PTP1B 表達的反義調節制造技術

本文提供了用于在動物中降低PTP1B?mRNA和蛋白的表達的方法、化合物和組合物。所述方法、化合物和組合物用于治療、預防、延遲或改善代謝性疾病，例如糖尿病，或其癥狀。

【技術實現步驟摘要】
本申請是申請號為201280024167.0的中國專利技術專利申請(其申請日為2012年4月13日，專利技術名稱為“PTP1B表達的反義調節”)的分案申請，原申請為國際申請號為PCT/US2012/033588的中國國家階段申請，該國際申請要求申請日為2011年4月13日，申請號為61/474,981的美國臨時申請的優先權。序列表本專利技術與電子格式的序列表一同提交。序列表以于2012年4月12日創建的命名為BIOL0149WOSEQ.txt的文件來提供，其大小為111Kb。序列表的電子格式中的信息以其整體通過引用并入本文。領域本文提供了在動物中降低PTP1BmPvNA和蛋白的表達的方法、化合物和組合物。所述方法、化合物和組合物用于，例如，治療、預防、延遲或改善與代謝疾患相關聯的疾病、尤其是與糖尿病相關聯的疾患。背景蛋白酪氨酸磷酸酶IB(PTP1B)是PTP家族的成員(Barford,等,Science1994.263:1397-1404)和細胞溶質酶(Neel和Tonks,Curr.Opin.CellBiol.1997.9:193-204)。PTP1B在包括作為胰島素代謝的關鍵調節物的諸如肝、肌肉和脂肪的組織中普遍表達(Goldstein,Receptor1993.3:1-15)，在其中其為主要的PTP酶。PTP1B被認為是胰島素信號傳遞的負向調控物。PTP1B與胰島素受體相互作用并使之去磷酸化，從而衰減并可能地終止胰島素信號轉導(Goldstein等,J.Biol.Chem.2000.275:4383-4389)。PTP1B在胰島素信號傳遞中的生理作用已在基因敲除的小鼠模型中得以證明。缺少PTP1B基因的小鼠受保護免于胰島素抗性和肥胖(Elchebly等,Science1999.283:1544-1548)。PTP1B缺陷的小鼠具有低水平的肥胖，升高的基礎代謝速率以及總能量消耗，并受保護免于飲食誘導的肥胖。胰島素刺激的葡萄糖攝入在骨骼肌中是升高的，但是脂肪組織未受影響，提供了PTP1B缺陷的小鼠中升高的胰島素敏感性是組織特異性的證據(Klaman等,Mol.Cell.Biol.2000.20:5479-5489)。這些小鼠是表型正常的，且也對飲食誘導的肥胖、胰島素抗性有抵抗力并對于高脂肪飲食具有顯著較低的甘油三酯水平。因此，在罹患II型糖尿病、代謝綜合征、糖尿病性血脂異常或相關的代謝性疾病的患者中抑制PTP1B將是有利的。PTP1B的反義抑制提供了超越常規小分子抑制物的獨特的優點，這是因為，反義抑制物不依賴于化合物與蛋白的競爭性結合而通過降低PTP1B的表達直接抑制活性。反義技術作為降低某些基因產物的表達的有效方式而出現，且因此證明在用于調節PTP1B的大量的治療、診斷和研究應用中是特別有用的。目前缺少用于治療代謝疾患的可接受的選擇。因此本文的目的是提供用于治療此類疾病和疾患的化合物和方法。本申請中引用的所有文獻或文獻的部分包括但不限于專利、專利申請、文章、書籍和論文，關于本文所討論的文獻的部分及其整體通過引用清楚地并入本文。概述本文提供的是用于調節PTP1B的表達和治療、預防、延遲或改善與代謝疾患相關聯的疾病、尤其是與糖尿病和/或其癥狀相關聯的疾患的方法、化合物和組合物。附圖簡述本領域的技術人員通過參照附圖可更好地理解本專利技術的大量的目的和優點，其中：圖1顯示了PTP1B反義寡核苷酸，ISIS404173和ISIS142082以8mgk/周降低PTP1B蛋白表達的蛋白質印跡，證明了化合物的效力。參見表47。圖2是恒河猴中的關鍵耐受性研究的匯總表(參見實施例17)。圖3是在劑量響應臨床前研究中人PTP1BmRNA的圖示降低。將用ISIS404173進行的處理與用先前的臨床候選物ISIS113715進行的處理相比較。如本文所示，與利用ISIS113715的給藥相比較，利用ISIS404173的給藥更有效且導致PTP1BmRNA水平的顯著降低。具體而言，在0.3μM劑量時，與ISIS113715相比較利用ISIS404173具有PTP1BmRNA水平的5倍降低。詳述應理解的是，如權利要求所稱，上述一般說明和以下的詳細描述僅是示例性的和闡釋性的并非對本專利技術的限制。在本文中，除非另外指明，單數的使用包括復數。如本文所用，除非另外指明，“或”的使用意味著“和/或”。此外，術語“包括(including)”以及其它形式，例如，“包括(includes)”和“包括(included)”，是非限制性的。同樣，除非另外特別指明，術語諸如“元素”或“組分”包括含一個單位的元素和組分，和含一個以上子單位的元素和組分。本文所用的章節標題僅用于組織的目的，并不被解釋為限制所描述的主題物質。該申請中所引用的所有文獻或文獻的部分包括但不限于專利、專利申請、文章、書籍和論文，關于本文所討論的文獻的部分及其整體通過引用清楚地并入本文。定義除非提供特定的定義，關于本文所描述的分析化學、合成有機化學和醫藥化學所用的名稱及其程序和技術是本領域中熟知和常用的那些。標準計算可用于化學合成和化學分析。如果允許，本申請中所引用的所有文獻，或文獻的部分，包括但不限于所有專利、申請、公開的申請或其它期刊出版物，GENBANK登錄號和通過諸如美國國立生物技術信息中心(NCBI)的數據庫可獲得的相關的序列信息和貫穿本文的公開內容中提及的其它數據，關于本文所討論的文獻的部分及其整體通過引用并入。除非提供特定的定義，關于本文所描述的分析化學、有機合成化學和醫學化學和藥物化學所用的名稱及其程序和技術是本領域中熟知和常用的那些。標準計算可用于化學合成和化學分析。如果允許，所有專利、申請、公開的申請和其它出版物，GENBANK登錄號和通過諸如美國國立生物技術信息中心(NCBI)和貫穿本文的公開內容中提及的其它數據的數據庫可獲得的相關的序列信息關于本文所討論的文獻的部分以及以其整體通過引用并入本文。除非另外指明，以下的術語具有下面的含義：“2’-O-甲氧乙基”(也為2’-MOE和2’-O(CH2)2-OCH3)指巖藻糖基環的2’位置的O-甲氧基-乙基修飾。2’-O-甲氧基乙基修飾的糖是修飾的糖。“2’-O-甲氧乙基核苷酸”意為含2’-O-甲氧乙基修飾的糖部分的核苷酸。“3’靶位”指與特定的反義化合物的3’-大部分核苷酸互補的靶核酸的核苷酸。“5’靶位”指與特定的反義化合物的5’-大部分核苷酸互補的靶核酸的核苷酸。“5-甲基胞嘧啶”意為具有與5’位置連接的甲基修飾的胞嘧啶。5-甲基胞嘧啶是修飾的核堿基。“約”意為值的±10％之內。例如，若稱，“可將標志物增加約50％”，其含義為可將標志物增加45％-55％之間。“活性藥劑”意為藥物組合物中當被施用于個體時提供治療益處的物質。例如，在某些實施方案中，靶向PTP1B的反義寡核苷酸是活性藥劑。“活性靶區域”或“靶區域”意為一種或多種活性反義化合物所靶向的區域。“活性反義化合物”意為降低靶核酸水平或蛋白水平的反義化合物。“脂肪形成”意為來自前成脂肪細胞的脂肪細胞的形成。“脂肪生成”意為脂肪的產生或形成，無論是脂肪變性或脂肪浸潤。“肥胖癥(adiposity)”或“肥胖(obesity)”指肥胖或與去脂肪體重有關本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種包含由20至35個連接的核苷組成的修飾的寡核苷酸的化合物，其中所述連接的核苷包含SEQ?ID?NO:26(ISIS?404173)的全部20個核堿基。

【技術特征摘要】
2011.04.13 US 61/474,9811.一種包含由20至35個連接的核苷組成的修飾的寡核苷酸的化合物，其中所述連接的核苷包含SEQIDNO:26(ISIS404173)的全部20個核堿基。2.如權利要求1所述的化合物，其由單鏈修飾的寡核苷酸組成。3.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸與SEQIDNO:1至少96％互補。4.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸與SEQIDNO:1至少97％互補。5.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸與SEQIDNO:1至少98％互補。6.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸與SEQIDNO:1至少99％互補。7.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸與SEQIDNO:1100％互補。8.如權利要求1所述的化合物，其中至少一個核苷間鍵是修飾的核苷間鍵。9.如權利要求8所述的化合物，其中每個核苷間鍵是硫代磷酸酯核苷間鍵。10.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸的至少一個核苷包含修飾的糖。11.如權利要求10所述的化合物，其中所述至少一種修飾的糖是雙環糖。12.如權利要求11所述的化合物，其中所述至少一種雙環糖中的每一個包含4’-CH2-N(R)-O-2’橋連基，其中R獨立地為H、C1-C12烷基或保護基。13.如權利要求11所述的化合物，其中所述至少一種雙環糖中的每一個包含4’-CH(CH3)-O-2’橋連基。14.如權利要求10所述的化合物，其中至少一種修飾的糖包含2’-O-甲氧基乙基團。15.如權利要求1所述的化合物，其中至少一種核苷包含修飾的核堿基。16.如權利要求15所述的化合物，其中所述修飾的核堿基是5-甲基胞嘧啶。17.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸包括：間隙區段，其由連接的脫氧核苷組成；5’翼狀區段，其由連接的核苷組成；和3’翼狀區段，其由連接的核苷組成；其中所述間隙區段位于所述5’翼狀區段和所述3’翼狀區段之間且其中每個翼狀區段的每個核苷包含修飾的糖。18.如權利要求17所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸包括：間隙區段，其由10個連接的脫氧核苷組成；5’翼狀區段，其由5個連接的核苷組成；和3’翼狀區段，其由5個連接的核苷組成；其中所述間隙區段位于所述5’翼狀區段和所述3’翼狀區段之間且其中每個翼狀區段的每個核苷包含修飾的糖。19.如權利要求17所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸包括：間隙區段，其由10個連接的脫氧核苷組成；5’翼狀區段，其由5個連接的核苷組成；和3’翼狀區段，其由5個連接的核苷組成；其中所述間隙區段位于所述5’翼狀區段和所述3’翼狀區段之間，其中每個翼狀區段的每個核苷包含2’-O-甲氧基乙基修飾的糖；且其中每個核苷間鍵是硫代磷酸酯鍵。20.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸由20個連接的核苷組成。21.如權利要求17所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸由20個連接的核苷組成。22.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸由20至30個連接的核苷組成。23.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸由20至25個連接的核苷組成。24.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸由20至24個連接的核苷組成。25.如權利要求1所述的化合物，其中所述修飾的寡核苷酸由20至23個連接...

【專利技術屬性】
技術研發人員：桑杰·巴諾特，蘇珊·M·弗賴爾，
申請(專利權)人：ISIS制藥公司，
類型：發明
國別省市：美國;US