新的二萜類化合物、制備方法和醫(yī)藥用途技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種用于內(nèi)皮細(xì)胞保護的新的二萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途。該化合物為首次報道，是一種結(jié)構(gòu)新穎的二萜類化合物，可以從干燥的祖師麻中提取、分離純化得到。本研究證實該化合物能顯著減少ox?LDL誘導(dǎo)的HUVEC凋亡，并且效果呈劑量依賴性，可以用來開發(fā)成內(nèi)皮細(xì)胞保護的藥物。

Novel two terpene compounds, preparation method and medical use thereof

The invention discloses a novel two terpene compound used for the protection of endothelial cells and a preparation method thereof. This compound is reported for the first time, is one of two terpene compounds with novel structure, can be extracted, isolated and purified from Zushima in drying. This study confirmed that the compound can significantly reduce the apoptosis of HUVEC ox induced by LDL, and the effect is dose dependent and can be used to develop drugs to protect endothelial cells.

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于藥物
，具體涉及從干燥的祖師麻中分離得到的一種具有內(nèi)皮細(xì)胞保護作用的二萜類化合物及其制備方法。
技術(shù)介紹
祖師麻為瑞香科(Thymelaeaceae)植物黃瑞香(DaphnegiraldiiNitsche)、凹葉瑞香(D.retusaHemsl)、陜甘瑞香(又名唐古特瑞香)(D.tanguticaMaxim)的根皮及莖皮，其性溫、味辛苦，具有祛風(fēng)濕，活血止痛之功效。秋季采收，除去細(xì)根，剝?nèi)「ず颓o皮而后曬干而成。別名：狗皮柳、祖絲麻等。主要分布在山西、陜西、四川、青海、甘肅等地。祖師麻主要用于治療散瘀止痛、祛風(fēng)通絡(luò)、胃痛、頭痛、四肢麻木、風(fēng)濕痹痛、跌打損傷、關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛等。該藥在土耳其民間治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和腰腿疼痛等癥效果頗佳。祖師麻的化學(xué)成分研究始于二十世紀(jì)七十年代，王明時等首次從祖師麻中分離得到了香豆素類化合物，隨后對祖師麻的化學(xué)成分研究就逐漸開展起來。現(xiàn)有研究表明祖師麻中除了含有主要活性成分香豆素類化合物以外，還含有黃酮類、木脂素類、二萜類等多種化合物。祖師麻在臨床上主要應(yīng)用于抗炎、鎮(zhèn)痛以及抗瘧疾等方面。近年來通過進一步的研究發(fā)現(xiàn)祖師麻在抗腫瘤以及治療腎小球腎炎等方面也有著顯著的功效。現(xiàn)市售的成藥主要包括祖師麻片、祖師麻風(fēng)濕膏、祖師麻關(guān)節(jié)止痛膏、祖師麻膠囊、祖師麻注射液等。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種從干燥的祖師麻中分離得到的一種具有內(nèi)皮細(xì)胞保護作用的二萜類化合物及其制備方法。本專利技術(shù)的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(Ⅰ)，所述的化合物(Ⅰ)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將干燥的祖師麻粉碎，用80～90％乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10％乙醇洗脫6個柱體積，再用80％乙醇洗脫8個柱體積，收集80％乙醇洗脫液，減壓濃縮得80％乙醇洗脫物浸膏；(c)步驟(b)中80％乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、50:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；(d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；(e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75％的甲醇水溶液等度洗脫，收集8～10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(Ⅰ)。進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為85％。一種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物(Ⅰ)和藥學(xué)上可接受的載體。所述的化合物(Ⅰ)在制備內(nèi)皮細(xì)胞保護的藥物中的應(yīng)用。所述的藥物組合物在制備內(nèi)皮細(xì)胞保護的藥物中的應(yīng)用。本專利技術(shù)化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物組合物含有治療有效量的本專利技術(shù)化合物(Ⅰ)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料以及藥物制品輔劑。將本專利技術(shù)的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本專利技術(shù)藥物可通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。附圖說明圖1為化合物(Ⅰ)結(jié)構(gòu)式；圖2為化合物(Ⅰ)理論ECD值與實驗ECD值比較。具體實施方式下面結(jié)合實施例進一步說明本專利技術(shù)的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本專利技術(shù)保護范圍。盡管參照較佳實施例對本專利技術(shù)作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對本專利技術(shù)的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本專利技術(shù)技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。實施例1：化合物(Ⅰ)分離制備及結(jié)構(gòu)確證試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。經(jīng)鑒定購買的祖師麻為瑞香科(Thymelaeaceae)植物黃瑞香(DaphnegiraldiiNitsche)的干燥莖皮。制備方法：(a)將干燥的祖師麻(8kg)粉碎，用85％乙醇熱回流提取(25L×3次)，合并提取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3L×3次)、乙酸乙酯(3L×3次)和水飽和的正丁醇(3L×3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(359g)和正丁醇萃取物；(b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10％乙醇洗脫6個柱體積，再用80％乙醇洗脫8個柱體積，收集80％乙醇洗脫液，減壓濃縮得80％乙醇洗脫物浸膏(138g)；(c)步驟(b)中80％乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1(8個柱體積)、50:1(8個柱體積)、35:1(6個柱體積)、15:1(8個柱體積)和1:1(5個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；(d)步驟(c)中組分4(32g)用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1(8個柱體積)、15:1(10個柱體積)和5:1(6個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；(e)步驟(d)中組分2(17g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75％的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(Ⅰ)(29mg)。結(jié)構(gòu)確證：無色無定形固體；HR-ESIMS顯示[M+Na]+為m/z351.1618，結(jié)合核磁特征可得分子式為C20H24O4，不飽和度為9。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δH(ppm，DMSO-d6，600MHz)：H-1(5.62，m)，H-2(5.67，m)，H-3(1.73，m)，H-3(2.01，m)，H-5(2.01，d，J＝11.7)，H-6(3.84，d，J＝11.7)，H-6(5.02，m)，H-11(2.09，m)，H-11(2.65，dd，J＝16.0，8.8)，H-12(1.86，m)，H-12(1.93，m)，H-13(2.85，m)，H-14(1.91，m)，H-14(3.04，d，J＝14.8)，H-17(5.16，br，s)，H-17(5.42，br，s)，H-18(0.89，s)，H-19(0.71，s)，H-20(4.78，d，J＝12.2)，H-20(5.03，d，J＝12.2)；核磁共振碳譜數(shù)據(jù)δC(ppm，DMSO-d6，150MHz)：130.8(CH，1-C)，126.2(CH，2-C)，36.7(CH2，3-C)，28.8(C，4-C)，48.3(CH，5-C)，62.2(CH2，6-C)，163.8(C，7-C)，122.5(C，8-C)，161.1(C，9-C)，29.6(C，10-C)，21.9(CH2，11-C)，25.8(CH2，12-C)，38.0(CH，13-C)，28.7(CH2，14-C)，170.2(C，15-C)，147.7(C，16-C)，120.3(CH2，17-C)，32.4(CH3，18-本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(Ⅰ)，

【技術(shù)特征摘要】
1.具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(Ⅰ)，2.權(quán)利要求1所述的化合物(Ⅰ)的制備方法，其特征在于包含以下操作步驟：(a)將干燥的祖師麻粉碎，用80～90％乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10％乙醇洗脫6個柱體積，再用80％乙醇洗脫8個柱體積，收集80％乙醇洗脫液，減壓濃縮得80％乙醇洗脫物浸膏；(c)步驟(b)中80％乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、50:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；(d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：戴明虎，
申請(專利權(quán))人：戴明虎，
類型：發(fā)明
國別省市：安徽;34