絲素蛋白改性凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球及制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了絲素蛋白改性凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球及制備方法，制備方法為：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成溶液1；(2)將疏水性藥物與溶液1混合，得到溶液2；(3)將溶液2加入到攪拌下的聚乙烯醇水溶液中；(4)繼續(xù)攪拌，離心，去上清，用去離子水洗；冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球；(5)將絲素蛋白水溶液與凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球混合均勻，離心，去除上清液，加入戊二醛水溶液，交聯(lián)，離心，冷凍干燥。本發(fā)明專利技術(shù)的載藥微球，粒徑分布均一，制備方法簡便。載藥微球結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，藥物釋放緩慢，其表面的絲素蛋白膜能改善其表面的親水性能及材料結(jié)構(gòu)強(qiáng)度，有效延緩釋放速率，延長釋放時(shí)間。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球、凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球及絲素蛋白改性凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球。
技術(shù)介紹
可降解類聚合物藥物載體在全身及局部藥物遞送領(lǐng)域受到越來越廣泛地關(guān)注，而通過物理吸附或自組裝的方法對藥物載體進(jìn)行表面修飾，則可進(jìn)一步賦予其獨(dú)特的理化及生物學(xué)特性。如對白蛋白納米粒子表面進(jìn)行聚賴氨酸改性后可有效抑制酶的降解(Singh,H.D.；Wang,G.；Uludag,H.；Unsworth,L.D.ActaBiomater2010,6,4277)；在眼部給藥中，通過絲素蛋白或殼聚糖表面改性后的脂質(zhì)體，其釋藥穩(wěn)定性及藥物滲透性都得到了明顯改善(1、Dong,Y.；Dong,P.；Huang,D.；Mei,L.；Xia,Y.；Wang,Z.；Pan,X.；Li,G.；Wu,C.EupJPharmBiopharm2015,91,82；2、Li,N.；Zhuang,C.Y.；Wang,M.；Sui,C.G.；Pan,W.S.DrugDeliv2012,19,28)。通過增加載藥體系表面粗糙程度，更有利細(xì)胞的粘附；通過對聚合物類藥物遞送系統(tǒng)表面化學(xué)修飾及無機(jī)納米粒子雜化，可有效延緩藥物釋放速率、賦予其靶向遞送功能及雜化納米粒子引入的光學(xué)或磁學(xué)特性。因此，基于聚合物的藥物遞送系統(tǒng)的表面修飾以及新型緩釋制劑在生物醫(yī)藥領(lǐng)域十分必要。乳酸基聚合物因其良好的生物相容性及可降解性被廣泛應(yīng)用于藥物控/緩釋體系，其中以聚乳酸(PLA)和聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)為基質(zhì)的生物材料已被廣泛應(yīng)用于臨床。與靜脈給藥的納米粒子相比，乳酸基聚合物微球常被應(yīng)用于局部給藥中。在牙周組織再生和牙槽骨的重建中，載辛伐他汀PLGA緩釋微球在局部給藥時(shí)，由于他汀類藥物的促成骨能力，無論配合或未配合治療性蛋白，均能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化及新骨的形成(1、Nishimura,K.TheJournaloftheStomatologicalSociety,Japan2008,75,49；2、Naito,Y.；Terukina,T.；Galli,S.；Kozai,Y.；Vandeweghe,S.；Tagami,T.；Ozeki,T.；Ichikawa,T.；Coelho,P.G.；Jimbo,R.IntJPharm2014,461,157)。然而，藥物的突釋行為、PLGA本身疏水特性及其酸性降解產(chǎn)物導(dǎo)致的無菌性炎癥卻極大的限制了藥物緩釋制劑的臨床應(yīng)用(Win,K.Y.；Feng,S.S.Biomaterials2005,26,2713)。通過增加PLGA材料表面的凹坑或突起，可增強(qiáng)其表面粗糙程度，從而更有利于細(xì)胞的粘附，或通過使用蛋白對其進(jìn)行表面改性，從而豐富其理化特性，彌補(bǔ)材料本身缺陷。絲素蛋白由于其良好的生物相容性、可降解性及優(yōu)異的力學(xué)性質(zhì)被廣泛的應(yīng)用于藥物載體及組織工程研究。在藥物遞送系統(tǒng)研究中，絲素蛋白微粒、微囊或藥物載體表面修飾的絲素蛋白涂層，既可有效延緩藥物釋放速率，也可賦予其絲素蛋白的營養(yǎng)特性，促進(jìn)細(xì)胞增殖(1、Wang,X.；Wenk,E.；Hu,X.；Castro,G.R.；Meinel,L.；Wang,X.；Li,C.；Merkle,H.；Kaplan,D.L.Biomaterials2007,28,4161；2、Wang,X.；Wenk,E.；Matsumoto,A.；Meinel,L.；Li,C.；Kaplan,D.L.JControlledRelease2007,117,360.)。在組織工程領(lǐng)域，通過絲素蛋白改性的PLGA支架，其對細(xì)胞的粘附及增殖均有明顯的改善。而且，由于引入絲素蛋白，可中和PLGA酸性降解產(chǎn)物，從而使支架酸性環(huán)境所致炎癥反應(yīng)降低，更有利于組織再生(Ju,H.W.；Sheikh,F.A.；Moon,B.M.；Park,H.J.；Lee,O.J.；Kim,J.H.；Eun,J.J.；Khang,G.；Park,C.H.JBiomedMaterResA.2014,102,2713)。載萬古霉素聚己內(nèi)酯緩釋微球通過絲素蛋白表面改性后，既減少了突釋，也延長了藥物釋放時(shí)間(Zhou,J.；Fang,T.；Wen,J.；Shao,Z.；Dong,J.JMicroencapsul2011,28,99)。然而，無論是絲素蛋白體還是絲素蛋白修飾的材料表面，常使用高濃度的有機(jī)溶劑如甲醇、乙醇常作為絲素變性劑，使絲素蛋白從無規(guī)卷曲態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的β折疊結(jié)構(gòu)。對于萬古霉素等親水性藥物而言，制備過程中的甲醇或乙醇不會(huì)使親水性藥物溶出，甚至起到保護(hù)作用，因此對載藥系統(tǒng)影響較小。然而，對于他汀類藥物等疏水性藥物，如辛伐他汀等，易溶于乙醇等有機(jī)溶劑，使用高濃度甲醇或乙醇溶劑極易導(dǎo)致疏水性藥物溶出，甚至載藥微粒崩解，破壞緩釋制劑。因此，以戊二醛直接交聯(lián)方法對載疏水性藥物的凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球進(jìn)行絲素蛋白表面改性，并應(yīng)用于局部藥物緩釋制劑還未見報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球。本專利技術(shù)的第二個(gè)目的是提供一種凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球。本專利技術(shù)的第三個(gè)目的是提供一種絲素蛋白改性凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球。本專利技術(shù)的技術(shù)方案概述如下：凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球，用下述方法制成：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成濃度為5-20mg/mL的溶液1；(2)將溶液1加入到攪拌速度為400-1000rpm下的質(zhì)量濃度為0.5-2％聚乙烯醇水溶液中，所述溶液1與聚乙烯醇水溶液體積比為1：5-10；(3)繼續(xù)攪拌2-4小時(shí)，離心，去上清，用去離子水洗，冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球。乳酸基聚合物優(yōu)選重均分子量為10000–50000的聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸。凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球，用下述方法制成：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成濃度為5-20mg/mL的溶液1；(2)按0.5-4mg/mL的比例，將疏水性藥物與溶液1混合，得到溶液2；(3)將溶液2加入到攪拌速度為400-1000rpm下的質(zhì)量濃度為0.5-2％聚乙烯醇水溶液中，所述溶液2與聚乙烯醇水溶液體積比為1：5-10；(4)繼續(xù)攪拌2-4小時(shí)，離心，去上清，用去離子水洗，冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球。乳酸基聚合物優(yōu)選重均分子量為10000–50000的聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸。疏水性藥物優(yōu)選辛伐他汀、洛伐他汀、阿司匹林或紫杉醇等其他可溶于甲醇或乙醇的化學(xué)藥物。絲素蛋白改性凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球的制備方法，包括如下步驟：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成濃度為5-20mg/mL的溶液1；(2)按0.5-4mg/mL的比例，將疏水性藥物與溶液1混合，得到溶液2；(3)將溶液2加入到攪拌速度為400-1000rpm下的質(zhì)量濃度為0.5-2％聚乙烯醇水溶液中，所述溶液2與聚乙烯醇水溶液體積比為1：5-10；(4)繼續(xù)攪拌2-4小時(shí)，離心，去上清，用去離子水洗；冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球；(5)按質(zhì)量比為1：1-10的比例，將0.5-2mg/mL絲素蛋白水溶液與凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球混合均勻，離心，去除上本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球，其特征是用下述方法制成：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成濃度為5?20mg/mL的溶液1；(2)將溶液1加入到攪拌速度為400?1000rpm下的質(zhì)量濃度為0.5?2％聚乙烯醇水溶液中，所述溶液1與聚乙烯醇水溶液體積比為1：5?10；(3)繼續(xù)攪拌2?4小時(shí)，離心，去上清，用去離子水洗，冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球。

【技術(shù)特征摘要】
1.凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球，其特征是用下述方法制成：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成濃度為5-20mg/mL的溶液1；(2)將溶液1加入到攪拌速度為400-1000rpm下的質(zhì)量濃度為0.5-2％聚乙烯醇水溶液中，所述溶液1與聚乙烯醇水溶液體積比為1：5-10；(3)繼續(xù)攪拌2-4小時(shí)，離心，去上清，用去離子水洗，冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物微球，其特征在于乳酸基聚合物為重均分子量為10000–50000的聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸。3.凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球，其特征是用下述方法制成：(1)將乳酸基聚合物溶于二氯甲烷中，制成濃度為5-20mg/mL的溶液1；(2)按0.5-4mg/mL的比例，將疏水性藥物與溶液1混合，得到溶液2；(3)將溶液2加入到攪拌速度為400-1000rpm下的質(zhì)量濃度為0.5-2％聚乙烯醇水溶液中，所述溶液2與聚乙烯醇水溶液體積比為1：5-10；(4)繼續(xù)攪拌2-4小時(shí)，離心，去上清，用去離子水洗，冷凍干燥，得到凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的凹坑結(jié)構(gòu)乳酸基聚合物載藥微球，其特征在于乳酸基聚合物為重均分子量為10000–50000的聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乳酸。5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的凹坑結(jié)構(gòu)乳...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：喬峰，張俊江，周志敏，
申請(專利權(quán))人：天津醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：天津;12