一種紅花石蒜總堿的制備方法及其應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種操作簡單，設(shè)備要求不高的紅花石蒜總堿的制備方法，包括以下步驟：將紅花石蒜藥材粉碎后用乙醇回流提取兩次，合并提取液后用紗布過濾除去沉淀，將上清液減壓濃縮得到流浸膏；將流浸膏用去離子水混懸分散后用石油醚萃取脫脂4次，萃取之后的水層再使用二氯甲烷萃取4次，將最后留下的水層用紗布過濾，棄掉濾液并保留濾渣；將濾渣用乙醇混懸分散，攪拌后用濾紙過濾并棄去濾液保留濾渣，重復(fù)3次最終得到紅花石蒜總堿粗品；將紅花石蒜總堿粗品用去離子水混懸，煮沸溶解后用濾膜過濾并收集濾液，將所述濾液減壓濃縮至小體積后放置室溫下析出粉末，之后再用去離子水淋洗，抽干，減壓干燥至恒重即為紅花石蒜總堿。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種紅花石蒜總堿的制備方法及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
生物堿是自然界中廣泛存在的一大類堿性含氮化合物，是許多中草藥的有效成分，是自然界中存在的一類重要物質(zhì)。石蒜別名老鴉蒜、蒜頭草、蜂螂花，來源為石蒜科植物石蒜Lycorisradiata(L.Her.)Herb的鱗莖，其性溫、味辛甘、有毒，具有消腫，解毒，催吐的功效。研究表明，石蒜總生物堿是其主要有效部位，從石蒜的不同部位分離得到了化學(xué)成分含石蒜堿(lycorine)、加蘭他敏(galanthamine)、石蒜胺堿(lycora-mine)、石蒜倫堿(Lycorenine)、多花水仙堿(Tazettine)、偽石蒜堿(Pseudolycorine)、二氫石蒜堿(dihydrolycorine)等，臨床主要用于療瘡腫毒、食物中毒、痰涎奎塞、黃疽、水腫腹水等的治療。紅花石蒜(Lycorisradiatavar.radiata)是石蒜的一個(gè)變種。現(xiàn)階段，中藥生物堿的提取工藝已較成熟，但這些方法步驟繁瑣、有機(jī)溶劑用量大并且大設(shè)備無法實(shí)現(xiàn)，不能在大生產(chǎn)中應(yīng)用。紅花石蒜總堿在治療慢性附睪炎藥物的制備中的應(yīng)用也未見報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的旨在提供一種操作簡單，設(shè)備要求不高的紅花石蒜總堿的制備方法。本專利技術(shù)的另一目的是提供紅花石蒜總堿在制備慢性附睪炎藥物中的應(yīng)用。本專利技術(shù)的一種紅花石蒜總堿的制備方法，包括以下工藝步驟：步驟①：將紅花石蒜藥材粉碎成粗粉后用乙醇回流提取1-3次，合并兩次提取液后用紗布過濾除去沉淀，將過濾后的上清液減壓濃縮得到流浸膏；步驟②：將步驟①中的流浸膏用去離子水混懸分散后用石油醚萃取脫脂3-5次，萃取之后的水層再使用二氯甲烷萃取3-5次，將最后留下的水層用紗布過濾，棄掉濾液并保留濾渣；步驟③：將步驟②中的濾渣用乙醇混懸分散，攪拌后用濾紙過濾并棄去濾液保留濾渣，重復(fù)上述操作2-4次最終得到紅花石蒜總堿粗品；步驟④：將步驟③中的紅花石蒜總堿粗品用去離子水混懸，煮沸溶解后用濾膜過濾并收集濾液，將所述濾液減壓濃縮至小體積后放置室溫下析出粉末，之后再用去離子水淋洗，抽干，減壓干燥至恒重即為紅花石蒜總堿。所述步驟①和步驟③中的乙醇濃度為75％。所述步驟①中第一次回流提取時(shí)紅花石蒜藥材粗粉與乙醇的投料比為1：10～1：14(w/v),第二次回流提取時(shí)紅花石蒜藥材粗粉與乙醇的投料比為1：8～1：12(w/v)。所述步驟①中兩次回流提取時(shí)間分別為120～240分鐘。所述步驟③中濾渣用乙醇混懸分散時(shí)每10g濾渣加75％乙醇10ml～30ml；所述步驟④中紅花石蒜總堿粗品用去離子水混懸時(shí)，每10g紅花石蒜總堿粗品加水3500～4500ml。所述步驟④中的濾膜孔徑為0.45μm。所述步驟④中濾液減壓濃縮至小體積時(shí)，每10g紅花石蒜總堿保留80～120ml溶液。所述步驟④中減壓干燥具體為60℃溫度減壓干燥24小時(shí)。紅花石蒜總堿在治療慢性附睪炎的藥物制備中的應(yīng)用。本專利技術(shù)相對于現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：1、本專利技術(shù)的一種紅花石蒜總堿的制備方法操作簡單，所需儀器設(shè)備要求不高，可以用于大批量的提取紅花石蒜總堿。2、本專利技術(shù)的紅花石蒜總堿在制備慢性附睪炎藥物中的應(yīng)用，為中藥治療慢性附睪炎提供了一個(gè)新的有效途徑。3、本專利技術(shù)為紅花石蒜總堿進(jìn)一步的利用和開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。4、本專利技術(shù)為將來從紅花石蒜尋求治療附睪炎的藥物先導(dǎo)化合物提供了研究資料和物質(zhì)基礎(chǔ)。5、本專利技術(shù)采用雄兔整體動(dòng)物模型做實(shí)驗(yàn)，證明了紅花石蒜生物總堿作為藥物成分對附睪炎治療具有顯著效果。附圖說明圖1為本專利技術(shù)的制備方法流程圖。具體實(shí)施方式以下結(jié)合附圖，對本專利技術(shù)的一種紅花石蒜總堿的制備方法及其應(yīng)用做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。如圖1所示，本專利技術(shù)的一種紅花石蒜總堿的制備方法，包括以下工藝步驟：步驟①：將紅花石蒜藥材1kg，粉碎成20目粗粉后用75％乙醇回流提取兩次，第一次12倍量，第二次10倍量，每次180分鐘，合并兩次提取液后用紗布過濾除去沉淀，將過濾后的上清液減壓濃縮得到流浸膏；步驟②：將步驟①中的流浸膏用200ml去離子水混懸分散后用石油醚萃取脫脂4次(每次200ml)，萃取之后的水層再使用二氯甲烷萃取4次(每次200ml)，將最后留下的水層用紗布過濾，棄掉濾液并保留濾渣；步驟③：將步驟②中的濾渣用75％乙醇混懸分散(每10g濾渣加75％乙醇20ml)攪拌后用濾紙過濾并棄去濾液保留濾渣，重復(fù)上述操作3次最終得到紅花石蒜總堿粗品；步驟④：將步驟③中的紅花石蒜總堿粗品用去離子水混懸(每10g總堿粗品加水4000ml)，煮沸溶解后用0.45μm濾膜過濾并收集濾液，將濾液減壓濃縮至小體積(每10g總堿保留100ml溶液)后放置室溫下析出黃色粉末，之后再用去離子水淋洗，抽干，60℃溫度減壓干燥24小時(shí)至恒重即為紅花石蒜總堿。紅花石蒜總堿在治療慢性附睪炎的藥物制備中的應(yīng)用，具體實(shí)驗(yàn)方案如下：一、方法新西蘭雄性白兔40只，隨機(jī)分為4組，每組10只。分別為對照組，空白組，生物堿組，西藥組。對照組不予造模，另外3組用同樣方法實(shí)施造模。造模方法：40只實(shí)驗(yàn)兔術(shù)前禁食8h以上，稱重后，3％戊巴比妥鈉lml/kg，耳緣靜脈注射，麻醉成功后，仰臥位固定于兔鼠解剖臺(tái)上，手術(shù)野常規(guī)剪毛，8％硫化鈉褪毛，碘伏消毒皮膚，充分暴露雄兔兩側(cè)陰囊，取陰囊正中切口，逐層分離組織直至睪丸鞘膜臟層后，即可提出睪丸，在睪丸下極可找到附睪尾部，左手固定附睪尾部，右手持注射器，將注射器針頭朝與附睪管約45°方向，斜向刺入附睪，直至針尖有落空感后，邊向外抽拉針尖，邊注入用注射器注入冰乙酸0.2ml，注射完畢后，按壓注射部位片刻。在保證飲水條件下，普通塊狀飼料喂養(yǎng)。按照原分組情況分別放回籠中。麻醉失效后按常規(guī)飼養(yǎng)，觀察雄兔陰囊部傷口3天。于造模后第3天后分別從每組中隨機(jī)抽取2只雄兔，將8只雄兔空氣栓塞處死，做好標(biāo)記后快速解剖其附睪尾部，觀察其附睪尾部組織的色澤、與周圍組織粘連情況，取出附睪尾部組織稱重后光鏡下觀察，并做病理切片，鑒定慢性附睪炎雄兔模型造模是否成功。本試驗(yàn)中6只白兔均附睪尾部組織明顯增大，顏色相對較暗，與周圍組織有輕度粘連，附睪腔內(nèi)組織充血水腫明顯，腔內(nèi)分泌物增多，部分組織纖維化明顯，附睪管腔狹窄甚至閉塞，出現(xiàn)明顯的炎癥反應(yīng)，病理切片中可見較多炎癥細(xì)胞，說明造模已成功。對照組2只雄兔附睪尾部組織呈淡紅色，與本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種紅花石蒜總堿的制備方法，其特征在于，包括以下工藝步驟：步驟①：將紅花石蒜藥材粉碎成粗粉后用乙醇回流提取1?3次，合并提取液后用紗布過濾除去沉淀，將過濾后的上清液減壓濃縮得到流浸膏；步驟②：將所述步驟①中的流浸膏用去離子水混懸分散后用石油醚萃取脫脂3?5次，萃取之后的水層再使用二氯甲烷萃取3?5次，將最后留下的水層用紗布過濾，棄掉濾液并保留濾渣；步驟③：將所述步驟②中的濾渣用乙醇混懸分散，攪拌后用濾紙過濾并棄去濾液保留濾渣，重復(fù)上述操作2?4次最終得到紅花石蒜總堿粗品；步驟④：將所述步驟③中的紅花石蒜總堿粗品用去離子水混懸，煮沸溶解后用濾膜過濾并收集濾液，將所述濾液減壓濃縮至小體積后放置室溫下析出粉末，之后再用去離子水淋洗，抽干，減壓干燥至恒重即為紅花石蒜總堿。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種紅花石蒜總堿的制備方法，其特征在于，包括以下工藝步驟：
步驟①：將紅花石蒜藥材粉碎成粗粉后用乙醇回流提取1-3次，合并提取液后用紗布過濾除去沉淀，將過濾后的上清液減壓濃縮得到流浸膏；
步驟②：將所述步驟①中的流浸膏用去離子水混懸分散后用石油醚萃取脫脂3-5次，萃取之后的水層再使用二氯甲烷萃取3-5次，將最后留下的水層用紗布過濾，棄掉濾液并保留濾渣；
步驟③：將所述步驟②中的濾渣用乙醇混懸分散，攪拌后用濾紙過濾并棄去濾液保留濾渣，重復(fù)上述操作2-4次最終得到紅花石蒜總堿粗品；
步驟④：將所述步驟③中的紅花石蒜總堿粗品用去離子水混懸，煮沸溶解后用濾膜過濾并收集濾液，將所述濾液減壓濃縮至小體積后放置室溫下析出粉末，之后再用去離子水淋洗，抽干，減壓干燥至恒重即為紅花石蒜總堿。
2.如權(quán)利要求1所述的一種紅花石蒜總堿的制備方法，其特征在于，所述步驟①和步驟③中的乙醇濃度為75％。
3.如權(quán)利要求2所述的一種紅花石蒜總堿的制備方法，其特征在于，所述步驟①中第一次回流提取時(shí)紅花石蒜藥材粗粉與乙醇的投料比為1：10～1：14(w/v)...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉志明，胡軍，周曙光，周玉成，黃萍，李志鵬，黃曉云，秦榕，蔣夢真，羅香花，劉錦博，劉圣博，
申請(專利權(quán))人：劉志明，胡軍，周玉成，周曙光，
類型：發(fā)明
國別省市：云南;53