制備具有不可皂化物含量降低的微生物油脂的方法和所述油脂技術

一種制備不可皂化物含量和/或酯型甾醇含量降低并且包含高不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的粗制油的方法，其特征在于在含有2-15％氮源濃度的培養基中培養能夠產生包含不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的油脂的微生物，培養箱內裝備著攪拌葉輪，滿足攪拌葉輪的直徑(＝d)與培養箱內徑(＝D)的比率是d/D＝0.30至0.6的要求。（*該技術在2023年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】
本申請是申請號為200380101290.9、申請日為2003年10月9日的同名申請的分案申請。
本專利技術涉及具有不可皂化物含量和/或酯型甾醇含量降低并且包含高不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的粗制油(crudeoil)，精煉油脂(fatoroil)的生產方法，和所述油脂(粗制油或精煉油脂)以及其中摻入了該油脂(粗制油或精煉油脂)的食品和飲料、治療性營養食品、動物食品和藥物制劑。在本專利技術中，\不可皂化物\和\酯型甾醇\是指從微生物中提取的那些。因此，本專利技術涉及的\不可皂化物\和\酯型甾醇\不包括提取以后添加到粗制油中的任何不可皂化物和酯型甾醇。
技術介紹
考慮到人高不飽和脂肪酸(以下簡稱\PUFA\)的生物合成，有兩個典型的系列，ω3和ω6系列。ω(omega)是指從脂肪酸的末端甲基到第一個雙鍵所處碳原子的碳原子數目。例如，在ω6系列的情況下，亞油酸(18:2ω6)重復不飽和和碳鏈長度延長，因此變為γ-亞麻酸(18:3ω6)、二高-γ-亞麻酸(20:3ω6)，花生四烯酸(20:4ω6)和4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸(22:5ω6)。同樣地，在ω3系列的情況下，α-亞麻酸(18:3ω3)重復不飽和和碳鏈長度延長，因此變為二十碳五烯酸(20:5ω3)、7，10，13，16，19-二十二碳五烯酸(22:5ω3)和4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸(22:6ω3)。二十碳五烯酸(以下簡稱\EPA\)和二十二碳六烯酸(以下簡稱\DHA\)作為ω3系列的PUFA已知具有許多生理功能，特別是生活方式疾病預防作用，如動脈硬化和血栓形成，以及致癌作用和學習能力提高作用，已經進行了將這些PUFA應用于藥物制劑和保健的特殊食品的各種嘗試。然而，近年來，也注意到除ω3系列的PUFA(ω6和ω9系列)的生理功能。組成重要器官如血液和肝臟的脂肪酸大約10％被認為是花生四烯酸。例如，人血液磷脂中脂肪酸具有包含11％花生四烯酸、1％二十碳五烯酸和3％二十二碳六烯酸的組成。作為細胞膜的主要組成成分，花生四烯酸參與膜流動的調節，在體內新陳代謝中顯示出多種功能，此外，起著前列腺素直接前體的重要作用。特別是，近來注意到花生四烯酸作為嬰兒營養品和作為內源大麻素(cannabinoid)(2-arachidonoyl一甘油，anandamide)的構成脂肪酸，具有神經活化作用。通常，攝取富含亞油酸的食物時，亞油酸變為花生四烯酸。然而，在罹患生活方式疾病的患者和生活方式疾病后備群體(reservegroup)、嬰兒和老年人中，參與生物合成的酶的功能降低。因此，花生四烯酸的量可能不足。因此，期望攝取花生四烯酸直接作為油脂(甘油三酯的構成脂肪酸)。由于EPA和DHA作為ω3系列的PUFA，因此有豐富的魚油供應源。另一方面，作為ω6系列的PUFA的γ-亞麻酸，二高-γ-亞麻酸，花生四烯酸和4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸(22:5ω6)很難從常規油脂的供應源獲得，而且，目前，常常使用包含由微生物發酵產生的PUFA作為構成脂肪酸的油脂(甘油三酯)。例如，已經提出了一種方法，其中包含花生四烯酸作為構成脂肪酸的油脂(甘油三酯)是由培養能夠產生包含花生四烯酸作為構成脂肪酸的油脂(甘油三酯)的多種微生物而產生的。其中，已知使用特別是屬于被孢霉屬(Mortierella)的微生物制備含有高含量花生四烯酸的油脂(日本未審查專利公開號(Kokai)63(1988)-44891和63(1988)-12290)。基于許多試驗結果，據說這些油脂是安全的。然而由于這種油脂來源于微生物，在攝取方面沒有滿意的經驗。因此，目前所述油脂尚未滿意地流入社會。另一方面，包含發酵產生的花生四烯酸作為構成脂肪酸的油脂(甘油三酯)已經開始應用，其中花生四烯酸應該用于例如嬰兒營養和尤其是嬰兒配制食品中。從天然存在的產物如動物和植物制備的油脂經過提煉過程，如脫膠、脫氧、除臭、脫色、分子蒸餾和越冬(wintering)，然后作為食用油脂出售。例如，從油料植物中榨取獲得的油脂含有大量雜質，因此本身不能用作食用油脂。除了已被經常食用的芝麻油和橄欖油，這些油脂在用作食用油之前通常要精煉。例如、在脫膠過程中、未精煉的油中含有的磷脂、碳水化合物、樹脂、蛋白化合物、微量金屬和著色物質被除去。在脫氧(堿煉)過程中、脂肪酸、著色物質、磷脂、微量金屬、含硫化合物、不溶于油的物質和氧化產物被除去。在脫色過程中、著色物質、膠粘物質、微量金屬、皂成分、氧化產物和磷脂被除去。在除臭過程中、脂肪酸、單酸甘油酯、甘油二酯醛、醇類、酮、烴類、著色物質、含硫化合物、過氧化物、氧化降解產物和其它臭氣組分被除去。油脂含有有機化合物，它們可溶于油并且很少會被堿降解，稱作\不可皂化物\。例如，已知化合物如高級醇、甾醇、烴類，生育酚和類胡蘿卜素是不可皂化物的組成成分。在油脂煉制過程中，不可皂化物含量可以降低但是不能完全被除去。已知甾醇在由微生物制備的油脂中作為不可皂化物的主要組分存在。油脂中存在的甾醇被分成游離型和酯型。在提煉過程中，可以除去游離型，但是，另一方面，幾乎不能除去酯型。例如，在脫膠、脫氧、脫色和除臭過程以后，豆油的甾醇含量(mg/g)，游離型分別是3.4，3.0，2.0和1.6，和酯型分別是0.6，0.6，0.6和0.6(\ShokuyoYushinoKagaku(Scienceofediblefatoroil)\20-21頁，SAIWAISHOBO)。由于不能除去的甾醇等等作為不可皂化物的一部分存在，因此通常，不可皂化物含量被廣泛用作精煉油脂的質量指數或作為提煉過程的控制指數。例如，根據日本農業標準，食用紅花油，食用大豆油和食用棕櫚油中不可皂化物的含量應該不超過1.0％(農業、林業和漁業部的第523號通告(1969年3月31日))。對于嬰兒，膽固醇是必需的，具有增加的膽固醇含量的嬰兒配制食品(formula)被出售。蔬菜可食用油脂中含有源自植物的甾醇。源自蔬菜的甾醇的存在不利地抑制嬰兒對膽固醇的吸收(ShokuhintoKaihatsu(FoodProcessingAndIngredients)，33卷，2期，42-45頁(1998))。因此，當考慮到食用油脂摻入嬰兒配制食品的應用時，強烈期望甾醇含量低的，就是說，不可皂化物含量低的食用油脂。培養屬于被孢霉屬的微生物產生的油脂的主要部本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種制備酯型甾醇含量降低并且包含高不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的粗制油的方法，其特征在于在培養箱內在含有6?15％氮源濃度的培養基中培養能夠產生包含不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的油脂的微生物，所述培養箱內裝備著攪拌葉輪，滿足攪拌葉輪的直徑d與培養箱內徑D的比率是d/D＝0.34至0.6的要求，所述培養箱具有至少1m3的使用體積，且所述微生物是屬于被孢霉屬或被孢霉屬亞屬的微生物。

【技術特征摘要】
2002.10.11 JP 2002-2991991.一種制備酯型甾醇含量降低并且包含高不飽和脂肪酸作為構
成脂肪酸的粗制油的方法，其特征在于在培養箱內在含有6-15％氮源
濃度的培養基中培養能夠產生包含不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的油
脂的微生物，所述培養箱內裝備著攪拌葉輪，滿足攪拌葉輪的直徑d
與培養箱內徑D的比率是d/D＝0.34至0.6的要求，所述培養箱具有至
少1m3的使用體積，且所述微生物是屬于被孢霉屬或被孢霉屬亞屬的
微生物。
2.根據權利要求1的方法，其中，培養基滅菌前調節pH不超過
5，滅菌后pH再調節至適于開始培養的值。
3.一種制備精煉油脂的方法，其特征在于包括精煉根據權利要
求1至2任一項的方法產生的粗制油。
4.根據權利要求1或2任一項的制備包含酯型甾醇含量降低的
高不飽和脂肪酸作為構成脂肪酸的粗制油的方法，或根據權利要求3
的制備精煉油脂的方法，其特征在于包含所述高不飽和脂肪酸作為構
成脂肪酸的油脂的至少70％是甘油三酯。
5.根據權利要求1或2任一項的方法，其中組成油脂的高不飽
和脂肪酸是γ-亞麻酸(18:3ω6)，二高-γ-亞麻酸(20:3ω6)，
花生四烯酸(20:4ω6)，7，10，13，16-二十二碳四烯酸(22:4ω
6)，4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸(22:5ω6)，α-亞麻酸(18:
3ω3)，6，9，12，15-十...

【專利技術屬性】
技術研發人員：秋元健吾，東山堅一，河島洋，角田元男，
申請(專利權)人：日本水產株式會社，
類型：發明
國別省市：日本;JP