一種楨楠的快速繁殖方法技術

本發明專利技術涉及一種楨楠的快速繁殖方法，屬于樹木繁殖技術領域。本發明專利技術包括外植體的選取與滅菌、芽體的萌發、愈傷組織誘導、分化和增殖培養、生根培養以及煉苗和移栽。本發明專利技術的目的是提供楨楠的快速繁殖方法，非常適合大規模生產，具有配方效果佳，出芽率高，培養時間短，植株生長旺盛，可操作性強，應用價值高的優點。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種喬木的快速繁殖方法，更具體地說，本專利技術涉及一種楨楠的快速繁殖方法，屬于樹木繁殖

技術介紹
楨楠為樟科常綠大喬木，屬于國家二級保護植物，也是中國的特產樹種，并且具有極高的經濟價值。楨楠木材優良，紋理直而結構細密，不易變形和開裂，具芳香氣，為建筑、家具等的珍貴用材。其木材和枝葉含芳香油，蒸餾可得楠木油，是高級香料。同時，該種為高大喬木，樹姿優美，樹干通直，葉終年不謝，是著名的庭園觀賞和城市綠化樹種。楨楠極其珍貴，其生長速度非常慢，一般楨楠長成為棟梁材要上百年。在稀少得不能獲得的今天，為了挽救楨楠不致絕種，早在天然林保護工程實施前的1984年國務院環境保護委員會公布的“珍稀瀕危保護植物名隸”中，楨楠就明顯的列入其中。1999年8月的“重點保護植物名錄”中，再次將楨楠列為保護對象。因此，研究楨楠的快速繁殖方法，不僅可以縮短楨楠的生長周期，加快其成材速度，還可以充實國內在楨楠繁育方面的理論體系，完善楨楠的保護工作。國家知識產權局于2013.12.18公開了一件公開號為CN103444531A，名稱為“一種金絲楠木組織培養的快繁方法”的專利技術，該專利技術涉及一種金絲楠木組織培養的快繁方法，包括以下步驟：（1）選種，預處理、浸泡后放入基質中萌發，待胚分化后轉移培養；（2）取幼嫩萌條作為外植體進行芽誘導培養；（3）取新生的幼嫩苗切段進行生根培養；（4）將不定叢芽接種到增殖培養基中進行增殖培養；（5）將增殖培養獲得的不定叢芽接種到生根培養基中進行生根培養；（6）煉苗與移栽。本專利技術采用幼苗莖段組織生根培養，和不定叢芽誘導增殖培養相結合，合理馴化，循環取材，最大程度的保留了金絲楠木的完整基因組，提高了金絲楠木的成活率和品質，加快了金絲楠木的生長速度。上述現有技術金絲楠木與楨楠有一定區別。另外，先培育種子，再進行組織培養，培育繁殖時間較長；采用的培養基使得成活率較低。
技術實現思路
本專利技術旨在解決現有技術組織培養的問題，提供一種楨楠的快速繁殖方法，采取組織培養，能夠有效縮短楨楠的繁殖時間，提高出芽率和成活率，且培育壯苗。為了實現上述目的，本專利技術采用的技術方案為：一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：包括以下方法步驟：A、外植體的選取與滅菌選用楨楠的嫩莖上芽體作為培養材料，先用自來水沖洗，再用洗衣粉溶液漂洗，再用自來水沖洗，接著置于75%的乙醇溶液中處理，然后再經0.1%的升汞消毒后用無菌水沖洗，用無菌吸水紙吸干水分，切去外植體變色的部分后,置于無菌培養皿中備用；B、芽體的萌發將滅菌處理后的芽體接種在WPM+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L+PVP6mg/L培養基上，pH值為5.8-6.0，培養溫度為23-27℃，每天光照12小時，光照強度1700Lx，接種后芽體萌發，然后形成帶葉的小苗；C、愈傷組織誘導取初始誘導培養中的芽體，放入在WPM+NAA2.0mg/L+6-BA4mg/L+PVP6mg/L培養基中培養14-16天，培養溫度為23-27℃；D、分化和增殖培養將步驟B得到的小苗切下轉接于WPM+NAA2.0mg/L+6-BA6.0mg/L+PVP10mg/L培養基上，直至形成叢生芽，pH值為5.8-6.0，培養溫度23-27℃，每天光照14小時，光照強度2000Lx，24-26天為一個生長周期；E、生根培養將分化和增值培養后形成的小苗放在Ms+NAA2.0mg/L+6-BA4.0mg/L+PVP10mg/L生根培養基上，pH值為5.8-6.0，培養溫度23-27℃，每天光照16小時，光照強度2000Lx，19-21天形成完整植株；F、煉苗和移栽將有生根的楨楠幼苗的培養基瓶蓋打開，室溫下煉苗2-4天后，取出幼苗，放入清水中把根部的瓊脂清洗干凈，移載到沙土或富養土中，移栽43-47天，成活。本專利技術在步驟A中，所述洗衣粉溶液的濃度為5%，所述用用洗衣粉溶液漂洗的時間為5-6min。本專利技術在步驟A中，所述用自來水沖洗的時間都為30-35min。本專利技術在步驟A中，所述75%的乙醇溶液中處理的時間為10-30秒。本專利技術在步驟B中，接種后7-9天芽體萌發，14-16天形成帶葉的小苗。本專利技術在步驟C中，愈傷組織誘導過程為暗培養。本專利技術在步驟D中，增殖系數為5以上。本專利技術所述的WPM培養基配方為：無機鹽：NH4N03400mg/L、Ca(NO3)2·4H2O556mg/L、K2SO4990mg/L、CaCl2·2H2O96mg/L、KH2PO4170mg/L、Na2MoO4·2H2O0.25mg/L、MgSO4·7H2O370mg/L、MnSO4·H2O22.4mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、CuSO4·5H2O0.25mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L；有機物：肌醇100mg/L、維生素B11.0mg/L、煙酸0.5mg/L、維生素B60.5mg/L、甘氨酸2.0mg/L、蔗糖20g/L、瓊脂6g/L、pH為5.2。本專利技術所述的MS培養基配方為：無機鹽:NH4N03l650mg/L、KNO31900mg/L、CaCl2·2H2O440mg/L、MgSO4·7H2O370mg/L、KH2PO4170mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L、H3BO36.2mg/L、MnSO4·4H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、KI0.83mg/L、Na2MoO4·2H2O0.25mg/L、CuSO4·5H2O0.025mg/L、CoCl2·6H2O0.025mg/L；有機物：肌醇100mg/L、煙酸0.5mg/L、維生素B60.5mg/L、維生素B10.1mg/L、甘氨酸2.0mg/L。本專利技術帶來的有益技術效果：1、本專利技術的目的是提供楨楠的快速繁殖方法，非常適合大規模生產，具有配方效果佳，出芽率高，培養時間短，植株生長旺盛，可操作性強，應用價值高的優點。2、本專利技術直接利用優良楨楠母樹上的芽體進行組培，無疑縮短了培育時間，并且節約成本。本專利技術選取了WPM培養基和MS培養基，在初代培養過程中，以WPM為基本培養基更有利于芽體的分化和成活。而在生根培養過程中，MS培養基更利于生根及后期培育壯苗，從而提高楨楠小苗的成活率。生根率達到95%以上，移載成活率達到95%以上。具體實施方式實施例1一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：包括以下方法步驟：A、外植體的選取與滅菌選用楨楠的嫩莖上芽體作為培養材料，先用自來水沖洗，再用洗衣粉溶液漂洗，再用自來水沖洗，接著置于75%的乙醇溶液中處理，然后再經0.1%的升汞消毒后用無菌水沖洗，用無菌吸水紙吸干水分，切去外植體變色的部分后,置于無菌培養皿中備用；B、芽體的萌發將滅菌處理后的芽體接種在WPM+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L+PVP6mg/L培養基上，pH值為5.8，培養溫度為23℃，每天光照12小時，光照強度1700Lx，接種后芽體萌發，然后形成帶葉的小苗；C、愈傷組織誘導取初始誘導培養中的芽體，放入在WPM+NAA2.0mg/L+6-B本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：包括以下方法步驟：A、外植體的選取與滅菌選用楨楠的嫩莖上芽體作為培養材料，先用自來水沖洗，再用洗衣粉溶液漂洗，再用自來水沖洗，接著置于75%的乙醇溶液中處理，然后再經0.1%的升汞消毒后用無菌水沖洗，用無菌吸水紙吸干水分，切去外植體變色的部分后,置于無菌培養皿中備用；B、芽體的萌發將滅菌處理后的芽體接種在WPM+NAA1.0mg/L+6?BA2.0mg/L+PVP6mg/L培養基上，pH值為5.8?6.0，培養溫度為23?27℃，每天光照12小時，光照強度1700Lx，接種后芽體萌發，然后形成帶葉的小苗；C、愈傷組織誘導取初始誘導培養中的芽體，放入在WPM+NAA2.0mg/L+6?BA4mg/L+PVP6mg/L培養基中培養14?16天，培養溫度為23?27℃；D、分化和增殖培養將步驟B得到的小苗切下轉接于WPM+NAA2.0mg/L+6?BA6.0mg/L+PVP10mg/L培養基上，直至形成叢生芽，pH值為5.8?6.0，培養溫度23?27℃，每天光照14小時，光照強度2000Lx，24?26天為一個生長周期；E、生根培養將分化和增值培養后形成的小苗放在Ms+NAA2.0mg/L+6?BA4.0mg/L+PVP10mg/L生根培養基上，pH值為5.8?6.0，培養溫度23?27℃，每天光照16小時，光照強度2000Lx，19?21天形成完整植株；F、煉苗和移栽將有生根的楨楠幼苗的培養基瓶蓋打開，室溫下煉苗2?4天后，取出幼苗，放入清水中把根部的瓊脂清洗干凈，移載到沙土或富養土中，移栽43?47天，成活。...

【技術特征摘要】
1.一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：包括以下方法步驟：A、外植體的選取與滅菌選用楨楠的嫩莖上芽體作為培養材料，先用自來水沖洗，再用洗衣粉溶液漂洗，再用自來水沖洗，接著置于75%的乙醇溶液中處理，然后再經0.1%的升汞消毒后用無菌水沖洗，用無菌吸水紙吸干水分，切去外植體變色的部分后,置于無菌培養皿中備用；B、芽體的萌發將滅菌處理后的芽體接種在WPM+NAA1.0mg/L+6-BA2.0mg/L+PVP6mg/L培養基上，pH值為5.8-6.0，培養溫度為23-27℃，每天光照12小時，光照強度1700Lx，接種后芽體萌發，然后形成帶葉的小苗；C、愈傷組織誘導取初始誘導培養中的芽體，放入在WPM+NAA2.0mg/L+6-BA4mg/L+PVP6mg/L培養基中培養14-16天，培養溫度為23-27℃；D、分化和增殖培養將步驟B得到的小苗切下轉接于WPM+NAA2.0mg/L+6-BA6.0mg/L+PVP10mg/L培養基上，直至形成叢生芽，pH值為5.8-6.0，培養溫度23-27℃，每天光照14小時，光照強度2000Lx，24-26天為一個生長周期；E、生根培養將分化和增值培養后形成的小苗放在Ms+NAA2.0mg/L+6-BA4.0mg/L+PVP10mg/L生根培養基上，pH值為5.8-6.0，培養溫度23-27℃，每天光照16小時，光照強度2000Lx，19-21天形成完整植株；F、煉苗和移栽將有生根的楨楠幼苗的培養基瓶蓋打開，室溫下煉苗2-4天后，取出幼苗，放入清水中把根部的瓊脂清洗干凈，移載到沙土或富養土中，移栽43-47天，成活。2.根據權利要求1所述的一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：在步驟A中，所述洗衣粉溶液的濃度為5%，所述用用洗衣粉溶液漂洗的時間為5-6min。3.根據權利要求1或2所述的一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：在步驟A中，所述用自來水沖洗的時間都為30-35min。4.根據權利要求1或2所述的一種楨楠的快速繁殖方法，其特征在于：在步驟A中，所述75%的乙醇溶液中處理的時間為...

【專利技術屬性】
技術研發人員：羅玉玲，
申請(專利權)人：宜賓云辰喬木園林有限責任公司，
類型：發明
國別省市：四川;51