本發(fā)明專利技術(shù)涉及農(nóng)殘檢測領(lǐng)域，提供了篩查水生類蔬菜中708種農(nóng)殘的偵測方法，在GC-Q-TOF/MS一級模式下采集農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物指定條件下的碎片離子全掃描質(zhì)譜圖，得到農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比，并導(dǎo)入PCDL軟件，與對應(yīng)的農(nóng)藥信息關(guān)聯(lián)，形成數(shù)據(jù)庫，在相同的設(shè)定條件下測定待測樣品的全譜數(shù)據(jù)，得到全譜數(shù)據(jù)；對樣品測定結(jié)果經(jīng)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫檢索，對符合鑒定依據(jù)的檢出農(nóng)藥準(zhǔn)確鑒定，獲得水生類蔬菜中的農(nóng)殘種類。本發(fā)明專利技術(shù)運(yùn)用GC-Q-TOF/MS高分辨質(zhì)譜建立的檢測方法對水生類蔬菜中農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測，優(yōu)選結(jié)合特定的前處理，具有快速、高通量、高精度和高可靠性檢測的特點(diǎn)。無需標(biāo)準(zhǔn)物作對照，同時對水生類蔬菜中708種農(nóng)藥進(jìn)行定性偵測與確證。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及農(nóng)殘檢測領(lǐng)域，特別涉及一種應(yīng)用GC-Q-TOF/MS篩查水生類蔬菜中708種農(nóng)殘的偵測方法。
技術(shù)介紹
水果蔬菜與人們的生活息息相關(guān)，尤其是水生類蔬菜(豆瓣菜、蓮藕和茭白等)的營養(yǎng)價值備受消費(fèi)者的青睞。但是，目前在水生類蔬菜的種植，生長以及保藏過程中可能使用的農(nóng)藥及化學(xué)品已超過1100種。然而，伴隨了農(nóng)藥的廣泛使用，其過量使用、濫用和誤用等不規(guī)范行為也隨之產(chǎn)生，使得農(nóng)藥殘留于農(nóng)產(chǎn)品中，從而給人類健康造成潛在威脅，同時也對農(nóng)產(chǎn)品的進(jìn)出口貿(mào)易產(chǎn)生了不利影響。早在1976年世界衛(wèi)生組織(WHO)、糧農(nóng)組織(FAO)和聯(lián)合國環(huán)境規(guī)劃署(UNEP)共同建立了全球環(huán)境檢測系統(tǒng)/食品項(xiàng)目(GlobalEnvironmentMonitoringSystem，GEMS/Food)，旨在掌握會員國食品污染狀況，了解食品污染物攝入量，保護(hù)人體健康，促進(jìn)貿(mào)易發(fā)展。現(xiàn)在，世界各國都把食品安全提升到國家安全的戰(zhàn)略地位。農(nóng)藥殘留限量是食品安全標(biāo)準(zhǔn)之一，也是國際貿(mào)易準(zhǔn)入門檻。同時，對農(nóng)藥殘留的要求呈現(xiàn)出品種越來越多，限量越來越嚴(yán)格的發(fā)展趨勢，也就是國際貿(mào)易設(shè)立的農(nóng)藥殘留限量門檻越來越高。現(xiàn)在歐盟已制定了839種農(nóng)藥的162248項(xiàng)MRL標(biāo)準(zhǔn)，美國制定了351種農(nóng)藥的39147項(xiàng)MRL標(biāo)準(zhǔn)，日本制定了579種農(nóng)藥的51600多項(xiàng)MRL標(biāo)準(zhǔn)，我國2014年發(fā)布了381種農(nóng)藥的3650項(xiàng)MRL標(biāo)準(zhǔn)。目前，國際上普遍采用的一律標(biāo)準(zhǔn)限量為10μg/kg。因此，食品安全和國際貿(mào)易都呼喚高通量快速農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)，這無疑也給廣大農(nóng)藥殘留分析工作者提供了機(jī)遇和挑戰(zhàn)。在目前的眾多農(nóng)藥殘留分析技術(shù)中，色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是實(shí)現(xiàn)高通量多殘留快速檢測的最佳分析手段。目前農(nóng)藥殘留分析多以氣相色譜、液相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)為主。這些檢測技術(shù)都首先需要農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品對照進(jìn)行定性。例如，對100種農(nóng)藥的檢測就需要準(zhǔn)備相應(yīng)的100種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品對照，而這100種之外的農(nóng)藥都會被漏檢。在農(nóng)獸藥殘留實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際工作中，絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都不會儲備數(shù)百種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，其原因是農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品不僅價格昂貴，而且有效期只有2-3年，需要重復(fù)投資。一般實(shí)驗(yàn)室常備農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品只有幾十種，其日常監(jiān)測的農(nóng)藥品種也就只限于這幾十種，由此造成食品安全監(jiān)測漏洞。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
為了克服上述缺陷，本專利技術(shù)人團(tuán)隊(duì)經(jīng)過多年潛心研究，研發(fā)了708種農(nóng)藥的精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫以及一種果蔬中708種農(nóng)藥殘留的GC-Q-TOF/MS偵測技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了不需標(biāo)準(zhǔn)品對照、即可對水生類蔬菜中708種農(nóng)藥殘留進(jìn)行快速偵測檢測，滿足了當(dāng)前農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留高通量快速檢測的急需。一方面，本專利技術(shù)提供了一種GC-Q-TOF/MS檢測水生類蔬菜中708種農(nóng)藥殘留的偵測方法，其特征在于：建立708種農(nóng)藥TOF/MS數(shù)據(jù)庫，同時對水生類蔬菜中708種農(nóng)藥進(jìn)行定性偵測與確證；該方法包括以下步驟：(1)將農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分別配制成1-5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)定條件下經(jīng)GC-QTOF/MS一級模式全譜數(shù)據(jù)測定每種標(biāo)準(zhǔn)溶液的全譜數(shù)據(jù)，分別得到每種農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；(2)將步驟(1)中獲得的一級模式全譜數(shù)據(jù)，經(jīng)核實(shí)后的碎片離子全掃描質(zhì)譜圖導(dǎo)入PCDL軟件中，并與對應(yīng)的農(nóng)藥信息相關(guān)聯(lián)，建成TOF/MS精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫，用于數(shù)據(jù)檢索分析；(3)與步驟(1)相同的設(shè)定條件下水生類蔬菜的測定待測樣品中農(nóng)藥的全譜數(shù)據(jù)，得到其含有的農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；(4)對樣品測定結(jié)果經(jīng)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫檢索，對符合鑒定依據(jù)的檢出農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，從而獲得水生類蔬菜中的農(nóng)殘種類。優(yōu)選的，通過對水生類蔬菜進(jìn)行前處理以獲得水生類蔬菜的測定待測樣品，所述前處理方法包括以下程序：樣品制備：水生類蔬菜樣品經(jīng)0.5-5體積％醋酸乙腈勻漿提取，經(jīng)脫水和離心、濃縮后，再經(jīng)Carbon/NH2柱凈化，乙腈+甲苯洗脫殘留農(nóng)藥，經(jīng)再濃縮、過濾后制成待測樣液a。本專利技術(shù)所具有的有益效果：1、本專利技術(shù)以高分辨碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、保留時間、離子豐度比等化合物信息為識別標(biāo)準(zhǔn)，建立的708種農(nóng)藥偵測和確證技術(shù)方法，徹底改變了原有以化合物標(biāo)準(zhǔn)物為參比的定性模式，是一種不需要標(biāo)準(zhǔn)物對照，快速、高通量、準(zhǔn)確可靠的農(nóng)藥殘留檢測新技術(shù)。2、本專利技術(shù)在不需標(biāo)準(zhǔn)物對照的前提下，實(shí)現(xiàn)了708種農(nóng)藥殘留的定性偵測和確證，可以大大節(jié)省購買標(biāo)準(zhǔn)物的成本，也更加環(huán)保、安全。3、本專利技術(shù)可在1小時內(nèi)完成708種農(nóng)藥偵測、定性與確證，與傳統(tǒng)檢測方法相比較，可以提高工作效率數(shù)百倍。4、本專利技術(shù)能夠做到對水生類蔬菜樣品中708種農(nóng)藥殘留一次性提取凈化，一次進(jìn)樣檢測，與傳統(tǒng)檢測方法相比較，可以節(jié)省檢測成本、提高工作效率數(shù)百倍。5、本專利技術(shù)可以測試的水生類蔬菜樣品中農(nóng)藥包括以下物質(zhì)中的一類或幾類：有機(jī)磷類農(nóng)藥，氨基甲酸酯類農(nóng)藥，苯并咪唑類農(nóng)藥，磺酰脲類農(nóng)藥，煙堿類農(nóng)藥，除蟲菊酯類農(nóng)藥及其他類型的農(nóng)藥及代謝物。6、本專利技術(shù)建立的GC-QTOF/MS偵測技術(shù)指標(biāo)：掃描范圍50-600m/z；測定的精確質(zhì)量可達(dá)0.0001m/z；質(zhì)量精度可控制在20ppm以內(nèi)；掃描速度在50-600m/z范圍為每秒5次。7、本專利技術(shù)提供的一種應(yīng)用氣相色譜四級桿飛行時間質(zhì)譜(GC-Q-TOF/MS)快速篩查水生類蔬菜中708種農(nóng)藥殘留的高分辨質(zhì)譜偵測技術(shù)在7個農(nóng)藥殘留分析實(shí)驗(yàn)室得到了推廣和應(yīng)用，經(jīng)過對30多個省市多個市售水生類蔬菜樣品的偵測驗(yàn)證，取得了重要的殘留偵測數(shù)據(jù)。8、同時偵測的708種農(nóng)藥中，偵測靈敏度一律低于標(biāo)準(zhǔn)10微克/千克，滿足各國農(nóng)藥殘留MRL水平篩查的要求。本專利技術(shù)的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式部分予以詳細(xì)說明。附圖說明附圖是用來提供對本專利技術(shù)的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與下面的具體實(shí)施方式一起用于解釋本專利技術(shù)，但并不構(gòu)成對本專利技術(shù)的限制。在附圖中：圖1是山東地區(qū)市售蓮藕樣品GC-Q-TOF/MS技術(shù)檢出頻次最高農(nóng)藥(除蟲菊酯)結(jié)果示例。圖2是山東地區(qū)市售蓮藕樣品GC-Q-TOF/MS技術(shù)檢出的頻次最高農(nóng)藥(除蟲菊酯)的質(zhì)譜信息與數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對的結(jié)果。圖3是上海地區(qū)市售蓮藕樣品GC-Q-TOF/MS技術(shù)檢出頻次最高農(nóng)藥(除蟲菊酯)結(jié)果示例。圖4是上海地區(qū)市售蓮藕樣品GC-Q-TOF/MS技術(shù)檢出的頻次最高農(nóng)藥(除蟲菊酯)的質(zhì)譜信息與數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對的結(jié)果。具體實(shí)施方式以下對本專利技術(shù)本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種GC?Q?TOF/MS檢測水生類蔬菜中708種農(nóng)藥殘留的偵測方法，其特征在于：建立708種農(nóng)藥TOF/MS數(shù)據(jù)庫，同時對水生類蔬菜中708種農(nóng)藥進(jìn)行定性偵測與確證；該方法包括以下步驟：(1)將農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分別配制成1?5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)定條件下經(jīng)GC?QTOF/MS一級模式全譜數(shù)據(jù)測定每種標(biāo)準(zhǔn)溶液的全譜數(shù)據(jù)，分別得到每種農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；(2)將步驟(1)中獲得的一級模式全譜數(shù)據(jù)，經(jīng)核實(shí)后的碎片離子全掃描質(zhì)譜圖導(dǎo)入PCDL軟件中，并與對應(yīng)的農(nóng)藥信息相關(guān)聯(lián)，建成TOF/MS精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫，用于數(shù)據(jù)檢索分析；(3)與步驟(1)相同的設(shè)定條件下水生類蔬菜的測定待測樣品中農(nóng)藥的全譜數(shù)據(jù)，得到其含有的農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；(4)對樣品測定結(jié)果經(jīng)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫檢索，對符合鑒定依據(jù)的檢出農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，從而獲得水生類蔬菜中的農(nóng)殘種類。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種GC-Q-TOF/MS檢測水生類蔬菜中708種農(nóng)藥殘留的偵測方法，其特征在于：建立
708種農(nóng)藥TOF/MS數(shù)據(jù)庫，同時對水生類蔬菜中708種農(nóng)藥進(jìn)行定性偵測與確證；該方法包
括以下步驟：
(1)將農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分別配制成1-5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)定條件下經(jīng)GC-QTOF/MS一級模式
全譜數(shù)據(jù)測定每種標(biāo)準(zhǔn)溶液的全譜數(shù)據(jù)，分別得到每種農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片
離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；
(2)將步驟(1)中獲得的一級模式全譜數(shù)據(jù)，經(jīng)核實(shí)后的碎片離子全掃描質(zhì)譜圖導(dǎo)入
PCDL軟件中，并與對應(yīng)的農(nóng)藥信息相關(guān)聯(lián)，建成TOF/MS精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫，用于數(shù)據(jù)檢索分
析；
(3)與步驟(1)相同的設(shè)定條件下水生類蔬菜的測定待測樣品中農(nóng)藥的全譜數(shù)據(jù)，得到
其含有的農(nóng)藥的化學(xué)分子式、保留時間、碎片離子精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比；
(4)對樣品測定結(jié)果經(jīng)精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫檢索，對符合鑒定依據(jù)的檢出農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確鑒
定，從而獲得水生類蔬菜中的農(nóng)殘種類。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述農(nóng)藥為表1中所示的708種農(nóng)藥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述水生類蔬菜選自由豆瓣菜、蓮藕和茭白所組
成的組中。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，測定每種標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的全譜數(shù)據(jù)的條件包
括：
(1)色譜條件：色譜柱：VF-1701MS；色譜柱升溫程序：30-50℃保持0.5-5min，然后以20-
50℃/min升溫至110-150℃，再以3-10℃/min升溫至200-280℃，隨后以5-15℃/min升溫至
250-320℃，保持3-10min，再以5-20℃/min降溫至200-290℃，保持1-5min；載氣：氦氣；流
速：0.5-2mL/min；進(jìn)樣口溫度：230-320℃：無分流進(jìn)樣，溶劑延遲2-10min；
(2)質(zhì)譜條件：離子源：EI；離子源溫度：230-330℃，電子轟擊源能量：50-100eV；氣相-
質(zhì)譜接口溫度：200-320℃；掃描方式：以每秒2-10張譜圖的方式進(jìn)行TOF模式全掃描，質(zhì)量
數(shù)范圍50-600amu。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中，TOF/MS精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫能夠?qū)拇郎y樣品中測定得
到的碎片離子的保留時間、精確質(zhì)量數(shù)、離子豐度比的實(shí)測值，與TOF/MS精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫中
碎片離子的對應(yīng)要素理論值檢索比對，給出每個碎片離子的得分，進(jìn)而給出平均分即目標(biāo)
化合物的匹配度得分值；其中，碎片離子的保留時間偏差設(shè)定在±0.5min，精確質(zhì)量數(shù)偏差
設(shè)定為±100ppm。
6.根據(jù)...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：龐國芳，范春林，李曉潁，常巧英，
申請(專利權(quán))人：中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院，
類型：發(fā)明
國別省市：北京;11
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。