一種抗大白菜根腫病的自交系選育方法技術

本發(fā)明專利技術公開了一種抗大白菜根腫病的自交系選育方法，包括浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉步驟，即春季首先將F2代抗根腫病育種材料進行浸種催芽、春化處理，之后采用菌土法接種鑒定，鑒定后選出抗病單株定植到花盆中，正常栽培管理，植株抽薹開花后，自交授粉，采種；下一年春季繼續(xù)進行浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉，經(jīng)過3?5代的選擇，即可選育出性狀整齊一致、抗根腫病的大白菜自交系。本發(fā)明專利技術可提高選擇效率、加快育種進程。

【技術實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術屬于大白菜雜種優(yōu)勢利用
，具體涉及一種大白菜抗根腫病自交系培育方法。
技術介紹
大白菜原產(chǎn)于我國，是深受人民喜愛的蔬菜作物之一。隨著人民生活水平的日益提高，人民對大白菜的品質(zhì)、抗性和生育期等方面提出了更高的要求；同時氣候的變化，病害的發(fā)展，給大白菜科研、生產(chǎn)提出了許多新問題。特別是近年來大白菜根腫病發(fā)生日趨嚴重，成為限制大白菜產(chǎn)量和品質(zhì)提高的重要因素。大白菜根腫病是由蕓薹根腫菌（Plasmodiophorabrassicae）引起的十字花科作物上的重要病害。該病為土傳病害，發(fā)病后導致大白菜嚴重減產(chǎn)，造成重大經(jīng)濟損失，成為生產(chǎn)中的一大難題。近年，研究專家開展抗根腫病大白菜育種研究，主要通過常規(guī)轉(zhuǎn)育和鑒定方法轉(zhuǎn)育抗病材料。傳統(tǒng)的抗根腫病自交系選育方法一般采用2種方法，一種是母株采種法，另一種是小株采種法；①母株采種法秋季在病圃栽培，在田間自然通過春化，選擇抗病植株，拔取母株，冬季窖貯，翌年春季定植、授粉的方法。這種方法效率較低，首先需要很大面積的病圃，按照株距60厘米，行距42厘米計算，平均每株占地面積2520平方厘米，不適宜大批量選育，窖貯、定植后，植株會有一部分腐爛掉；另一方面從鑒定到采下種子需要大約9個月的時間。②小株采種法將上一代采收的種子一分二份，一份用于接種鑒定，一份用于春化處理。接種鑒定結束后，選取抗病株系剩余的種子進行春化處理，自交授粉。對于一份抗病性3:1分離的株系來說，采用這種方法為獲得抗病的植株，按照計算公式，需要定植16株才能保證選取到純和抗病基因型的植株。從鑒定到采下種子需要大約7.5個月的時間。右上可知，利用常規(guī)育種方法選育材料周期長，獲得純系慢，且目前仍缺乏抗根腫病的優(yōu)異大白菜自交系和性狀優(yōu)良的抗根腫病大白菜品種。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術就是針對上述問題，提供一種可提高選擇效率、加快育種進程的抗大白菜根腫病的自交系選育方法，本專利技術的技術思路是通過對雜合的F2代抗根腫病育種材料進行春化處理、接種鑒定、自交授粉選育出抗根腫病的大白菜自交系。為實現(xiàn)上述目的，本專利技術采用如下技術方案，本專利技術包括浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉步驟，即春季首先將F2代抗根腫病育種材料進行浸種催芽、春化處理，之后采用菌土法接種鑒定，鑒定后選出抗病單株定植到花盆中，正常栽培管理，植株抽薹開花后，自交授粉，采種；下一年春季繼續(xù)進行浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉，經(jīng)過3-5代的選擇，即可選育出性狀整齊一致、抗根腫病的大白菜自交系。優(yōu)選地，本專利技術所述的一種抗大白菜根腫病的自交系選育方法，每一代自交系選育方法包括如下步驟：S1、浸種催芽：通常在1月上中旬進行，即將需處理的種子放入鋪墊脫脂棉和濾紙的培養(yǎng)皿中，先用30℃左右的清水浸種2～3h，然后在室溫下（30℃左右）催芽12～24小時，以大部分種子胚根突破種皮為準，然后放入冰箱開始春化處理；S2、春化處理：冰箱溫度控制在0～3℃，每隔2d用清水沖洗一次，春化處理20～25d，經(jīng)春化處理的種子一般胚根長1～1.5cm,種皮大多已脫落；S3、接種鑒定：（1）菌源：秋季采集的大白菜根腫病病根，置于-20℃保存，采用Williams系統(tǒng)鑒定為4號生理小種；（2）采用菌土置入法接種病菌：a、接種體制備，將帶有根腫病菌的病根緩凍后打碎，用研缽研磨成勻漿，過濾后靜置2h，加到篩過的風干草炭土中拌勻接種，每克風干草炭土中含0.05g病根，其含水量以手握成團、觸之則散為宜，25℃密封48h；B、穴盤試驗方法，培養(yǎng)土按草炭、土、珍珠巖1:1:1配制裝入32孔穴盤，灌足底水，每穴中心用實心棒插一深3cm，直徑2cm的圓柱形孔，置入病菌土；再將參試和對照品種分別播種，3～5粒種子/穴；播種后，苗床溫度控制在20～25℃，土壤濕度保持在90%。接菌后40d，洗凈白菜根系，調(diào)查根腫病發(fā)病情況，評價抗性；S4、自交授粉：培養(yǎng)土按草炭、土、腐熟牛糞1:1:1配制裝入直徑為21.7cm、高度為21.8cm的花盆里，選取根部完全沒有腫瘤的植株，每個花盆定植1株，每個株系至少定植11盆，灌足水，置于20-25℃，每天12小時以上光照的環(huán)境中生長，約40天左右株抽薹，在開花前套袋隔離，人工自交；授粉后在柱頭有效期內(nèi)繼續(xù)隔離，7-10日后摘袋取消隔離；S5、采種：當植株基部種莢的種皮變褐以后，可將枝條剪下裝入尼龍種子袋中，同時在袋內(nèi)外放置標簽，然后放入風干棚內(nèi)風干，隨即脫粒、貯藏。優(yōu)選地，S5中所述的貯藏環(huán)境通常為溫度低于15℃，空氣相對濕度低于50%。與現(xiàn)有技術相比，本專利技術具有育種效率高的優(yōu)點，即通過春化后，在32孔的穴盤內(nèi)進行接種鑒定，非常節(jié)省空間，每個孔長5.3厘米，寬5.3厘米，通常每孔種植2株，每株占地面積僅為14平方厘米，僅為母株采種法的1/179；鑒定后定植，可以直接淘汰感病植株，對于一份抗病性3:1分離的株系來說，采用這種方法為獲得抗病的植株僅需定植11株抗病植株即可，可比小株采種法少定植5株；并且能保證植株能在春季順利開花授粉，從鑒定到采下種子僅需要大約6個月的時間比母株采種法節(jié)省3個月時間，比小株采種法節(jié)省1.5個月時間。具體實施方式下面結合具體實施例對本專利技術作進一步詳細說明。。實施例：本專利技術首先尋找抗大白菜根腫病的雜交種，之后自交，獲得F2代種子，然后開始下列選育工作：S1、浸種催芽：在1月上中旬將需處理的種子放入鋪墊脫脂棉和濾紙的培養(yǎng)皿中，先用30℃左右的清水浸種2～3h，然后在室溫下（30℃左右）催芽12～24小時，以大部分種子胚根突破種皮為準，然后放入冰箱開始春化處理。S2、春化處理：冰箱溫度控制在0～3℃，每隔2d用清水沖洗一次，春化處理20～25d。經(jīng)春化處理的種子一般胚根長1～1.5cm,種皮大多已脫落。S3、接種鑒定：（1）菌源：秋季采集的大白菜根腫病病根，置于-20℃保存，采用Williams系統(tǒng)鑒定為4號生理小種。（2）采用菌土置入法接種病菌：①接種體制備將帶有根腫病菌的病根緩凍后打碎，用研缽研磨成勻漿，過濾后靜置2h，加到篩過的風干草炭土中拌勻接種(每g風干草炭土中含0.05g病根)，其含水量以手握成團、觸之則散為宜，25℃密封48h。②穴盤試驗方法培養(yǎng)土按草炭、土、珍珠巖1:1:1配制裝入32孔穴盤，灌足底水，每穴中心用實心棒插一深3cm，直徑2cm的圓柱形孔，置入病菌土。再將參試和對照品種分別播種，3～5粒種子/穴。播種后，苗床溫度控制在20～25℃，土壤濕度保持在90%。接菌后40d，洗凈白菜根系，調(diào)查根腫病發(fā)病情況，評價抗性。S4、自交授粉：培養(yǎng)土按草炭、土、腐熟牛糞1:1:1配制裝入21.7厘米（直徑）*21.8厘米（高）花盆。選取根部完全沒有腫瘤的植株，每個花盆定植1株，每個株系至少定植11盆，灌足水，置于20-25℃，每天12小時以上光照的環(huán)境中生長，約40天左右株抽薹，在開花前套袋隔離，人工自交。授粉后在柱頭有效期內(nèi)繼續(xù)隔離，7-10日后摘袋取消隔離。S5、采種：當植株基部種莢的種皮變褐以后，可將枝條剪下裝入尼龍種子袋中，同時在袋內(nèi)外放置標簽，然后放入風干棚內(nèi)風干。隨即脫粒、貯藏。貯藏環(huán)境通常為溫度低于15℃，空氣相對濕度低于50%。采用本專利技術所述的方法，經(jīng)過3-5代的選擇，即可選育出性狀整齊一致、抗根腫病的本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術保護點】
一種抗大白菜根腫病的自交系選育方法，其特征在于：包括浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉步驟，即春季首先將F2代抗根腫病育種材料進行浸種催芽、春化處理，之后采用菌土法接種鑒定，鑒定后選出抗病單株定植到花盆中，正常栽培管理，植株抽薹開花后，自交授粉，采種；下一年春季繼續(xù)進行浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉，經(jīng)過3?5代的選擇，即可選育出性狀整齊一致、抗根腫病的大白菜自交系。

【技術特征摘要】
1.一種抗大白菜根腫病的自交系選育方法，其特征在于：包括浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉步驟，即春季首先將F2代抗根腫病育種材料進行浸種催芽、春化處理，之后采用菌土法接種鑒定，鑒定后選出抗病單株定植到花盆中，正常栽培管理，植株抽薹開花后，自交授粉，采種；下一年春季繼續(xù)進行浸種催芽、春化處理、接種鑒定、自交授粉，經(jīng)過3-5代的選擇，即可選育出性狀整齊一致、抗根腫病的大白菜自交系。2.根據(jù)權利要求1所述的一種抗大白菜根腫病的自交系選育方法，其特征在于：每一代自交系選育方法包括如下步驟：S1、浸種催芽：通常在1月上中旬進行，即將需處理的種子放入鋪墊脫脂棉和濾紙的培養(yǎng)皿中，先用30℃左右的清水浸種2～3h，然后在室溫下（30℃左右）催芽12～24小時，以大部分種子胚根突破種皮為準，然后放入冰箱開始春化處理；S2、春化處理：冰箱溫度控制在0～3℃，每隔2d用清水沖洗一次，春化處理20～25d，經(jīng)春化處理的種子一般胚根長1～1.5cm,種皮大多已脫落；S3、接種鑒定：（1）菌源：秋季采集的大白菜根腫病病根，置于-20℃保存，采用Williams系統(tǒng)鑒定為4號生理小種；（2）采用菌土置入法接種病菌：a、接種體制備，將帶有根腫病菌的病根緩凍后打碎，用研缽研磨...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：王鑫，吳海東，王麗麗，何明，田云，蔣欣陶，李穎，楊曉飛，
申請(專利權)人：遼寧省農(nóng)業(yè)科學院，
類型：發(fā)明
國別省市：遼寧;21