為所述共固定化酶。

【技術特征摘要】
1.一種奶香基料的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：將黃油、乳清粉和水混合后滅菌，然后將所述黃油、乳清粉和水的混合物調節至室溫后加入共固定化酶酶解，酶解結束后除去所述共固定化酶或者使所述共固定化酶失活，取上層油相，即為所述奶香基料；其中所述共固定化酶由以下方法制備而成：(1)在海藻酸鈉溶液中加入脂肪酶A6、脂肪酶MER和蛋白酶MSD，攪拌均勻后得到共混液；(2)將步驟(1)得到的共混液滴入CaCl2水溶液中，靜置固化后形成凝膠顆粒，制得的凝膠顆粒即為所述共固定化酶。2.根據權利要求1所述的奶香基料的制備方法，其特征在于，所述共固定化酶與所述黃油的重量比為0.5:1～1.5:1。3.根據權利要求1所述的奶香基料的制備方法，其特征在于，所述酶解溫度為30～40℃，所述酶解時的轉速為150r/min，所述酶解時間為1～3h。4.根據權利要求1所述的奶香基料的制備方法，其特征在于，所述滅菌溫度為75℃，滅菌時間為20min。5.根據權利要...

【專利技術屬性】
技術研發人員：汪薇，何洛強，任文彬，白衛東，于立梅，
申請(專利權)人：仲愷農業工程學院，廣東銘康香精香料有限公司，
類型：發明
國別省市：廣東;44