一種新型的對映異構體的手性識別方法技術

本發明專利技術涉及分析檢測領域，具體涉及到一種新型的對映異構體的手性識別方法。針對現有的對映異構體手性識別方法常需要添加手性選擇劑或衍生化試劑，操作繁瑣，耗時長，或使用精密儀器，分析成本高等問題，本發明專利技術通過測量對映異構體在非手性溶劑中高濃度溶液的紫外?可見吸收光譜，根據吸收光譜的差異，實現對映異構體的手性識別。本發明專利技術的方法?不需要添加任何手性選擇劑或衍生化試劑，樣品無需進行繁瑣的前處理，僅使用紫外?可見分光光度計測量紫外?可見吸收光譜，操作簡便、快速，靈敏、準確、成本低，便于推廣應用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及分析檢測領域，具體涉及到一種新型的對映異構體的手性識別方法。
技術介紹
手性是自然界中一種普遍的現象。對映異構體的手性識別及分析在生物、化學、醫藥等很多領域都具有重要的意義。常用的對映異構體手性識別及分析方法有：圓二色譜法、旋光度法、色譜法、毛細管電泳法等。前兩種方法是基于偏振光的應用的方法。色譜法（氣相色譜法、高效液相色譜法、薄層色譜法）和毛細管電泳法是以拆分為基礎的分析方法。色譜法利用手性固定相來分離對映異構體后進行測定，或是使用非手性固定相，并在流動相中加入手性選擇劑，將對映異構體轉化為理化學性質不同的非對映異構體，再進行分離、測定。毛細管電泳法分析對映異構體亦需在緩沖液中加入手性添加劑。手性試劑往往價格昂貴，增加了分析的成本。而且，這些方法常常操作繁瑣，需要較多的樣品前處理，費時。報道過的手性識別及分析的光譜方法有：核磁共振光譜法、紫外吸收光譜法、紫外-可見吸收光譜法、傅里葉變換紅外光譜法、熒光光譜法等。它們也需要加入手性選擇劑或衍生化試劑，將對映異構體轉化為理化性質不同的非對映異構體后進行分析。傅里葉變換紅外漫反射光譜法、太赫茲時間域光譜法應用于手性分析時無需使用手性選擇劑或衍生化試劑。但前者需要添加溴化鉀與樣品一起研磨混勻；后者常需添加氧化鎂與樣品一起研磨混勻，還容易受到樣品、空氣中的水分的嚴重干擾。近年，等溫滴定微量熱法應用于手性識別的研究亦多有報道。但該方法使用精密昂貴的儀器，一般的實驗室還沒能普及。因此，開發簡便、快速、成本低、不需要添加手性選擇劑或衍生化試劑的手性識別方法具有積極的意義。紫外-可見吸收光譜法是一種快速、簡便、準確的分析方法，已廣泛用于普通實驗室。然而，迄今普遍認為：在非手性環境和條件下，對映異構體溶液的紫外-可見吸收光譜是相同的,不具有手性區分效應。在不使用手性選擇劑或衍生化試劑的條件下，應用紫外-可見吸收光譜技術進行對映異構體的手性識別或分析的方法還未見研究報道。
技術實現思路
針對傳統的色譜法、毛細管電泳法和光譜法常需要添加手性選擇劑或衍生化試劑，常需要繁瑣的樣品前處理，耗時長，分析成本高等缺點，本專利技術一種新型的對映異構體的手性識別方法。原理是基于本方法首次發現的對映異構體在非手性溶劑中的高濃度溶液的紫外-可見吸收光譜的手性區分效應。本專利技術所建立的對映異構體的手性識別方法具有操作簡便、快速，靈敏，準確，成本低的優點。在沒有其他特別說明的情況下，對本申請相關文件中出現的名詞做出如下約定：高濃度：指對映異構體的紫外-可見吸收光譜出現明顯差異時的溶液濃度。此濃度常高于遵守朗伯-比爾定律的稀溶液的濃度，如近飽和的溶液。本專利技術的方法由下列技術方案組成：使用非手性溶劑配制對映異構體樣品的高濃度溶液，不添加任何手性選擇劑或衍生化試劑，然后采集溶液的紫外-可見吸收光譜，比較對映異構體溶液的吸收光譜的差異。本專利技術的方法的具體實施步驟如下：使用非手性溶劑（如水、無水乙醇、二甲亞砜、甲酸），配制對映異構體樣品的高濃度溶液。使用紫外-可見分光光度計，石英比色皿，以對應的溶劑為參比，采集對映異構體溶液的紫外-可見吸收光譜。本專利技術一種新型的對映異構體的手性識別方法的有益效果是：無需手性選擇劑或衍生化試劑、無需繁瑣的樣品前處理，操作簡便、快速，靈敏，準確，成本低，便于推廣應用。附圖說明圖1，a：D-、L-酒石酸水溶液紫外-可見吸收光譜，相應的差譜（D-L）；b：酒石酸異構體水溶液吸收光譜對波長積分的面積隨濃度變化曲線；圖2：D-、L-酒石酸無水乙醇溶液紫外-可見吸收光譜，相應的差譜（D-L）；圖3：D-、L-酒石酸二甲亞砜溶液紫外-可見吸收光譜，相應的差譜（D-L）；圖4，a：D-、L-色氨酸無水甲酸溶液紫外-可見吸收光譜，相應的差譜（D-L）；b：色氨酸異構體無水甲酸溶液吸收光譜對波長積分的面積隨濃度變化曲線；圖5，a：D-、L-脯氨酸水溶液紫外-可見吸收光譜，相應的差譜（D-L）；b：脯氨酸異構體水溶液吸收光譜對波長積分的面積隨濃度變化曲線；圖6，a：D-、L-丙氨酸水溶液紫外-可見吸收光譜，相應的差譜（D-L）；b：丙氨酸異構體水溶液吸收光譜對波長積分的面積隨濃度變化曲線；具體實施例子酒石酸對映異構體制備0.00666mol?L-1、0.03331mol?L-1、0.06663mol?L-1、0.33313mol?L-1、0.66627mol?L-1、1.33253mol?L-1、1.99880mol?L-1、2.66507mol?L-1、3.33133mol?L-1、3.99760mol?L-1的D-和L-酒石酸水溶液：分別精密稱取0.025g、0.125g、0.25g、1.25g、2.5g、5g、7.5g、10g、12.5g和15gD-酒石酸和L-酒石酸（成都市科龍試劑有限公司、D-酒石酸和L-酒石酸純度≥99.5%），轉移至25ml容量瓶中，加適量水溶解，定容至刻度。制備0.01333mol?L-1、0.6663mol?L-1的D-和L-酒石酸無水乙醇溶液：分別精密稱取0.05g、2.5gD-酒石酸和L-酒石酸（試劑規格、廠商同上），轉移至25ml容量瓶中，加適量無水乙醇溶解，定容至刻度。制備0.01333mol?L-1、1.3325mol?L-1的D-和L-酒石酸二甲亞砜溶液：分別精密稱取0.05g、5gD-酒石酸和L-酒石酸（試劑規格、廠商同上），轉移至25ml容量瓶中，加適量二甲亞砜溶解，定容至刻度。使用北京瑞利UV-2100紫外-可見分光光度計、1cm光程的石英比色皿，以相應的溶劑（水、無水乙醇、二甲亞砜）為參比溶液，采集上述樣品溶液的紫外-可見吸收光譜，見圖1、圖2和圖3。由圖1a可見，低濃度（0.00666mol?L-1）時，D-和L-酒石酸的紫外-可見吸收光譜完全重疊，它們的差譜（D-L線）顯示幾乎為零的水平線；但隨著濃度的增大，對映異構體的最大吸收均發生紅移，并且在整個光譜區D-酒石酸的吸收強度大于L-酒石酸。當濃度增大到3.99760mol?L-1時，對映異構體的吸收曲線的差異非常明顯，尤其是在右邊峰腳處。它們差譜的最大吸收峰出現在它們各自最大吸收峰的右緣急降處。圖1b是D-和L-酒石酸水溶液的吸收光譜對波長積分的面積隨濃度變化曲線。由圖可見，低濃度時D-和L-酒石酸的吸收曲線積分面積相同，但隨著濃度的增大，積分面積的差異明顯增大，且D型異構體的積分面積明顯大于L型異構體的。圖2是D-、L-酒石酸無水乙醇溶液紫外-可見吸收光譜，及相應的差譜（D-L）。由圖可見，低濃度時D-和L-酒石酸的紫外-可見吸收光譜幾乎重疊；高濃度時，對映異構體的最大吸收均發生紅移，D型異構體的吸收大于L型異構體的。圖3是D-、L-酒石酸二甲亞砜溶液紫外-可見吸收光譜，及相應的差譜（D-L）。由圖可見，低濃度時D-和L-酒石酸二甲二甲亞砜溶液的紫外-可見吸收光譜均很小，幾乎重疊；高濃度時，D-酒石酸的吸收明顯增強，而L-酒石酸出現負峰，它們的差譜為很強的正峰。可見，高濃度下，酒石酸的水溶液、無水乙醇溶液、二甲亞砜溶液的紫外-可見吸收光譜具有手性區分效應。在所用的溶劑中的溶解度越大，配得的溶液濃度越高，紫外-可見吸收光譜的差異就越大。色氨酸對映異構體制備0.00245m本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種新型的對映異構體的手性識別方法，原理是基于本方法首次發現的對映異構體在非手性溶劑中的高濃度溶液的紫外?可見吸收光譜的手性區分效應，其特征在于整個方法是在非手性溶劑中測定對映異構體高濃度溶液的紫外?可見吸收光譜，不使用任何的手性選擇劑或衍生化試劑，操作簡便、快速，靈敏，準確，成本低。

【技術特征摘要】
1.一種新型的對映異構體的手性識別方法，原理是基于本方法首次發現的對映異構體在非手性溶劑中的高濃度溶液的紫外-可見吸收光譜的手性區分效應，其特征在于整個方法是在非手性溶劑中測定對映異構體高濃度溶液的紫外-可見吸收光譜，不使用任何的手性選擇劑或衍生化試劑，操作簡便、快速，靈敏，準確，成本低。2.根據權利要求1所述的一種新型的對映異構體的手性識別方法，其特征在于：使用非手性溶劑配制對映異構體的樣品溶液。3....

【專利技術屬性】
技術研發人員：梁冰，陸曉梅，唐杰，
申請(專利權)人：四川大學，
類型：發明
國別省市：四川;51