本發(fā)明專利技術(shù)磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法，涉及一種免疫檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法。其目的是為了提供一種磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法，該方法綜合采用了懸浮磁微粒載體技術(shù)和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)，使系統(tǒng)能夠充分滿足臨床對(duì)檢測(cè)結(jié)果的要求。本發(fā)明專利技術(shù)所述試劑盒包括熒光素標(biāo)記的抗原、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體和包被有抗所述熒光素的抗體的磁微粒。本發(fā)明專利技術(shù)的檢測(cè)方法包括：待測(cè)樣品與熒光素標(biāo)記的抗原；然后與包被有抗熒光素的抗體的磁微粒混合；分離磁微粒；清洗后加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體；分離磁微粒；洗滌；加入發(fā)光底物，測(cè)定吸光度。本發(fā)明專利技術(shù)的檢測(cè)方法準(zhǔn)確性好、精密度高、靈敏度高，操作簡(jiǎn)單省時(shí)，檢測(cè)范圍寬。
Magnetic particle chemiluminescence immune detection reagent kit and detection method thereof
The invention discloses a magnetic particle chemiluminescence immune detection reagent kit and a detection method thereof, relating to an immunoassay reagent kit and a detection method thereof. The purpose is to provide a magnetic particle chemiluminescence immune detection kit and detection method, this method uses a combination of magnetic particle carrier technology and chemiluminescence detection technology, the system can fully meet the requirements of clinical test results. The kit of the present invention comprises a fluorescein labeled antigen, an antibody labeled with alkaline phosphatase, and a magnetic particle coated with an antibody against the fluorescein. The detection method comprises the following steps: sample with fluorescein labeled antigen to be tested; then anti fluorescein antibody magnetic particles coated with the magnetic particles; separation; cleaning after adding antibody labeled with alkaline phosphatase; separation of magnetic particles; washing; adding substrate, determination of absorbance. The detection method has the advantages of good accuracy, high precision, high sensitivity, simple and time-saving operation and wide detection range.
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種借助于生物特有的結(jié)合方法來測(cè)定或分析材料的試劑盒及其測(cè)定方法，特別是涉及一種免疫檢測(cè)試劑盒及其檢測(cè)方法。
技術(shù)介紹
自身免疫性疾病是自身免疫反應(yīng)達(dá)到一定程度而導(dǎo)致的疾病。免疫系統(tǒng)最基本的功能是認(rèn)識(shí)自身和識(shí)別異體，達(dá)到保護(hù)自身和排斥異體的目的。正常人體血清中可存在多種針對(duì)自身抗原的抗體，但它們的水平極低，不足以破壞自身成分，可清除衰老退變的自身組織，這就是自身免疫反應(yīng)。當(dāng)這種反應(yīng)過強(qiáng)，導(dǎo)致嚴(yán)重組織損傷，表現(xiàn)出臨床癥狀時(shí)，就稱為自身免疫病。這類自身免疫疾病指標(biāo)包括但不限于以下所列：AMAM2,P0,His,nucl,dsDNA,PCNA,CENPB,Jo-1,PM-Scl,Scl-70,SSB,SSA,Sm,nRNP,GBM,MPO,PR3,SAL/LP,GP210,SP100,LC-1,LKM等。對(duì)于這些指標(biāo)的檢測(cè)可以作為輔助疾病診斷的參考，但是單獨(dú)一種指標(biāo)的檢測(cè)并不能直接得出疾病診斷的結(jié)果，必須綜合臨床癥狀等多種指標(biāo)才能得出疾病診斷的結(jié)論。常見的自身免疫病有以下幾種：系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種與自身免疫系統(tǒng)密切相關(guān)的慢性、多臟器受累的炎癥性疾病。該病往往在女性人群中高發(fā)。常見的臨床表現(xiàn)包括游走性關(guān)節(jié)疼痛和關(guān)節(jié)炎、面頰和其它皮膚部位的發(fā)疹、胸膜炎和心包炎、腎臟或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病變以及血液系統(tǒng)中的血細(xì)胞減少等。臨床對(duì)于SLE的診斷需要密切結(jié)合臨床表現(xiàn)和血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果。對(duì)于處于活動(dòng)期癥狀嚴(yán)重的患者臨床通常使用皮質(zhì)類固醇、羥化氯喹和一些免疫抑制劑進(jìn)行治療。約70-90％的患者為女性(以育齡期女性為主)。SLE在黑人和亞洲人中的發(fā)病率要高于白人。該病可以在任何年齡段發(fā)病，包括新生兒。由于臨床醫(yī)生對(duì)于SLE的診斷越來越重視，因此每年報(bào)道的病例數(shù)持續(xù)上升。在一些國家，SLE的發(fā)病率甚至超過類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)。環(huán)境因素引起的自身免疫反應(yīng)，是遺傳易感人群發(fā)病的一個(gè)主要因素。由于SLE的臨床表現(xiàn)具有多臟器累及的特點(diǎn)，因此臨床往往混淆SLE與其它風(fēng)濕性疾病的診斷。例如：早期具備明顯關(guān)節(jié)癥狀的SLE患者，可能被誤診為類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。可能與SLE發(fā)生誤診的疾病還包括，混合結(jié)締組織病(MCTD)、風(fēng)濕樣多關(guān)節(jié)炎，多發(fā)性肌炎/皮肌炎、結(jié)節(jié)病和副瘤性綜合征等。值得注意的是，一些感染性疾病(例如細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和組織胞漿菌病等)也可能誤診為SLE，從而導(dǎo)致不必要的免疫抑制治療。因此，實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)抗體檢測(cè)是區(qū)分SLE與其它臨床疾患的重要依據(jù)。臨床實(shí)驗(yàn)室針對(duì)SLE患者的檢測(cè)主要包括：血清抗核抗體(ANA)檢測(cè)；全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(CBC)；尿液分析；和肝腎器官生化指標(biāo)的檢測(cè)。綜合所有這些指標(biāo)，才能得出診斷結(jié)果。干燥綜合征干燥綜合征是一種表現(xiàn)為眼干和口干的自身免疫性疾病。該病最大的特點(diǎn)是在產(chǎn)生淚液和唾液的淚腺和腮腺腺體部位出現(xiàn)明顯的炎癥，而上述部位的炎癥直接導(dǎo)致口干和眼干等臨床癥狀和表現(xiàn)。干燥綜合征根據(jù)臨床表現(xiàn)，可分為原發(fā)性干燥綜合征和繼發(fā)性干燥綜合征兩種。前者僅有口干和眼干癥狀，而后者則合并有其它混合結(jié)締組織病，例如：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡或硬皮病等。臨床針對(duì)干燥綜合征的診斷包括眼干和口干檢測(cè)。目前，在眼科中眼科醫(yī)生已經(jīng)有更加先進(jìn)的檢測(cè)方法可以完成眼部干燥的檢測(cè)。干燥綜合征患者的唾液腺部位可能腫大變硬。唾液腺炎癥的檢查可以通過放射性核醫(yī)學(xué)掃描完成。同時(shí)，唾液腺分泌唾液量的減少還可以通過唾液流動(dòng)測(cè)試完成。而唾液腺組織活檢結(jié)果對(duì)于干燥綜合征具有更高的診斷價(jià)值。干燥綜合征患者的一個(gè)典型臨床表現(xiàn)是在體內(nèi)產(chǎn)生多種自身抗體，這些自身抗體可以通過血清學(xué)方法完成檢測(cè)。其中尤其以SSA和SSB抗體、類風(fēng)濕因子、抗甲狀腺抗體等最為典型，這些抗體在大部分干燥綜合征患者體內(nèi)均可檢測(cè)到。另外，干燥綜合征患者還可能出現(xiàn)血細(xì)胞減少(貧血)和血沉加快等臨床表現(xiàn)。混合結(jié)締組織病混合結(jié)締組織病最早報(bào)道于1972年。由于該病患者在臨床上同時(shí)具備系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬皮病和多發(fā)性肌炎等三種疾病的臨床表現(xiàn)，因此該病在當(dāng)時(shí)被認(rèn)為是上述三種疾病的重疊征。該病的一個(gè)典型臨床表現(xiàn)是患者血清中可以檢測(cè)到高滴度的抗核抗體和抗RNP抗體。目前，對(duì)于混合結(jié)締組織病的明確診斷主要通過臨床癥狀表現(xiàn)，并結(jié)合高滴度的抗核抗體和抗RNP抗體。在MCTD患者體內(nèi)很少出現(xiàn)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡高度特異的抗dsDNA和與硬皮病高度特異的抗Scl-70抗體。硬皮病硬皮病，又稱系統(tǒng)性硬化癥，是以局限性或彌漫性皮膚及內(nèi)臟器官結(jié)締組織纖維化、硬化及萎縮為特點(diǎn)的結(jié)締組織病，其主要特點(diǎn)為皮膚、滑膜、骨骼肌、血管和食道出現(xiàn)纖維化或硬化。有些內(nèi)臟器官，如肺、心臟、腎臟和大小動(dòng)脈也可有類似的病變。本病的嚴(yán)重程度不等，輕者只有手指和臉部皮膚受累(局限型)，早期表現(xiàn)為面部、手和(或)足腫脹，皮膚發(fā)緊，不能提起，狀如臘腸，又稱臘腸樣指，皮膚逐漸增厚，皮紋和皺折消失，晚期皮膚變硬萎縮，面部皮膚菲薄，表情呆板，鼻子變尖，耳輪變薄，張口受限，像個(gè)面具—樣。大多數(shù)病人常以雷諾現(xiàn)象為本病最先出現(xiàn)的癥狀，有些病人在雷諾現(xiàn)象10余年后才有皮膚改變。1/3的病人可有關(guān)節(jié)痛和關(guān)節(jié)發(fā)僵，少數(shù)有肯定的關(guān)節(jié)炎。另外有些病人表現(xiàn)為嚴(yán)重的肌肉乏力，與肌炎不易鑒別。部分病人病情逐漸進(jìn)展，往往經(jīng)過很長(zhǎng)時(shí)間，有人長(zhǎng)達(dá)數(shù)十年，才出現(xiàn)特殊內(nèi)臟受累的臨床表現(xiàn)。嚴(yán)重的硬皮病病人可有廣泛的皮膚改變，累及胸腹部和背部(彌漫型)。彌漫型硬皮病病人可有內(nèi)臟受累，部分病人發(fā)現(xiàn)患病時(shí)已有腎臟、心臟等重要器官受累，病情進(jìn)展兇險(xiǎn)，甚至危及生命。多發(fā)性肌炎/皮肌炎多發(fā)性肌炎和皮肌炎是一種自身免疫性結(jié)締組織疾病。因?yàn)槭欠腔撔匝仔约〔。钥股刂委煙o效。多發(fā)性肌炎主要表現(xiàn)為肢體近端如胯部、大腿、肩、頸等部位的肌痛及肌無力。肌炎病人如同時(shí)伴有特征性皮疹，則稱為皮肌炎。其實(shí)多發(fā)性肌炎和皮肌炎的損害并不僅限于皮膚和肌肉，也可損及內(nèi)臟系統(tǒng)。該病屬少見病。在英美國家發(fā)病率為0.1/10萬～0.6/10萬，日本約為0.5/10萬。皮肌炎男女之比約為1：21，多發(fā)性肌炎約為1：25，在伴有其他結(jié)締組織病的多發(fā)性肌炎或皮肌炎患者中，男女之比為1：8，可見該病好發(fā)于女性。該病可發(fā)生在任何年齡，發(fā)病率年齡分布呈雙峰型，前峰10～14歲，后峰在50歲左右，伴發(fā)惡性腫瘤的病人年齡在60歲左右，也就是說老年多發(fā)性肌炎或皮肌炎病人應(yīng)警惕腫瘤。這也就是為什么老年性肌炎或皮肌炎病人住院各項(xiàng)檢查眾多的原因所在。合并有系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和硬皮病的多發(fā)性肌炎或皮肌炎病人年齡多在35歲左右。本病散發(fā)，無傳染性，一家中多人發(fā)病的情況很少見。癌胚抗原(CEA)是一種分子量為180-200kDa的多糖蛋白復(fù)合物。它存在2～6月齡的胎兒胃腸道組織和直、結(jié)腸癌細(xì)胞組織中，胃癌、胰腺癌、卵巢癌、食道癌等組織中也有存在。通常CEA被認(rèn)為是一種廣譜的腫瘤標(biāo)志物。CEA最常用于消化系統(tǒng)的癌癥，如結(jié)腸、直腸、胃、肝臟和胰腺等器官。此外，還用于乳癌、肺癌和前列腺癌。測(cè)定血清中的CEA含量，對(duì)惡性消化道腫瘤治療前、后和定期連續(xù)性的動(dòng)態(tài)含量變化的觀察及判斷預(yù)后具有一定的參考價(jià)值。CEA含量與腫瘤大小、有無轉(zhuǎn)移存在一定關(guān)系，當(dāng)發(fā)生肝轉(zhuǎn)移時(shí)，CEA的升高尤為明顯。此外，CEA輕度增加也見于某些良性消化道疾病如本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括熒光素標(biāo)記的抗原、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體和包被有抗所述熒光素的抗體的磁微粒；其中，所述堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體為堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgG抗體、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgM抗體或堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgA抗體。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括熒光素標(biāo)記的抗原、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體和包被有抗所述熒光素的抗體的磁微粒；其中，所述堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體為堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgG抗體、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgM抗體或堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgA抗體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述熒光素為FITC。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述抗原為自身免疫疾病抗原或腫瘤相關(guān)抗原。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述自身免疫疾病抗原為SS-A、核糖體P蛋白、SS-B、nRNP/Sm、Sm、著絲點(diǎn)、scl-70、Jo-1、雙鏈DNA、組蛋白、核小體、線粒體2型、環(huán)瓜氨酸肽、髓過氧化物酶、蛋白酶3、腎小球基底膜、抗肝腎微粒體1型、肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1、可溶性肝抗原、PM-SCL、PCNA和類風(fēng)濕因子中的一種。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述熒光素標(biāo)記的抗原為液體，且所述堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgG抗體、所述堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgM抗體和所述堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgA抗體均為液體。6.一種磁微粒化學(xué)發(fā)光...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張念林，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京久峰潤達(dá)生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：北京;11
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