樹參提取物在制備抗菌類天然藥物和保健食品中的應用制造技術

一種樹參提取物在制備抗菌類天然藥物和保健食品中的應用，本發明專利技術采用管碟法對樹參的乙醇或甲醇提取液進行了抑菌活性的研究，發現樹參醇提取液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和產氣大腸桿菌的抑制效果較強，是篩選、開發植物源殺菌劑的前提和基礎，為制備抗菌類天然藥物或抗菌類天然保健食品提供了依據。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種樹參提取物的功能研究，具體涉及樹參提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及產氣大腸桿菌的抑菌作用，同時還涉及樹參提取物在抗菌類天然藥物和保健品或食品中的作用。
技術介紹
我國植物種類繁多，資源豐富，環保無副作用的特點使其研究價值高，發展潛力大。植物的次生代謝產物已超過40萬種，從中發現活性強的植物源殺菌劑是當今藥物研究的一個重要課題，也是現代抗菌藥物的發展方向之一。近年來抗生素和化學合成藥物廣泛應用于人類疾病、養殖和種植等多方面的防治，效果非常顯著，但長期大量使用會使細菌產生耐藥性及其本身具有毒副作用而對人類生存和環境造成威脅。中草藥是我國特有的中醫藥理論與實踐的產物，其具有藥用、保健、營養無副作用等功效，還具有低毒、低殘留、耐藥性發生率低和資源豐富等多種因素，而愈來愈受國內外研究者的重視。植物是生物活性化合物的巨大天然寶庫，目前國內外對植物抑菌的研究非常活躍。樹參，俗名楓荷梨，多分布在江南的深山區,喜在叢林蔭蔽處生長,樹參(Dendropanaxdentiger(Harms)Merr.)為五加科(Araliaceae)的一種藥用植物，為五加科常綠喬木，高2-8米，樹皮灰白色，稍平滑，嫩枝青色，木質脆；單葉，螺旋狀互生，葉形變異很大，不分裂葉片通常為荷樹葉橢圓和梨樹葉卵園形，分裂葉片呈現楓樹葉形，同一棵樹有三種不同形態的葉片，傘形花序頂生，總花梗粗壯，長1-3.5厘米，果實為碩果，生長在陰濕的常綠闊葉林中，主要分布于長江以南各省區。據《中華本草》記載：樹參(Dendropanaxdentiger(Harms)Merr.)常用于風濕及類風濕性關節炎、臂叢神經炎、癱瘓、扭傷、癰癤、月經不調、小兒麻痹后遺癥等疾病的治療。綜述國內外文獻，發現樹參同屬植物的粗提物具有很強的抗細菌、真菌、殺蟲、抗癌、抗動脈粥樣硬化、抗疲勞和抗補體等藥理活性。但對于樹參，卻未見其在抗金黃色葡萄球菌等菌類中的應用報道。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種樹參提取物在制備抗菌類天然藥物和抗菌類天然保健品或食品中的應用。為達上述目的，本專利技術所采用的技術方案是：一種樹參提取物在抑制細菌中的應用，其中，該樹參提取物為樹參的乙醇或甲醇提取液，該細菌指大腸桿菌、金黃色葡萄球菌或產氣大腸桿菌。本專利技術同時提供一種樹參提取物在制備抗菌類天然藥物或保健食品中的應用，其中，該菌指大腸桿菌、金黃色葡萄球菌或產氣大腸桿菌，該樹參提取物為樹參的乙醇或甲醇提取液。上述樹參的乙醇或甲醇提取液是取干燥的樹參粉碎，按1g樹參粉加20-50ml75％-95％質量濃度的乙醇或甲醇溶液的比例加入乙醇或甲醇水溶液，浸泡24-72小時，過濾離心，取上清液，用旋轉蒸發儀濃縮至濃度為0.5-2g/ml，濃縮液經微孔濾膜器除菌，即得無菌的樹參提取液。其中，所述微孔濾膜器是孔徑為0.22μm的無菌過濾器。本專利技術采用微孔過濾器除菌技術替代常用的高溫高壓滅菌方法，能避免破壞或改變其中的有效成分。本專利技術采用管碟法對樹參的乙醇或甲醇提取液和超純水提取液進行了抑菌活性的研究，發現樹參醇提取液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和產氣大腸桿菌的抑制效果較強，樹參水提液對金黃色葡萄球菌抑制效果較強，是篩選、開發植物源殺菌劑的前提和基礎，為制備抗菌類天然藥物或抗菌類天然保健品提供了依據。具體實施方式1.實驗器材供試菌種：大腸桿菌(Escherichiacoli)，金黃色葡萄球菌(StaphyloccocusaureusRosenbach)，產氣大腸桿菌(coli-aerogenesgroup),為武漢菌種中心購買。供試植物：樹參(Dendropanaxdentiger(Harms)Merr.)。實驗儀器：數顯恒溫水浴器(HH-4)國華電器；氣浴恒溫搖床(THZ-820)國旺儀器；冰箱(容聲BCD-185DKA)；超凈工作臺(SW-CJ-1FD)蘇凈安泰；生化培養箱(SPX-250B-Z)上海博訊實業有限公司；立式壓力蒸汽滅菌器(LS-50HJ)江陰濱江醫療設備有限公司；超純水器(UPWS-I-10T)杭州永潔達凈化有限公司；電磁爐(GCA16)珠海格力小家電有限公司等。LB液體培養基：蛋白胨10g、酵母粉5g、NaCl10g、pH值7.0、加無菌水至1000ml。LB固體培養基：蛋白胨10g、酵母粉5g、NaCl10g、瓊脂15-20g、pH值7.0、加無菌水至1000ml。2.實驗方法樹參水提液的制備：稱取供試植物干品20g，絞碎后置電磁爐(GCA16)中，加超純水500ml，浸泡4h后，用小火煮30min，過濾，離心，得上清液，殘渣再加500ml水煮30min，離心，取上清液，合并兩次濾液，濾液加熱濃縮至50ml，得樹參水提取。水提液置立式壓力蒸汽滅菌器(LS-50HJ)中高溫高壓(120℃，30min)滅菌后放入超凈工作臺備用。樹參醇提液的制備：稱取供試植物干品5g，絞碎后分別置帶塞廣口瓶中，加入75％乙醇100ml浸泡48h，經過濾離心，濾液用旋轉蒸發儀濃縮至5ml(濃度為1g/ml)，濃縮液經微孔濾膜(0.22μm)除菌，得樹參醇提液，放入超凈工作臺備用。菌懸液的制備：用平板畫線法將金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、產氣大腸桿菌分別接種于LB固體培養基上，用封口膜封好，37℃置生化培養箱中培養24h活化細菌，活化后，用接種環挑取同一菌落的細菌，接種于裝有LB液體培養基的試管內，然后置于氣浴恒溫搖床中37℃培養48h，分別制得三種菌的菌懸液，以用作實驗菌種。3.抑菌試驗3.1.提取物抑菌效果的測定采用管碟法。將實驗菌種搖勻，用移液槍移取50ul菌懸液于瓊脂平板上，平鋪涂勻，3種實驗菌，每種涂10個平板，然后將已滅菌的牛津杯等間距置于瓊脂表面上，每皿4個，全部排好之后，在超凈臺上靜放10分鐘。用1ml滅菌移液槍吸取樹參水提取液200ul，注入擺好的牛津杯中，每皿中3個牛津杯注入樹參水提取液，另一牛津杯注入滅菌的超純水200ul作對照，一種細菌做一個平板，得3個水提藥平板。同樣，醇提液也是如此(以75％乙醇100ml濃縮至5ml為對照液)。之后置于37℃生化培養箱內培養24h，觀察培養皿內的細菌生長情況，并用千分尺測量抑菌圈的直徑。將一個培養皿中藥物的抑菌圈效果取平均值，并且數據精確到小數點后一位，結果如下表1。表1樹參提取液的抑菌效果(單位：mm)樹參提取液本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種樹參提取物在抑制細菌中的應用，其中，該樹參提取物為樹參的乙醇或甲醇提取液，該細菌指大腸桿菌、金黃色葡萄球菌或產氣大腸桿菌。

【技術特征摘要】
1.一種樹參提取物在抑制細菌中的應用，其中，該樹參提取物為樹參的乙
醇或甲醇提取液，該細菌指大腸桿菌、金黃色葡萄球菌或產氣大腸桿菌。
2.一種樹參提取物在制備抗菌類天然藥物或保健食品中的應用，其中，該
樹參提取物為樹參的乙醇或甲醇提取液，該菌指大腸桿菌、金黃色葡萄球菌或
產氣大腸桿菌。
3.如權利要求1或2所述的應用，其中，所述樹參的乙醇或甲醇提取液...

【專利技術屬性】
技術研發人員：鄒一平，韓成云，劉智凱，
申請(專利權)人：宜春學院，鄒一平，
類型：發明
國別省市：江西;36