一種復合微生物筍肥及其制備方法技術

本發明專利技術公開了一種復合微生物筍肥及其制備方法，具體是一種針對毛竹專用的復合微生物筍肥及其制備方法。該微生物筍肥的原料由深褐芽孢桿菌菌粉，賴氨酸芽孢桿菌菌粉，瑞格鏈霉菌,菌粉，秋田鏈霉菌菌粉，淡黃木霉菌粉，黃腐酸鉀，氨基酸原粉；本發明專利技術中所使用的這5株菌株都是可從土壤中直接分離得到，都具有根跡促生作用，具有解磷，固氮，解鉀作用，可在作物表面、植株內部或土壤中繁殖生長的同時，并定向植物根際分泌某些次生代謝產物，能夠提高植物對養分的吸收、刺激植株生長起到肥料的效果；本發明專利技術微生物筍肥對人、畜安全，屬于環境友好型，本發明專利技術制備方法簡單、成本低、使用簡單。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于微生物肥料
，具體涉及一種復合微生物筍肥及其制備方法。
技術介紹
我國毛竹面積386.83萬hm2，占全國竹林總面積的71.89%,森林總面積的2.13%，對于南方集體林區的生態建設和“三農”增收有重要的意義，施肥作為毛竹林培育的重要技術措施得到更廣泛應用。從竹林對不同養分的需求來看，毛竹對氮的需要量比較多，但土壤中氮的含量卻很低。毛竹對磷的需要量雖然比氮少，但土壤供給量也很少，許多土壤特別是紅壤地區土壤磷含量較低。K通常在土壤中含量較豐富，但也有土壤局部缺K現象。施肥一般都是以氮、磷、鉀肥為主。從肥料的作用效果來看，有機肥與微生物筍肥長期施用可以改良土壤結構，增加土壤通氣性和保水能力，而復合肥和無機肥能直接被根或葉面吸收，雖然見效快，但長期施用或施用不當，易造成地力衰退而使作物減產、品質惡化或對生態環境產生不良影響。因而在過去的幾十年中，大多數學者對毛竹施肥的研究大部分集中在氮、磷、K三要素上，有關微生物肥在毛竹上的應用的研究報導較少。專門針對毛竹的微生物筍肥則未見報道。
技術實現思路
本專利技術所要解決的問題是研制出一種復合微生物筍肥，制備該復合微生物筍肥的原料按重量份為：深褐芽孢桿菌菌粉10-30份，賴氨酸芽孢桿菌菌粉20-40份，瑞格鏈霉菌菌粉20-40份，秋田鏈霉菌菌粉10-30份，淡黃木霉菌粉20-40份，黃腐酸鉀20-60份，氨基酸原粉10-30份；該筍肥復配的菌種特點主要是適應性強，穩定性好，能共生共存，合理利用微生物間的相互作用，配備高技術的生產發酵技術生產出優質的產品。本專利技術中所使用的這5株菌株都是可從土壤中直接分離得到，都具有根跡促生作用，具有解磷，固氮，解鉀作用，可在毛竹根，莖，葉表面或土壤中繁殖生長的同時，并定向毛竹根際分泌某些次生代謝產物，能夠提高毛竹對養分的吸收、刺激其生長起到肥料的效果；本專利技術微生物筍肥對人、畜安全，屬于環境友好型，本專利技術制備方法簡單、使用成本低、使用簡單。另一個目的，提供了一種復合微生物筍肥的制備方法，其具體制備方法，包括以下步驟：步驟一、深褐芽孢桿菌菌粉的制備取出深褐芽孢桿菌保藏管，用營養肉汁固體培養基分別劃平板進行復蘇，30℃培養48小時。在平板下挑取單個菌落接種至裝有營養肉汁固體培養基，在30℃培養箱中培養48小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L深褐芽孢桿菌液體種子培養基的500L發酵罐中，開攪拌120r/min，前12小時通氣量為200L/min，12小時后通氣量為320L/min，30℃培養16-24小時，待總菌含量不低于10億cfu/ml，即可作為深褐芽孢桿菌液體種子；發酵：將上述制備的深褐芽孢桿菌液體種子加至深褐芽孢桿菌固體發酵培養基中，混勻，在淺盤上發酵，堆料厚度為5-10cm，控制發酵溫度為30-40℃，發酵36-48小時，待芽孢含量不低于50億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，粉碎過40目篩，即得到深褐芽孢桿菌菌粉；其中，所述營養肉汁固體培養基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂20g，水1000mL，pH7.2；其中，所述深褐芽孢桿菌液體種子培養基：葡萄糖8g/L，玉米粉10g/L，豆粉10g/L，硫酸鎂0.2g/L，硫酸錳0.1g/L，磷酸二氫鉀0.5g/L，磷酸氫二鈉1.0g/L，pH7.0。各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；其中，深褐芽孢桿菌固體發酵培養基：啤酒糟60%，玉米皮35%，菜粕粉2%，石粉3%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，硫酸錳0.01%，培養基含水量50%-60%。各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。步驟二、賴氨酸芽孢桿菌菌粉的制備取出賴氨酸芽孢桿菌保藏管，用無氮固體培養基分別劃平板進行復蘇，30℃培養72小時。在平板下挑取單個菌落接種至裝有無氮固體培養基，在30℃培養箱中培養72小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L賴氨酸芽孢桿菌種子培養基的500L發酵罐中，開攪拌120r/min，前8小時通氣量為100L/min，8-24小時后通氣量為200L/min，24小時后通氣量為300L/min，30℃培養32-48小時，待總菌數含量不低于20億cfu/ml，即可作為賴氨酸芽孢桿菌種子液；發酵：將上述制備的賴氨酸芽孢桿菌種子液以10%-20%的比例接種至賴氨酸芽孢桿菌固體培養基上，混勻，在淺盤上發酵，堆料厚度為5-10cm，控制發酵溫度為30-40℃，發酵36-48小時，待芽孢含量不低于50億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，粉碎過100目篩，即得到賴氨酸芽孢桿菌菌粉；其中，所述無氮固體培養基：蔗糖10g，磷酸氫二鉀0.2g，硫酸鎂0.2g，氯化鈉0.2g，硫酸鈣0.1g，碳酸鈣5g，瓊脂18g，蒸餾水1000mL，pH7.2；其中，所述賴氨酸芽孢桿菌種子培養基：糖蜜20g/L，玉米淀粉10g/L，花生粕粉30g/L，硫酸鎂0.4g/L，硫酸錳0.6g/L，磷酸二氫鉀0.6g/L，碳酸鈣10g/L，pH7.0。各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；賴氨酸芽孢桿菌固體培養基：玉米酒糟57%，麩皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，培養基含水量50%-60%。各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。步驟三，瑞格鏈霉菌菌粉的制備取出瑞格鏈霉菌菌種保藏管，用高氏一號固體培養基劃平板進行復蘇，30℃培養7天。在平板下挑取單個菌落劃線接種裝有150毫升高氏一號固體培養基的茄子瓶中，在培養箱中30℃培養6-8天，待菌苔長滿茄子瓶，產生大量孢子粉即可用500毫升的無菌生理鹽水洗脫，調節孢子濃度為0.1億cfu/ml，即為瑞格鏈霉菌種子液；發酵：將上述制備的瑞格鏈霉菌種子液以3%的接種量接種至滅菌的瑞格鏈霉菌固體發酵培養基上，菌種與瑞格鏈霉菌固體培養基混合均勻后，將接好種的瑞格鏈霉菌固體發酵培養基攤在發酵槽上，物料高度為3-6cm，控溫28-32℃，第一天空氣濕度保持為60%-75%，過后空氣濕度保持為40%-50%，發酵3-4天，檢測其孢子含量不低于20億CFU/g，即可低溫風干至水分低于8%，粉碎過40目篩，即得到瑞格鏈霉菌菌粉；其中，所述的高氏一號固體培養基：硝酸鉀：1克，可溶性淀粉：20克，磷酸氫二鉀：0﹒5克，硫酸鎂：0﹒5克，氯化鈉：0﹒5克，硫酸亞鐵：0﹒01克，瓊脂：20克，蒸餾水補足1000ml，PH7﹒2～7﹒4；其中，所述的瑞格鏈霉菌固體發酵培養基：甘蔗渣80%，豆粕2%，玉米芯粉1%，石粉10%，麩皮7%，硫酸錳0.004%，磷酸氫二鉀0.1%，硫酸鎂0.05%，固體培養基含水量為40%-60%。各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。步驟四，秋田鏈霉菌菌粉的制備取出秋田鏈霉菌菌種保藏管，用高氏一號固體培養基劃平板進行復蘇，30℃培養7天。在平板下挑取單個菌落劃線接種裝有150毫升高氏一號固體培養基的茄本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種復合微生物筍肥，其特征在于，制備該復合微生物筍肥的原料按重量份為：深褐芽孢桿菌菌粉10?30份，賴氨酸芽孢桿菌菌粉20?40份，瑞格鏈霉菌菌粉20?40份，秋田鏈霉菌菌粉10?30份，淡黃木霉菌粉20?40份，黃腐酸鉀20?60份，氨基酸原粉10?30份；其具體制備方法，包括以下步驟：步驟一、深褐芽孢桿菌菌粉的制備取出深褐芽孢桿菌保藏管，用營養肉汁固體培養基分別劃平板進行復蘇，30℃培養48小時，在平板下挑取單個菌落接種至裝有營養肉汁固體培養基，在30℃培養箱中培養48小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L深褐芽孢桿菌液體種子培養基的500L發酵罐中，開攪拌120r/min，前12小時通氣量為200L/min，12小時后通氣量為320L/min?，30℃培養16?24小時，待總菌含量不低于10億cfu/ml，即可作為深褐芽孢桿菌液體種子；發酵：將上述制備的深褐芽孢桿菌液體種子加至深褐芽孢桿菌固體發酵培養基中，混勻，在淺盤上發酵，堆料厚度為5?10cm，控制發酵溫度為30?40℃，發酵36?48小時，待芽孢含量不低于50億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，粉碎過40目篩，即得到深褐芽孢桿菌菌粉；其中，所述營養肉汁固體培養基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂20?g，水1000mL，pH7.2?%；其中，所述深褐芽孢桿菌液體種子培養基：葡萄糖8g/L，玉米粉10?g/L，?豆粉10?g/L，硫酸鎂0.2?g/L，硫酸錳0.1?g/L，磷酸二氫鉀0.5?g/L，磷酸氫二鈉1.0?g/L，pH7.0；其中，深褐芽孢桿菌固體發酵培養基：啤酒糟60%，?玉米皮35%，菜粕粉2%，石粉3%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，硫酸錳0.01%，培養基含水量50%?60%，各培養基滅菌的條件為：0.10?0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；步驟二、賴氨酸芽孢桿菌菌粉的制備取出賴氨酸芽孢桿菌保藏管，用無氮固體培養基分別劃平板進行復蘇，30℃培養72小時，在平板下挑取單個菌落接種至裝有無氮固體培養基，在30℃培養箱中培養72小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L賴氨酸芽孢桿菌種子培養基的500L發酵罐中，開攪拌120r/min，前8小時通氣量為100L/min，8?24小時后通氣量為200L/min?，24小時后通氣量為300L/min?，30℃培養32?48小時，待總菌數含量不低于20億cfu/ml，即可作為賴氨酸芽孢桿菌種子液；發酵：將上述制備的賴氨酸芽孢桿菌種子液以10%?20%的比例接種至賴氨酸芽孢桿菌固體培養基上，混勻，在淺盤上發酵，堆料厚度為5?10cm，控制發酵溫度為30?40℃，發酵36?48小時，待芽孢含量不低于50億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，粉碎過100目篩，即得到賴氨酸芽孢桿菌菌粉；其中，所述無氮培養基：蔗糖10g，磷酸氫二鉀0.2g，硫酸鎂0.2g，氯化鈉0.2g，硫酸鈣0.1g，碳酸鈣5g，瓊脂18g，蒸餾水1000mL，pH7.2；其中，所述賴氨酸芽孢桿菌種子培養基：糖蜜20g/L，玉米淀粉10?g/L，?花生粕粉30?g/L，硫酸鎂0.4?g/L，硫酸錳0.6g/L，磷酸二氫鉀0.6?g/L，碳酸鈣10?g/L，?pH7.0，各培養基滅菌的條件為：0.10?0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；賴氨酸芽孢桿菌固體培養基：玉米酒糟57%，麩皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，培養基含水量50%?60%，各培養基滅菌的條件為：0.10?0.15MPa，121℃滅菌30分鐘?；步驟三，瑞格鏈霉菌菌粉的制備取出瑞格鏈霉菌菌種保藏管，用高氏一號固體培養基劃平板進行復蘇，30℃培養7天，在平板下挑取單個菌落劃線接種裝有150毫升高氏一號固體培養基的茄子瓶中，在培養箱中30℃培養6?8天，待菌苔長滿茄子瓶，產生大量孢子粉即可用500毫升的無菌生理鹽水洗脫，調節孢子濃度為0.1億cfu/ml，即為瑞格鏈霉菌種子液；發酵：將上述制備的瑞格鏈霉菌種子液以3%的接種量接種至滅菌的瑞格鏈霉菌固體發酵培養基上，菌種與瑞格鏈霉菌固體培養基混合均勻后，將接好種的瑞格鏈霉菌固體發酵培養基攤在發酵槽上，物料高度為3?6cm，控溫28?32℃，第一天空氣濕度保持為60%?75%，過后空氣濕度保持為40%?50%，發酵3?4天，檢測其孢子含量不低于20億CFU/g，即可低溫風干至水分低于8%，粉碎過40目篩，即得到瑞格鏈霉菌菌粉；其中，所述的高氏一號固體培養基：硝酸鉀：1克，可溶性淀粉：20克，磷酸氫二鉀：0.5克，硫酸鎂：0.5克，氯化鈉：0.5克，硫酸亞鐵：0.01克，瓊...

【技術特征摘要】
1.一種復合微生物筍肥，其特征在于，制備該復合微生物筍肥的原料按重量份為：深褐芽孢桿菌菌粉10-30份，賴氨酸芽孢桿菌菌粉20-40份，瑞格鏈霉菌菌粉20-40份，秋田鏈霉菌菌粉10-30份，淡黃木霉菌粉20-40份，黃腐酸鉀20-60份，氨基酸原粉10-30份；其具體制備方法，包括以下步驟：步驟一、深褐芽孢桿菌菌粉的制備取出深褐芽孢桿菌保藏管，用營養肉汁固體培養基分別劃平板進行復蘇，30℃培養48小時，在平板下挑取單個菌落接種至裝有營養肉汁固體培養基，在30℃培養箱中培養48小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L深褐芽孢桿菌液體種子培養基的500L發酵罐中，開攪拌120r/min，前12小時通氣量為200L/min，12小時后通氣量為320L/min，30℃培養16-24小時，待總菌含量不低于10億cfu/ml，即可作為深褐芽孢桿菌液體種子；發酵：將上述制備的深褐芽孢桿菌液體種子加至深褐芽孢桿菌固體發酵培養基中，混勻，在淺盤上發酵，堆料厚度為5-10cm，控制發酵溫度為30-40℃，發酵36-48小時，待芽孢含量不低于50億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，粉碎過40目篩，即得到深褐芽孢桿菌菌粉；其中，所述營養肉汁固體培養基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂20g，水1000mL，pH7.2%；其中，所述深褐芽孢桿菌液體種子培養基：葡萄糖8g/L，玉米粉10g/L，豆粉10g/L，硫酸鎂0.2g/L，硫酸錳0.1g/L，磷酸二氫鉀0.5g/L，磷酸氫二鈉1.0g/L，pH7.0；其中，深褐芽孢桿菌固體發酵培養基：啤酒糟60%，玉米皮35%，菜粕粉2%，石粉3%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，硫酸錳0.01%，培養基含水量50%-60%，各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；步驟二、賴氨酸芽孢桿菌菌粉的制備取出賴氨酸芽孢桿菌保藏管，用無氮固體培養基分別劃平板進行復蘇，30℃培養72小時，在平板下挑取單個菌落接種至裝有無氮固體培養基，在30℃培養箱中培養72小時，用3000ml無菌水將三個茄子瓶中的菌苔洗脫，接種至裝有300L賴氨酸芽孢桿菌種子培養基的500L發酵罐中，開攪拌120r/min，前8小時通氣量為100L/min，8-24小時后通氣量為200L/min，24小時后通氣量為300L/min，30℃培養32-48小時，待總菌數含量不低于20億cfu/ml，即可作為賴氨酸芽孢桿菌種子液；發酵：將上述制備的賴氨酸芽孢桿菌種子液以10%-20%的比例接種至賴氨酸芽孢桿菌固體培養基上，混勻，在淺盤上發酵，堆料厚度為5-10cm，控制發酵溫度為30-40℃，發酵36-48小時，待芽孢含量不低于50億cfu/g，即可曬干，待水分含量低于10%，粉碎過100目篩，即得到賴氨酸芽孢桿菌菌粉；其中，所述無氮培養基：蔗糖10g，磷酸氫二鉀0.2g，硫酸鎂0.2g，氯化鈉0.2g，硫酸鈣0.1g，碳酸鈣5g，瓊脂18g，蒸餾水1000mL，pH7.2；其中，所述賴氨酸芽孢桿菌種子培養基：糖蜜20g/L，玉米淀粉10g/L，花生粕粉30g/L，硫酸鎂0.4g/L，硫酸錳0.6g/L，磷酸二氫鉀0.6g/L，碳酸鈣10g/L，pH7.0，各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；賴氨酸芽孢桿菌固體培養基：玉米酒糟57%，麩皮35%，棉粕5%，石粉1%，粗玉米皮2%，尿素0.4%，磷酸氫二鉀0.4%，硫酸鎂0.05%，培養基含水量50%-60%，各培養基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；步驟三，瑞格鏈霉菌菌粉的制備取出瑞格鏈霉菌菌種保藏管，用高氏一號固體培養基劃平板進行復蘇，30℃培養7天，在平板下挑取單個菌落劃線接種裝有150毫升高氏一號固體培養基的茄子瓶中，在培養箱中30℃培養6-8天，待菌苔長滿茄子瓶，產生大量孢子粉即可用500毫升的無菌生理鹽水洗脫，調節孢子濃度為0.1億cfu/ml，即為瑞格鏈霉菌種子液；發酵：...

【專利技術屬性】
技術研發人員：蔣常德，胡艷暉，
申請(專利權)人：佛山市艷暉生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：廣東;44