激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途技術

本發明專利技術公開了一種激肽釋放酶7小分子抑制劑，其結構由式(I)表示。本發明專利技術還提供了該激肽釋放酶7小分子抑制劑的制備方法。該激肽釋放酶7小分子抑制劑可用于抑制激肽釋放酶7的活性，制備治療特應性皮炎的藥物。也可以用于組成治療特應性皮炎的藥物組合物的有效成分，該藥物組合物可以為外用膏劑或外用噴霧制劑。該抑制劑作為小分子抑制劑能有效抑制激肽釋放酶7，具有應用于制備特應性皮炎的治療藥物的前景。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及藥物化學領域，特別是指一種激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途。
技術介紹
特應性皮炎(AD)是一種廣泛傳播的慢性炎癥性皮膚病，特點是干燥、鱗狀皮膚、炎癥、皮膚滲透性增加，AD病人的皮膚對環境中常見的而對正常人無害的因素也會很敏感從而易于受到表面感染。在過去的30年間工業化國家的特應性皮炎的發病率增長了2到3倍，據估計兒童的特應性皮炎患病率達到了15-30％，成人的特應性皮炎患病率達到了2-10％。由于發病機制的復雜性，對AD的發病機制了解得不多，但皮膚屏障功能紊亂已經被證實是AD發展過程中的關鍵因素之一。皮膚屏障的穩定依賴于顆粒層的角質形成細胞分化為角質細胞和皮膚表層角質細胞脫落(即脫屑)之間的平衡，皮膚的脫屑過程包括由(激肽釋放酶)KLKs參與的橋粒的降解，由于橋粒是角質細胞的粘連蛋白，橋粒的降解則會導致角質細胞脫落而致皮膚脫屑。證據顯示，局部或暫時性的KLKs活性控制的失調，是AD病人皮膚屏障穩定缺失的主要原因之一。KLKs(Kallikreins，激肽釋放酶)是具有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶特異性的絲氨酸蛋白酶，其編碼基因定位于19q13.4，編碼15個分泌型絲氨酸蛋白酶KLK1-KLK15。已經證明，KLKs存在于正常人的角質層細胞中，目前發現，至少有8種KLK(KLK5，KLK6，KLK7，KLK8，KLK10，KLK11，KLK13和KLK14)存在于人的角質層和汗液中。其中，KLK7占總量的40％。KLK7可能是皮膚損傷的一個關鍵酶，而且在AD病人中它可能參與一個系統性炎癥反應，在AD的角質層KLK7升高最為突出，這提示KLK7在AD的發病機制上可能是至關重要的，因此，抑制KLK7的活性對于AD的治療顯得最為重要。LEKTI(Lympho-epithelialKazal-type-relatedinhibitor,淋巴上皮組織Kazal型相關蛋白抑制劑)是由SPINK5基因編碼的絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員，LEKTI前體包含一個信號肽和彼此隔開的15個絲氨酸蛋白酶抑制域(D1-D15)，表達后迅速被弗林蛋白酶水解為幾個蛋白片段，其中包含D6-D9抑制域的LEKTI能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、KLK5和KLK7等酶的活性。LEKTI的內源靶至少包括KLK5、KLK7和KLK14，它們共同參與皮膚的脫屑過程。在AD病人，LEKTI表達水平嚴重降低，導致了KLK7活性的異常升高。盡管LEKTI是表皮內KLK7的天然抑制劑，但作為治療AD的外用藥，其不能透過皮膚角質層，同時由于其大分子蛋白質的特性也會導致其降解速度過快，因而將LEKTI作為外用藥作用非常有限。并且，到目前為止，還沒有一種有效的KLK7小分子抑制劑應用于臨床。因此，如果能得到作為皮膚外用藥的KLK7的小分子抑制劑，將有助于AD的治療。
技術實現思路
有鑒于此，本專利技術的目的在于提出一種激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途，其作為小分子抑制劑能有效抑制KLK7，具有應用于制備特應性皮炎的治療藥物的前景。本專利技術通過以KLK7作為靶分子，根據KLK7的晶體結構，以及藥效團模型進行分析與篩選，合成出具有KLK7抑制作用的小分子化合物，經實驗驗證，該化合物具有顯著的抑制KLK7作用。基于上述目的本專利技術提供的激肽釋放酶7小分子抑制劑的化合物結構由式(I)表示：基于相同的專利技術構思，本專利技術還提供了激肽釋放酶7小分子抑制劑的制備方法，包括以下步驟：步驟1)化合物(Ⅱ)溶解于70％-98％(質量分數)H2SO4中，滴加70％-98％(質量分數)H2SO4與50％-98％(質量分數)HNO3形成的混酸，控溫30℃以下，反應4-6小時，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，過濾得化合物(Ⅲ)粗品，過柱分離得化合物(Ⅲ)；步驟2)向反應瓶中加入水，鐵粉，5％-37％(質量分數)鹽酸，控溫80-100℃，分批加入化合物(Ⅲ)，反應2-3小時，以碳酸鈉中和，過柱分離得化合物(Ⅳ)；步驟3)向反應瓶中加入化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺，再滴加丁二酰氯，室溫反應1-3小時，過柱分離得化合物(Ⅴ)；步驟4)向反應瓶中加入化合物(Ⅴ)，四氫呋喃，在0℃下加入硼氫化鈉，加畢，室溫下反應4-5小時，過柱分離得化合物(Ⅵ)；步驟5)向反應瓶中加入化合物(Ⅵ)和85％(質量分數)磷酸，在140-180℃反應1-3小時，加入1％-20％(質量分數)氫氧化鈉溶液游離出化合物(Ⅶ)，過柱分離得化合物(Ⅶ)；步驟6)中間體化合物(Ⅷ)的合成：向反應瓶中加入2,4-二甲基苯胺、乙醚、三乙胺，再滴加4-氯代丁酰氯，室溫反應1-3小時，過柱分離得化合物(Ⅷ)；步驟7)反應瓶中加入化合物(Ⅶ)、化合物(Ⅷ)、甲苯、碳酸鉀，回流反應3-4小時，過柱分離得化合物(I)。優選地，在步驟1)中，所述的混酸中H2SO4(折100％)與HNO3(折100％)的摩爾比為1:1。可選地，在步驟2)中，所述水(不含鹽酸中的水)、鐵粉、HCl(折100％)的摩爾比為20～30:2～5:0.1～0.5。可選地，在步驟3)中，所述化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺、丁二酰氯的摩爾比為0.5～2:3～6:1.5～3.5:0.5～2。可選地，在步驟4)中，所述化合物(Ⅴ)、硼氫化鈉、四氫呋喃的摩爾比為1:0.1～1.0:50～300(摩爾比)，過柱分離得化合物(Ⅵ)。可選地，在步驟5)中，所述化合物(Ⅵ)、磷酸(折100％)的摩爾比是0.5～2:1～3。可選地，在步驟6)中，2,4-二甲基苯胺、乙醚、三乙胺、4-氯代丁酰氯的摩爾比為0.5～2:3～5:1～3:0.5～2。可選地，在步驟7)中，所述化合物(Ⅶ)、化合物(Ⅷ)、碳酸鉀、甲苯的摩爾比為0.5～2:1～1.5:0.5～2:8～12。基于相同的專利技術構思，本專利技術還提供了上述激肽釋放酶7小分子抑制劑的應用，即將所述激肽釋放酶7小分子抑制劑用于抑制激肽釋放酶7的活性，制備治療特應性皮炎的藥物。基于相同的專利技術構思，本專利技術還提供了一種治療特應性皮炎的藥物組合物，其中含有所述的激肽釋放酶7小分子抑制劑作為有效成分。優選地，上述藥物組合物為外用膏劑或外用噴霧制劑。從上面所述可以看出，本專利技術提供的激肽釋放酶7小分子抑制劑及其制備方法、用途，該抑制劑為小分子抑制劑，避免了傳統KLK7的天然抑制劑作為治療AD的外用藥時由于分子大而不能透過皮膚角質層、吸收慢降解快等問題，該小分子抑制劑合成方法簡單，操作方便，吸收快，有效抑制KLK7，具有應用于臨床特應性皮炎的治療藥物的制備前景。附圖說明圖1為本專利技術的實施例所涉及的激肽釋放酶7小分子抑制劑的IC50曲線擬合圖；圖2為本專利技術的實施例所涉及的激肽釋放酶7小分子抑制劑的核磁圖。具體實施方式為使本專利技術的目的、技術方案和優點更加清楚明白，以下結合具體實施例，并參照附圖，對本專利技術進一步詳細說明。實施例1：激肽釋放酶7小分子抑制劑的制備1.0mol化合物(Ⅱ)溶解于2.0mol濃H2SO4中，滴加1.0mol濃H2SO4與1.0mol濃HNO3形成的混酸，控溫30℃以下，反應4小時，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，過濾得化合物(Ⅲ)粗品，過柱分離得化合物(Ⅲ)。向反應瓶中加入25mol水，3.0mol鐵粉，0.3molHCl(氯化氫折100本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種激肽釋放酶7小分子抑制劑，其特征在于，該小分子抑制劑的結構如式(Ⅰ)所示：

【技術特征摘要】
2015.11.04 CN 2015107413137;2015.11.04 CN 201510741.一種激肽釋放酶7小分子抑制劑，其特征在于，該小分子抑制劑的結構如式(Ⅰ)所示：2.一種如權利要求1所述的激肽釋放酶7小分子抑制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟1)化合物(Ⅱ)溶解于H2SO4中，滴加H2SO4與HNO3形成的混酸，控溫30℃以下，反應4-6小時，得化合物(Ⅲ)，倒入冰水中，過濾得化合物(Ⅲ)粗品，過柱分離得化合物(Ⅲ)；步驟2)向反應瓶中加入水，鐵粉，HCl溶液，控溫80-100℃，分批加入化合物(Ⅲ)，反應2-3小時，以碳酸鈉中和，過柱分離得化合物(Ⅳ)；步驟3)向反應瓶中加入化合物(Ⅳ)、乙醚、三乙胺，再滴加丁二酰氯，室溫反應1-3小時，過柱分離得化合物(Ⅴ)；步驟4)向反應瓶中加入化合物(Ⅴ)，四氫呋喃，在0℃下加入硼氫化鈉，加畢，室溫下反應4-5小時，過柱分離得化合物(Ⅵ)；步驟5)向反應瓶中加入化合物(Ⅵ)和磷酸，在140-180℃反應1-3小時，加入氫氧化鈉溶液游離出化合物(Ⅶ)，過柱分離得化合物(Ⅶ)；步驟6)中間體化合物(Ⅷ)的合成：向反應瓶中加入2,4-二甲基苯胺、乙醚、三乙胺，再滴加4-氯代丁酰氯，室溫反應1-3小時，過柱分離得化合物(Ⅷ)；步驟7)反應瓶中加入化合物(Ⅶ)、化合物(Ⅷ)、甲苯、碳酸鉀，回流反應3-4小時，過柱分離得化合物(I)。3.根據權利要求2所述的激肽釋放酶7小分子抑制劑的制備方法，其特征在...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王芳宇，譚瀟，王德平，嚴加林，何麗芳，周冬升，李玉林，
申請(專利權)人：衡陽師范學院，
類型：發明
國別省市：湖南;43