懸浮細胞球免疫熒光染色裝置制造方法及圖紙

本實用新型專利技術公開了一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置，屬于微生物細胞學裝置，包括細胞小室，所述細胞小室為上端敞口的圓臺型結構，弧形缺口與掛件交錯分布，細胞小室的底面為有機材料膜，還包括套裝于細胞小室下端外部的染色套件，染色套件是中空的圓臺型結構，中部形成內底，內底為下陷的圓錐面。本實用新型專利技術結構簡單、制造成本低，使用方便，利于推廣應用；內底呈圓錐面設計有利于液體的聚集；染色套件采用具有韌性的材料制成能夠達到將上室內液體吸至下室的目的。

【技術實現步驟摘要】

本技術屬于微生物細胞學裝置，具體涉及一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置。
技術介紹
免疫熒光染色技術是常用細胞與分子生物學實驗方法，它應用抗原-抗體反應原理，以熒光物質標記抗體而進行抗原定位，用于觀察目的蛋白的表達以及蛋白間是否存在共定位或共表達關系。對于多見的貼壁細胞免疫熒光染色，常用且普遍采用的是使細胞“爬片”于多聚賴氨酸包被的載體表面，然后進行經典的染色操作。然而對于在干細胞研究中常用的懸浮細胞球，因為它不貼壁，所以在經典的實驗操作過程中極易造成細胞球的丟失。盡管現有文獻報道使用多聚賴氨酸包被的蓋玻片即可將懸浮細胞球粘附于蓋玻片[1~3]，但實際操作結果并非如此，即使使用多聚賴氨酸包被的蓋玻片，仍僅有10%~20%細胞球會粘附于蓋玻片表面，且其中95%以上的細胞球會在經典操作過程中丟失，最終導致樣本量過少而實驗失敗。針對懸浮細胞的不貼壁性，現有文獻報道了多種可用于懸浮細胞球的免疫熒光染色方法。Geraldo,S.等人研究發現將細胞球固定于膠原蛋白凝膠中確實可以保證細胞球不丟失[4]，但此種方法仍然存在缺陷：首先，凝膠中的膠原蛋白纖維會起到遮擋作用，影響共聚焦顯微鏡的激發光強度和穿透距離；其次，為了達到同樣的染色效果，染色過程中需要抗體工作液濃度加倍甚至三倍，并延長抗體孵育時間，增加了消耗的時間和實驗經費[5]。如果將含細胞球的膠原蛋白凝膠鋪于細胞小室內，雖然可以在一定程度上減少抗體工作液量，但是實際應用中，小室底部的有孔PET膜會影響高倍鏡下對細胞細節的觀察。參考文獻1.Wu,L.,etal.,Jiaweisinisanfacilitatesneurogenesisinthehippocampusafterstressdamage.NeuralRegenRes,2013.8(12):p.1091-102.2.Zhou,X.,etal.,Isolation,cultivationandidentificationofbraingliomastemcellsbymagneticbeadsorting.NeuralRegenRes,2012.7(13):p.985-92.3.Velpula,K.K.,etal.,CordbloodstemcellsrevertgliomastemcellEMTbydownregulatingtranscriptionalactivationofSox2andTwist1.Oncotarget,2011.2(12):p.1028-42.4.Geraldo,S.,A.Simon,andD.M.Vignjevic,Revealingthecytoskeletalorganizationofinvasivecancercellsin3D.JVisExp,2013(80):p.e50763.5.Artym,V.V.andK.Matsumoto,Imagingcellsinthree-dimensionalcollagenmatrix.CurrProtocCellBiol,2010.Chapter10:p.Unit10181-20。
技術實現思路
本技術是為了克服現有技術中存在的懸浮細胞球不貼壁生長難以制樣以及現有懸浮細胞球免疫熒光染色方法存在的各種缺點而提出，其目的是提供一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置。本技術的技術方案是：一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置，包括細胞小室，所述細胞小室為上端敞口的圓臺型結構，細胞小室的底面為有機材料膜，還包括套裝于細胞小室下端外部的染色套件，染色套件是中空且上端敞口的圓臺型結構，中部形成內底，內底為下陷的圓錐面。所述細胞小室上緣均布多個弧形缺口，且沿細胞小室的外圓周壁均布多個掛件，弧形缺口與掛件交錯分布。所述內底到染色套件頂端的垂直距離小于等于細胞小室外部的掛件下緣到細胞小室底面的垂直距離。所述染色套件的上端內徑與細胞小室下端外徑緊配合。所述染色套件采用具有韌性的材料制成。本技術的有益效果是：本技術結構簡單、制造成本低，使用方便，利于推廣應用；內底呈圓錐面設計有利于液體的聚集；染色套件采用具有韌性的材料制成能夠達到將上室內液體吸至下室的目的。附圖說明圖1本技術的結構示意圖。其中：1細胞小室2染色套件3內底4掛件5缺口。具體實施例下面結合說明書附圖及實施例對本技術懸浮細胞球免疫熒光染色裝置進行詳細說明：如圖1所示，一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置，包括細胞小室1，所述細胞小室1為上端敞口的圓臺型結構，上緣均布多個弧形缺口5，且沿細胞小室1的外圓周壁均布多個掛件4，弧形缺口5與掛件4交錯分布，細胞小室1的底面為有機材料膜，其特征在于：還包括套裝于細胞小室1下端外部的染色套件2，染色套件2是中空且上端敞口的圓臺型結構，中部形成內底3，內底3為下陷的圓錐面。所述內底3到染色套件2頂端的垂直距離小于等于細胞小室1外部的掛件4下緣到細胞小室1底面的垂直距離。所述染色套件2的上端內徑與細胞小室1下端外徑緊配合。所述染色套件2采用具有韌性的材料制成，滿足染色套件2套裝于細胞小室1下端外部時，染色套件2與細胞小室緊配合，能夠達到將上室內液體吸至下室的目的。本技術結構簡單、制造成本低，使用方便，利于推廣應用；內底呈圓錐面設計有利于液體的聚集；染色套件采用具有韌性的材料制成能夠達到將上室內液體吸至下室的目的。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置，包括細胞小室（1），所述細胞小室（1）為上端敞口的圓臺型結構，細胞小室（1）的底面為有機材料膜，其特征在于：還包括套裝于細胞小室（1）下端外部的染色套件（2），染色套件（2）是中空且上端敞口的圓臺型結構，中部形成內底（3），內底（3）為下陷的圓錐面。

【技術特征摘要】
1.一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置，包括細胞小室（1），所述細胞小室（1）為上端敞口的圓臺型結構，細胞小室（1）的底面為有機材料膜，其特征在于：還包括套裝于細胞小室（1）下端外部的染色套件（2），染色套件（2）是中空且上端敞口的圓臺型結構，中部形成內底（3），內底（3）為下陷的圓錐面。
2.根據權利要求1所述的一種懸浮細胞球免疫熒光染色裝置，其特征在于：所述細胞小室（1）上緣均布多個弧形缺口（5），且沿細胞小室（1）的外圓周壁均布多個掛件（4），弧形缺口（5）與掛件（...

【專利技術屬性】
技術研發人員：楊學軍，張辰，李濤，于圣平，劉波，周星辰，
申請(專利權)人：天津醫科大學總醫院，
類型：新型
國別省市：天津;12