一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草中抑芽丹含量的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草中抑芽丹含量的方法，1)配制一系列不同濃度的馬來酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法進行檢測，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)將制備得到的煙草樣品利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法進行檢測；3)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到煙草樣品中馬來酰胺的含量。將所述萃取液倒入煙草試樣中，震蕩提取5-20min，超聲提取5-20min后，過濾得上清液即得煙草樣品。該萃取液甲酸甲醇最佳濃度為1％。本發(fā)明專利技術(shù)中的萃取劑對煙草試樣進行萃取，萃取方法簡單，易于操作，大大簡化了樣品預(yù)處理工序；本發(fā)明專利技術(shù)的萃取劑對檢測的干擾程度小，保證了煙草中馬來酰胺檢測的準(zhǔn)確度。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及煙草中農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域，具體涉及一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草中抑芽丹含量的方法。
技術(shù)介紹
煙草中的農(nóng)藥殘留量關(guān)乎卷煙產(chǎn)品的安全性和內(nèi)在質(zhì)量，在行業(yè)中已引起高度關(guān)注。CORESTA農(nóng)用化學(xué)品咨詢委員會(ACAC)2003年發(fā)布了農(nóng)用化學(xué)品指導(dǎo)性殘留限量的基本原則與實施意見，對99種農(nóng)藥殘留提出了指導(dǎo)性限量，2010年增加到了200多種，并將繼續(xù)增加。我國目前主要參照ACAC限量作為煙草貿(mào)易評價依據(jù)。中國煙草總公司《煙草農(nóng)藥最大殘留限量》對煙草農(nóng)藥殘留123種進行控制，并在此基礎(chǔ)上提出我國煙草農(nóng)藥殘留重點關(guān)注的21種農(nóng)藥名單，其中，殺菌劑類9種、植物生長調(diào)節(jié)劑類3種、除草劑類2種、殺蟲劑7種。我國煙草科技工作者對煙草中農(nóng)藥殘留的多種分析方法作了大量改進研究，采用現(xiàn)代的分析技術(shù)將檢測方法逐步集中，在已頒布的農(nóng)殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)系列中，由2007年的7個調(diào)整2011年的5個。其中，馬來酰肼(即為抑芽丹)的測定由紫外分光光度法，改為《煙草及煙草制品馬來酰肼農(nóng)藥殘留的測定-高效液相色譜法》(YC/T405.5-2011)檢測方法。然而該方法對樣品的前處理較為繁瑣，如在試樣的蒸餾提取過程中，需要保持回流冷凝管冷凝充分，蒸餾瓶始終保持在約200℃狀態(tài)下相對穩(wěn)定，且要調(diào)整到在20min時間內(nèi)收集到100mL蒸餾液的蒸餾速率。該方法費時、費力，需要專人看管蒸餾過程，不利于批量試樣的農(nóng)藥殘留檢測，影響檢測效率的提高，需要進一步的改進和完善。基于上述原因，研究一種更便捷、準(zhǔn)確的測定煙草中農(nóng)藥殘留馬來酰肼含量的方法是十分必要。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，提供一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草中抑芽丹的方法，該方法檢測限低，重復(fù)性好，適用于煙草中農(nóng)藥殘留馬來酰肼含量的檢測。為了解決以上技術(shù)問題，本專利技術(shù)的技術(shù)方案為：0.5-2％的甲酸甲醇溶液作為萃取液在液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草制品中抑芽丹含量中的應(yīng)用。一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法，包括如下步驟：1)配制一系列不同濃度的馬來酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法進行檢測，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)將0.5-2％的甲酸甲醇溶液作為萃取液制備得到的煙草樣品利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法進行檢測；3)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到煙草樣品中馬來酰胺的含量。優(yōu)選的，步驟2)中，煙草樣品的制備方法，包括如下步驟：將所述萃取液倒入煙草試樣中，并加入馬來酰肼-D2內(nèi)標(biāo)液，震蕩提取5-20min，超聲提取5-20min后，過濾得上清液即得煙草樣品。優(yōu)選的，每克煙草試樣用8-12mL萃取液萃取。優(yōu)選的，煙草樣品中馬來酰肼-D2內(nèi)標(biāo)液的濃度為1μg/mL；或，振蕩提取的轉(zhuǎn)速為250-300rpm。優(yōu)選的，所述過濾使用的濾膜的孔徑為0.22μm。優(yōu)選的，步驟1)中，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的溶液為7個不同濃度，馬來酰肼的濃度分別為0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL和10.0μg/mL，馬來酰肼-D2內(nèi)標(biāo)濃度均為1μg/mL。優(yōu)選的，液相色譜的操作條件為：采用HILIC極性柱，規(guī)格為150m×3.0mm，膜厚為5μm；柱溫度為室溫，流速0.3mL/min；進樣體積：5μL，流動相：A相為超純水，B相為乙腈，0-3min，流動相由A相5％、B相95％變?yōu)锳相27％，B相73％；3-10min，流動相由A相27％，B相73％變?yōu)锳相30％，B相70％；10-13min流動相由A相30％，B相70％變?yōu)锳相5％、B相95％。優(yōu)選的，質(zhì)譜的檢測條件為：MH：母離子111.1，子離子42.1-82.1，去簇電壓為-60V，碰撞能為-40--26V；MH-D2：母離子113.0，子離子42.1-84.1，去簇電壓為-55V，碰撞能為-40--25V。所述的檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法在檢測煙草制品中抑芽丹含量中的應(yīng)用。一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草中抑芽丹含量的方法，具體包括如下步驟：1)萃取液的配制，萃取液為1％的甲酸甲醇溶液，甲醇：HPLC級、甲酸：分析純級；2)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立①分別配制濃度為400μg/mL的馬來酰肼標(biāo)準(zhǔn)儲備液，20μg/mL中間液I和2μg/mL中間液II，溶劑為甲醇；②分別配制濃度為200μg/mL的氘代馬來酰肼內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液和20μg/mL中間液，溶劑為甲醇；③標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制如下表1所示，表1標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制分別制備7個不同濃度的馬來酰肼標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，每個濃度取1.5mL裝入色譜瓶，供液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測；③將7個標(biāo)準(zhǔn)樣品的馬來酰肼響應(yīng)值與馬來酰肼的含量進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，線性相關(guān)系數(shù)R2>0.999；3)待測樣品的制備稱取1g(精確至0.0001g)試樣于50mL離心管中，加入10mL提取溶液1％甲酸甲醇，震蕩提取(275rpm)10min，超聲10min后于4000rpm離心10min，取上清液過0.22μm濾膜進行上機測定；4)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀操作條件；采用HILIC極性柱，規(guī)格為150m×3.0mm，膜厚為5μm；柱溫度為室溫，流速0.3mL/min；進樣體積：5μL，流動相：A相為超純水，B相為乙腈，設(shè)置參數(shù)如表2所示；質(zhì)譜參數(shù)如表3所示；表2流動相參數(shù)設(shè)置時間(min)超純水A(％)乙腈B(％)05953.0277310.0307013.0595表3質(zhì)譜檢測參數(shù)5)分析結(jié)果的計算及分析結(jié)果的校正讀出待測樣品馬來酰肼的響應(yīng)值，根據(jù)步驟2)所建立的馬來酰肼標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算得到樣品的馬來酰肼含量。通過選擇合適的萃取劑提高對目標(biāo)化合物的提取率，選擇合適的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)濃度1.0μg/mL以提高檢測目標(biāo)化合物的準(zhǔn)確度，本專利技術(shù)能實現(xiàn)農(nóng)藥殘留馬來酰肼含量的檢測。本專利技術(shù)的有益技術(shù)效果為：該方法與現(xiàn)有方法相比，樣品萃取時，不需要鹽酸回流，操作簡單，提取效率好，雜質(zhì)干擾小，可大批量操作，重現(xiàn)性好，非常適用于煙葉中馬來酰肼殘留量的檢測。本專利技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線R2>0.999，方法定量限為2.0mg/kg，方法的回收率(2.0，10.0，80.0mg/kg三個水平)為93.4-102.2％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD％)為4％，具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，適合大批量測定的特本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
0.5?2％的甲酸甲醇溶液作為萃取液在液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草制品中抑芽丹含量中的應(yīng)用。

【技術(shù)特征摘要】
1.0.5-2％的甲酸甲醇溶液作為萃取液在液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草制品中抑芽丹含量中的
應(yīng)用。
2.一種液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法，其特征在于：包括如下步驟：
1)配制一系列不同濃度的馬來酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法進行檢測，
建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；
2)將0.5-2％的甲酸甲醇溶液作為萃取液制備得到的煙草樣品利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)
譜的方法進行檢測；
3)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到煙草樣品中馬來酰胺的含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法，其特征在于：步驟2)
中，煙草樣品的制備方法，包括如下步驟：
將所述萃取液倒入煙草試樣中，并加入馬來酰肼-D2內(nèi)標(biāo)液，震蕩提取5-20min，超聲
提取5-20min后，過濾得上清液即得煙草樣品。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法，其特征在于：每克煙草
試樣用8-12mL萃取液萃取。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法，其特征在于：煙草樣品
中馬來酰肼-D2內(nèi)標(biāo)液的濃度為1μg/mL；
或，振蕩提取的轉(zhuǎn)速為250-300rpm。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測煙草制品中抑芽丹含量的方法，其特征在于：所述過濾
使用的濾膜的孔徑為0.22μm。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測煙草制品中抑芽丹含量的...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：徐海濤，于宏曉，岳勇，張東海，許鍇霖，鄭軒，張莎莎，賀笑非，管延渠，陳建軍，
申請(專利權(quán))人：山東中煙工業(yè)有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國別省市：山東;37